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北京百奥莱博专业生产供应小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒,我公司销*(代"售")全品类的ELISA试剂盒,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒
编号:ZN2632
规格:96T
英文名:Mouse Gremlin-1 ELISA Kit
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液、细胞培养上清中Gremlin-1的含量。预先包被的抗体和检测相抗体都是近纯度的Gremlin-1亲和纯化多克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成的黄色。颜色的深浅和样品中的Gremlin-1呈正相关。
Gremlin是BMP拮抗剂家族的新成员,在脊椎动物肢体的胚胎发育和肾脏、肺的形态形成过程中起重要的作用.Gremlin分为Gremlin1、Gremlin2、Gremlin3三种,结构中均具有半胱*酸结,Gremlin通过与BMP2和BMP4的直接结合阻断BMP作用的信号通路。
检测指标:Gremlin-1;Gremlin1
检测范围:93.8pg/ml~6ng/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<10pg/ml
产品组成:
组分 | 规格 | 数量 |
预包被抗小鼠Gremlin-1抗体的96孔板 | 96T | 1板 |
重组小鼠Gremlin-1标准品(冻干) | 10ng/管 | 2管 |
生物素标记抗小鼠Gremlin-1(100X) | 130μl | 1管 |
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) | 130μl | 1管 |
样品稀释液 | 30ml | 1瓶 |
抗体稀释液 | 12ml | 1瓶 |
ABC稀释液 | 12ml | 1瓶 |
TMB显色液 | 10ml | 1瓶 |
TMB终止液 | 10ml | 1瓶 |
洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1瓶 |
封板膜 | | 4张 |
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)
有效期: 6个月(4℃);12个月(-20℃)
需自备的仪器和试剂:1.标准规格酶标仪。
2.自动洗板机。
3.恒温箱
4.系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,Z好用多通道移液器。
5.干净的试管和Eppendof管。
6.用去离子水将25X洗涤缓冲液稀释25倍,成1X洗涤缓冲液。
注意事项:1.使用前TMB显色液应为无色透明溶液,若发现颜色异常,请及时与我司联*(代"系")。
2.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
3.要严格避免操作过程中酶标板干燥。干燥会使酶标板上生物成份迅速失活。
4.为免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和试管。
5.禁止混用不同批次试剂盒内的试剂。
6.本公司提供的96孔酶标板是单条可拆型酶标板,用户可按需求使用,剩余的酶标板请按保存条件贮存。
7.揭封板膜和覆盖封板膜时应避免用力过大导致液体溅出。
参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
浓度(pg/ml) | 0 | 93.7 | 187.5 | 375 | 750 | 1500 | 3000 | 6000 |
OD值 | 0.002 | 0.123 | 0.245 | 0.485 | 0.907 | 1.482 | 2.050 | 2.385 |
欲咨询购买
小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供Z全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·PTMA/Prothymosin mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1194
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:hμman,rat,mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.PTMA/Prothymosin mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
PTMA/Prothymosin的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Gremlin-1 ELISA Kit,小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法),ZN2632
ZN2445 人转化生长因子βⅡ型受体(TGFBR2)检测试剂盒 Human TGF-beta receptor type 2 ELISA Kit
ZN2765 小鼠肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)检测试剂盒 Mouse Tumor necrosis factor receptor 1 ELISA Kit
ZN2168 人胎球蛋白B(Fetuin-B)检测试剂盒(ELISA方法) Human Fetuin B ELISA Kit
ZN2050 人碳酸酐酶9(CA9)ELISA试剂盒 Human Carbonic anhydrase 9 ELISA Kit
ZN2370 人组织型纤溶酶原激活物(tPA)检测试剂盒 Human Tissue-type plasminogen activator ELISA Kit
ZN2690 小鼠基膜聚糖(Lumican)检测试剂盒 Mouse Lumican ELISA Kit
ZN2093 人CD36(GPIV)ELISA试剂盒 Human Platelet glycoprotein IV ELISA Kit
