血清microRNA分离试剂盒 RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

血清microRNA分离试剂盒 RNA纯化由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多血清microRNA分离试剂盒等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：血清microRNA分离试剂盒 RNA纯化
编号：ALH601
规格：50次
英文名：Serum microRNA Extraction Kit
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解血清血浆RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA在高浓度乙醇下吸附于离心柱内特殊硅基质膜， 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除， 低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15～30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和异丙醇或者乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血清、血浆样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题

产品组分：
Lysis buffer————避光50 ml
Wash Solution 1————12 ml（次使用前加入28ml 无水乙醇）
Wash Solution 2/3————10 ml（次使用前加入42ml 无水乙醇）
RNase-free H2O————10 ml
吸附柱和收集管————50 套

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.特殊的裂解液配方，可以处理更多的血清/血浆样品。
4.多次柱漂洗确保高纯度，可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项
1. 次使用前请先在Wash Solution 1 瓶和Wash Solution 2/3 瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 除说明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇，*仿。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. RNA 纯度及浓度检测：
一般情况下通过测量OD260 值可以知道RNA 产量，测量OD260/OD280 比值可以是衡量蛋白质污染程度的指标之一，但是由于血清/血浆的RNA 含量特别低，已经低于分光光度计测量的下限，无法测量准确，因此一般无法通过测量OD 值或者比值的方法来判断纯度或者浓度，只能通过下游做荧光定量RT-PCR 来判断产量。同时无细胞的血清/血浆中的RNA 主要是小于100 nt 的小RNA，因此传统的电泳检测RNA 完整性并不适用于血清/血浆RNA。

储存条件：室温，有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)

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·高纯酵母质粒大量提取试剂盒
编号：ALH093
英文名称：Yeast high purity plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
规格：10次
本试剂盒适用于大规模高纯度酵母质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞并结合破壁酶特异消化酵母细胞壁，能在1小时内从酵母培养液中分离出高纯度质粒DNA。酵母收集后,加入破壁酶去除细胞壁后,然后碱裂法裂解细胞，离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除， 低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次)：
RNaseA(10mg/ml)—————————0.75ml
破壁酶—————————-————1g
溶液YP1—————————————75ml
溶液YP2—————————————75ml
溶液YP3—————————————110ml
去蛋白液PD-———————————100ml
漂洗液WB-————————————25ml×2
洗脱缓冲液EB-——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)-——————10套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成，使用转速可以达到至少6000g，带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液YP3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 通常酵母质粒拷贝数都很低，高拷贝质粒得率一般为每5 ml 培养物提取1μg左右的质粒。用于下游试验时通常建议使用量为：1-5μl用做PCR 模板;5-10μl 用于转化大肠杆菌,选择GX率的感受态细胞。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成， 与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 用户需要自备Sorbitol buffer( 1M 山梨醇， 0.1M Na2EDTA，14 mMβ-巯基乙醇)。配制方法：在600 ml 去离子水里面溶解182.2 克山梨醇，加入200 ml 0.5 M Na2EDTA (pH 8.0) ，不需要调节PH 值，定容到1L，4℃保存。临用前加0.1%β-巯基乙醇(商品化的β-巯基乙醇摩尔浓度一般为14M)。
6. 菌体浓度检测一般OD600值为1的时候,酿酒酵母细胞是1-2×10^7cells/ml，由于菌种和分光度计不同即使同样细胞数量OD值变化也很大，以上仅供参考。
7. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保批pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：酵母质量大量制备试剂盒


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·miRNA荧光定量PCR检测试剂盒
编号：ALH190
英文名称：miRNA fluorescent quantitative PCR detection kit
规格：50μl×50次
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。（该试剂盒须与miRNA对应cDNA链合成试剂盒（ALH189）配套使用。）

试剂盒组分(25次)：
2 x miRNA qPCR Mix(With Sybr Green)———————1.25 ml
Reverse primer(10μM)——————————————55μl

需自备的试剂：
1. 分子生物学实验级别的水（无核酸酶）
2. 待检测miRNA对应的qPCR上游引物（Forward primer）

Forward Primer设计原则：
1. 遵循引物设计的Z普遍原则。
2. 以成熟的miRNA 序列为基础，将U替换成T，这是Z基础和Z简单的设计方法。
3. 试剂盒中提供的下游引物的Tm 值为65℃，设计上游引物的Tm 值要尽量保证在65℃左右。
4. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过低，可以在引物的5’端添加几个碱基（Z好为G或C碱基）；也可以在’3端添加1 个或几个A 碱基；或者5’端和3’端同时修饰。
5. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。

注意事项：
1. miRNA 链cDNA 的加入量不要超过real time PCR 体积1/10。
2. 对于特殊的检测体系中，高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA（10倍或者100倍）。
3. 本品中含有荧光染料Sybr Green，I保存本品或配制PCR 反应液时应避免强光照射。
4. 2×miRNA qPCR Mix不含参比染料ROX，客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

本制品别名：microRNA荧光定量PCR试剂盒|microRNA荧光qPCR试剂盒|miRNA荧光定量检测试剂盒


血清microRNA分离试剂盒 RNA纯化关键词：血清miRNA分离试剂盒,血清microRNA分离试剂盒,血清miRNA提取试剂盒,血清miRNA纯化试剂盒

SY0761 DAB显色试剂盒蓝色(IHC) DAB Peroxidase Substrate Kit for IHC (Blue Color)
SY0072 MTF1-Luc荧光素酶报告基因质粒 MTF1 luciferase reporter plasmid
BTN131088 荧光素(FITC)标记亲和素 FITC-Avidin
KFS048 AMCA标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with AMCA-Labeled Goat Anti-Mouse IgG
SY0275 X-Gal
YT361 ATP检测试剂盒 ATP Assay Kit
BTN120101 谷胱甘肽琼脂糖(GST-琼脂糖) Glutathione Agarose
HR0031 细胞质膜蛋白提取试剂盒 Cell plasma membrane protein extraction kit
YT624 40% Acr-Bis (39:1) acrylamide-bisacrylamide (39:1)
YT007 RNase A (10mg/ml) Ribonuclease A
BTN3280 电泳级SYBR Green I SYBR GreenⅠ, electrophoretic grade
SV1405 通用 miRNA 克隆接头
SV0033 AhdI限制性内切酶 AhdI Restriction Endonuclease
KFS293 Cisplatin (DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂) Cisplatin

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