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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)批发在内的一系列ELISA试剂盒产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)批发
编号:ZN2199
规格:96T
英文名:Human Growth hormone receptor ELISA Kit
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中GHR的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是亲和纯化的GHR多克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的GHR呈正相关。
检测指标:Growth hormone receptor;GH receptor;GHR
检测范围:156pg/ml~10,000pg/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<5pg/ml
产品组成:
组分 | 规格 | 数量 |
预包被抗人GHR抗体的96孔板 | 96T | 1板 |
重组人GHR标准品(冻干) | 10ng/管 | 2管 |
生物素标记抗人GHR(100X) | 130μl | 1管 |
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) | 130μl | 1管 |
样品稀释液 | 30ml | 1瓶 |
抗体稀释液 | 12ml | 1瓶 |
ABC稀释液 | 12ml | 1瓶 |
TMB显色液 | 10ml | 1瓶 |
TMB终止液 | 10ml | 1瓶 |
洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1瓶 |
封板膜 | | 4张 |
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)。
需自备的仪器和试剂:1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.恒温箱
4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,Z好用多通道移液器。
5.干净的试管和Eppendof管。
6.用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍,成1X洗涤缓冲液。
样品稀释的一般原则:用户须估计样品待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同,分别采取不同的稀释方案:
高:指待测因子在10~100ng/ml,一般按1:100稀释,297μl样品稀释液加3μl样品。
中:指待测因子在1~10ng/ml,一般按1:10稀释,225μl样品稀释液加25μl样品。
低:指待测因子在15.6~1000pg/ml,按1:2稀释,100μl样品稀释液加100μl样品。
特低:指待测因子≤15.6pg/ml,样品一般不做稀释,或按1:2稀释。
以上方案仅供参考,样品的稀释应有详细记录。
参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
浓度(pg/ml) | 0 | 156 | 312 | 625 | 1250 | 2500 | 5000 | 10000 |
OD值 | 0.017 | 0.036 | 0.065 | 0.098 | 0.174 | 0.408 | 1.076 | 2.127 |
关于
北京现货人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)批发的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以Z饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
ZN2777 小鼠OX40配体(OX40L)检测试剂盒 Mouse OX40 ligand ELISA Kit
ZN2180 人Ficolin-3(FCN3)检测试剂盒(ELISA方法) Human Ficolin-3 ELISA Kit
ZN2500 人淋巴细胞趋化因子(XCL1)检测试剂盒 Human Lymphotactin ELISA Kit
ZN2382 人R-spondin4(Rspo4)检测试剂盒(ELISA方法) Human R-spondin-4 ELISA Kit
ZN2702 小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)检测试剂盒 Mouse Macrophage colony-stimulating factor ELISA Kit
ZN2105 人癌胚抗原CEA检测试剂盒(ELISA方法) Human Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5 ELISA Kit
ZN2904 大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)检测试剂盒 Rat Monocyte chemoattractant protein 3 ELISA Kit
ZN2307 人LRIG3蛋白检测试剂盒(ELISA方法) Human Leucine-rich repeats and immunoglobulin-like domains protein 3 ELISA Kit
ZN2627 小鼠胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)检测试剂盒 Mouse Glial cell line-derived neurotrophic factor ELISA Kit
ZN2030 人β淀粉样蛋白前体ELISA试剂盒 Human Amyloid beta A4 protein ELISA Kit
ZN2829 大鼠肾损伤分子1(KIM-1)检测试剂盒 Rat Kidney injury molecule 1 ELISA Kit
ZN2232 人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)检测试剂盒(ELISA方法) Human Insulin-like growth factor-binding protein 4 ELISA Kit
ZN2552 小鼠CD23检测试剂盒(ELISA方法) Mouse Cluster of differentiation 23 ELISA Kit
ZN2873 大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)检测试剂盒 Rat Intercellular adhesion molecule 1 ELISA Kit
ZN2755 小鼠血清淀粉样蛋白P(SAP)检测试剂盒 Mouse Serum amyloid P-component ELISA Kit
ZN2158 人上皮细胞粘附分子(EpCAM)检测试剂盒(ELISA方法) Human Epithelial cell adhesion molecule ELISA Kit
ZN2478 人TNF可溶性受体1(sTNF-R1)检测试剂盒 Human Solube tumor necrosis factor receptor 1 ELISA Kit
北京现货人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)批发关键词:Human Growth hormone receptor ELISA Kit,ELISA方法,GHR,ZN2199,人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)
·Osteocalcin mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1051
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:rat,dog
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液2ml;
3.Osteocalcin mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml;
4.封闭液5ml;
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
Osteocalcin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
北京现货人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)批发关键词:Human Growth hormone receptor ELISA Kit,ELISA方法,GHR,ZN2199,人生长激素受体(GHR)检测试剂盒(ELISA方法)
ZN2210 人肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)检测试剂盒(ELISA方法) Human Heparin-binding EGF-like growth factor ELISA Kit
ZN2530 小鼠组织蛋白酶D(Cathepsin D)检测试剂盒 Mouse Cathepsin D ELISA Kit
ZN2850 大鼠CD44检测试剂盒 Rat Cluster of differentiation ELISA Kit
ZN2733 小鼠氧磷酯酶1(PON1)检测试剂盒 Mouse Paraoxonase ELISA Kit
ZN2136 人半胱*酸蛋白酶YZ剂C(CysC)ELISA试剂盒 Human Cystatin C ELISA Kit
ZN2456 人组织因子(凝血因子Ⅲ)检测试剂盒 Human Tissue factor ELISA Kit
ZN2776 小鼠RANK配体(RANKL)检测试剂盒 Mouse Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand ELISA Kit
ZN2658 小鼠白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)检测试剂盒 Mouse Interleukin-1 receptor antagonist ELISA Kit
ZN2061 人趋化因子CCL13(MCP-4)检测试剂盒(ELISA方法) Human C-C motif chemokine 13 ELISA Kit
ZN2381 人R-spondin3(Rspo3)检测试剂盒(ELISA方法) Human R-spondin-3 ELISA Kit
ZN2263 人白介素29(IL-29)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-29 ELISA Kit
ZN2583 小鼠趋化因子CXCL16检测试剂盒 Mouse Chemokine(C-X-C motif) ligand 16 ELISA Kit
ZN2903 大鼠血小板膜糖蛋白Ⅳ(GPⅣ)检测试剂盒 Rat Cluster of Differentiation 36 ELISA Kit
ZN2306 人赖*酰氧化酶样蛋白2(LOXL2)检测试剂盒(ELISA方法) Human Lysyl Oxidase Like-2 Protein ELISA Kit
ZN2188 人弗林蛋白酶(Furin)检测试剂盒(ELISA方法) Human Furin ELISA Kit
ZN2508 小鼠活化素受体样激酶1(ALK-1)检测试剂盒 Mouse Activin receptor-like kinase 1 ELISA Kit
ZN2828 大鼠酪*酸激酶受体TrkA检测试剂盒 Rat Neurotrophic tyrosine kinase receptor 1 ELISA Kit
ZN2231 人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)检测试剂盒(ELISA方法) Human Insulin-like growth factor-binding protein 3 ELISA Kit
ZN2113 人软骨寡聚基质蛋白(COMP)ELISA试剂盒 Human Cartilage oligomeric matrix protein ELISA Kit
ZN2433 人腱糖蛋白C(Tenascin-C)检测试剂盒 Human Tenascin C ELISA Kit
ZN2754 小鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)检测试剂盒 Mouse Serum amyloid A protein ELISA Kit
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