ZN2892 大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)检测试剂盒 Rat Monocyte chemoattractant protein 1 ELISA Kit
ZN2295 人层粘连蛋白(Laminin)检测试剂盒(ELISA方法) Human Laminin ELISA Kit
ZN2615 小鼠纤连蛋白(Fibronectin)检测试剂盒 Mouse Fibronectin ELISA Kit
ZN2018 人AGRP检测试剂盒(ELISA方法) Human Agouti-related protein ELISA Kit
ZN2817 大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)检测试剂盒 Rat Glial cell line-derived neurotrophic factor ELISA Kit
ZN2221 人细胞间粘附分子2(ICAM-2)检测试剂盒(ELISA方法) Human Intercellular adhesion molecule 2 ELISA Kit
ZN2541 小鼠趋化因子CCL6检测试剂盒(ELISA方法) Mouse Chemokine(C-C motif) ligand 6 ELISA Kit
ZN2423 人鞘*醇激酶1(SphK1)检测试剂盒(ELISA方法) Human Sphingosine kinase 1 ELISA Kit
ZN2743 小鼠晚期糖基化终产物受体(RAGE)检测试剂盒 Mouse Receptor for Advanced Glycation Endproducts ELISA Kit
ZN2146 人DLL1检测试剂盒(ELISA方法) Human Delta-like protein 1 ELISA Kit
ZN2466 人B细胞成熟抗原(BCMA)检测试剂盒 Human B-cell maturation protein ELISA Kit
小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒关键词:Mouse Gremlin-1 ELISA Kit,小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法),ZN2632
ZN2071 人趋化因子CCL24(Eotaxin-2)检测试剂盒(ELISA方法) Human C-C motif chemokine 24 ELISA Kit
ZN2870 大鼠子宫珠蛋白(Uteroglobin)检测试剂盒 Rat secretoglobin family 1A member 1 ELISA Kit
ZN2273 人白介素6受体α(IL-6Rα)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-6 receptor subunit alpha ELISA Kit
ZN2593 小鼠Notch信号通路配体DLL4检测试剂盒 Mouse Delta-like ligand 4 ELISA Kit
ZN2913 大鼠生长分化因子15(GDF-15)检测试剂盒 Rat Growth/differentiation factor 15 ELISA Kit
ZN2795 小鼠金属蛋白酶组织YZ因子1(TIMP-1)检测试剂盒 Mouse Tissue inhibitor of metalloproteinases 1 ELISA Kit
ZN2198 人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)检测试剂盒(ELISA方法) Human Glial cell line-derived neurotrophic factor ELISA Kit
ZN2518 小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)检测试剂盒 Mouse Brain-derived neurotrophic factor ELISA Kit
ZN2839 大鼠基膜聚糖(Lumican)检测试剂盒 Rat Lumican ELISA Kit
ZN2721 小鼠骨保护素(OPG)检测试剂盒 Mouse Osteoclastogenesis inhibitory factor ELISA Kit
ZN2124 人趋化因子CXCL10检测试剂盒(ELISA方法) Human C-X-C motif chemokine 10 ELISA Kit
ZN2444 人转化生长因子β诱导蛋白IG-H3检测试剂盒 Human Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3 ELISA Kit
ZN2326 人基质金属蛋白酶2(MMP-2)检测试剂盒(ELISA方法) Human matrix metallopeptidase 2 ELISA Kit
ZN2646 小鼠白介素1β(IL-1β)检测试剂盒 Mouse Interleukin-1 beta ELISA Kit
ZN2049 人癌抗原125(CA125)ELISA试剂盒 Human Cancer Antigen 125 ELISA Kit
ZN2369 人脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)检测试剂盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2 ELISA Kit
ZN2251 人白介素18(IL-18)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-18 ELISA Kit
ZN2571 小鼠神经细胞粘附分子CHL1检测试剂盒 Mouse Close homologue of L1 ELISA Kit
ZN2891 大鼠白介素13(IL-13)检测试剂盒 Rat Interleukin 13 ELISA Kit
ZN2294 人β-Klotho蛋白检测试剂盒(ELISA方法) Human Klotho beta ELISA Kit
北京百莱博科技有限公司专业生产小鼠ELISA试剂盒产品,欢迎来电咨询选购小鼠Gremlin-1检测试剂盒(ELISA方法) 小鼠ELISA试剂盒。