高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai
编号：ALH609
规格：1ml|5ml
英文名：Fast&HiFi PCR MasterMix
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本品包含快速高保真DNA Polymerase、dNTPs和优化的反应缓冲液，浓度为2×。使用时只需加入模板、引物，并补足水至Mix终浓度为1×即可。所含聚合酶来自于基因工程改造的pfu，大大提高了扩增速度、保真性和产量。本产品是非长片段超保真快速扩增的产品。本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。

产品特点：
1. 扩增速度快：延伸速度可以达到2～4kb/min，是pfu的4～8倍。
2. 扩增产量高：一般PCR产物量比传统pfu产量高50%-
3. 优异保真性：保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变落。
4. 扩增长度指标和pfu一致，可以完全替代pfu进行快速高保真扩增，但不建议用于pfu无法扩增的长片段。以复杂基因组DNA为模板适合扩增不超过3kb左右的产物，以简单基因组、质粒和噬菌体DNA为模板适合扩增不超过6kb左右的产物。

注意事项
1.本系统扩增速度快，质粒和简单基因组等简单模版可采用15～20秒/kb,复杂模版如人类基因组可以采用30～45秒/kb。
2.对于GC含量很高的模版，预变性和变性温度可以提高到98℃，本品聚合酶耐热性强，98℃对聚合酶活性无影响。
3.如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%～8%，按照1%梯度增加摸索浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1～1.7 M。并采用降落PCR(Touchdown PCR)。

储存条件：-20℃，有效期24个月。

本品别名：高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)|2×PCR MasterMix

高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·植物大量DNA快速提取试剂盒(CTAB法)
编号：ALH603
英文名称：Plant DNA Rapid Extraction Kit
规格：10次
本试剂盒适用于快速大量提取植物基因组DNA。改进的经典CTAB植物DNA抽提液内（添加多种针对植物特点的多糖、多酚去除成份）迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，*仿抽提后通过离心清除多糖、多酚和蛋白质，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 进一步将多糖、多酚和细胞代谢物、蛋白等杂质去除，低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份（10次）：
裂解液PL————————100ml
结合液PQ————————30ml×2
YZ物去除液IR—————100ml
漂洗液WB————————25ml×2
洗脱缓冲液EB——————15ml×2
吸附柱AC————————10个
收集管（2ml）—————10个

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
4.数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30 kb -50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到9,000xg，可容纳50ml离心管的台式离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到65℃备用。
3. 需要自备*仿/异戊醇（体积比24：1混合）、无水乙醇和β-巯基乙醇。
4. 结合液PQ 和YZ物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 不同来源的植物组织材料中提取DNA 的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱DNA应该保存在－20℃。DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：植物DNA快速大量提取试剂盒


高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai关键词：高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料),2×PCR MasterMix


·血浆miRNA提取试剂盒
编号：ALH067
英文名称：Plasma microRNA Extraction Kit
规格：50次
本试剂盒采用独特的裂解液迅速直接裂解血清血浆RNA酶，强烈有机抽提去除蛋白和DNA，RNA包括微小分子RNA在高浓度乙醇下吸附于离心柱内特殊硅基质膜， 再通过一系列特殊漂洗液快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质进一步去除， 低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15～30核苷酸左右大小RNA（包括siRNA和miRNA）的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收，酚/胍抽提和异丙醇或者乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA，对于血清、血浆样本更是由于其自身特点更难提取。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题

产品组分：
Lysis buffer————避光50 ml
Wash Solution 1————12 ml（次使用前加入28ml 无水乙醇）
Wash Solution 2/3————10 ml（次使用前加入42ml 无水乙醇）
RNase-free H2O————10 ml
吸附柱和收集管————50 套

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3.特殊的裂解液配方，可以处理更多的血清/血浆样品。
4.多次柱漂洗确保高纯度，可用于RNAi，RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项
1. 次使用前请先在Wash Solution 1 瓶和Wash Solution 2/3 瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 除说明外，所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇，*仿。
4. Lysis buffer 和Wash Solution 1 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. RNA 纯度及浓度检测：
一般情况下通过测量OD260 值可以知道RNA 产量，测量OD260/OD280 比值可以是衡量蛋白质污染程度的指标之一，但是由于血清/血浆的RNA 含量特别低，已经低于分光光度计测量的下限，无法测量准确，因此一般无法通过测量OD 值或者比值的方法来判断纯度或者浓度，只能通过下游做荧光定量RT-PCR 来判断产量。同时无细胞的血清/血浆中的RNA 主要是小于100 nt 的小RNA，因此传统的电泳检测RNA 完整性并不适用于血清/血浆RNA。

储存条件：室温，有效期6个月。(lysis buffer需4℃避光保存)

本制品别名：血浆microRNA提取试剂盒|血浆microRNA分离试剂盒|血浆microRNA纯化试剂盒|血浆miRNA分离试剂盒|血浆miRNA纯化试剂盒|血浆总RNA提取试剂盒


高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料)品Pai关键词：高保真快速PCR MasterMix(含红色示踪染料),2×PCR MasterMix


·10mM dNTP混合溶液
编号：ALH286
英文名称：10mM dNTPs Solution
规格：1ml|5ml
本品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔混合液，浓度均为10mM，PCR反应时,不用稀释可直接使用，PCR反应时的标准使用量为每50μl反应液使用1μl（终浓度200μM）

储存条件：-20℃。

本制品别名：10mM dNTPs

·酵母基因组DNA大量提取试剂盒
编号：ALH156
英文名称：Yeast DNA Massive Extraction Kit
规格：10次
本试剂盒用于快速的从酵母中大量提取基因组DNA。在针对酵母细胞特点配制的酵母裂解液作用下， 酵母细胞被裂解释放出基因组DNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份：
酵母裂解液——————100ml×2
蛋白沉淀液——————70ml
DNA溶解液 ——————30ml

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂。
2.快速，简捷，整个过程可在1个小时内完成。
3.结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。

操作步骤：
1. 吸取60ml-70ml 酵母培养物到一个100ml 离心管；2,500 x g 离心2 分钟，尽可能弃上清，必要时候可以用枪吸去。
2. 高速涡旋振荡，打散重悬酵母细胞团。
3. 加入20 ml 酵母裂解液，涡旋振荡混匀，或者用1 毫升的枪头反复吹打混匀。酵母细胞的重悬分散对下一步裂解非常重要，必须充分分散重悬。
4. 将裂解物放置在70℃水浴15-30 分钟。
如果产量低，可以适当提高水浴温度和延长水浴时间，中间可以涡旋振荡混匀几次帮助裂解。
5. 冰上至少5 分钟使回复到室温。
6. 在回复到室温的裂解物内加入6.8 ml 蛋白沉淀液后，在涡旋振荡器上高速连续振荡混匀25 秒。混匀后可能见到一些小的蛋白团块。冰浴5 分钟。
7. 2,500 x g(可根据需要调整加大离心力)离心5 分钟。这时应该可以见到管底蛋白沉淀，也可能见到一些蛋白沉淀漂浮在液体表面。
8. 小心缓慢吸取上清到一个新的100ml 离心管中，不要吸到沉淀。吸取上清时，注意不要吸到管底的和漂浮在液体表面的蛋白沉淀。如果不小心将蛋白沉淀转入新的离心管中，可再次离心2 分钟后取上清。
9. 加入等体积的室温异丙醇，颠倒30 次混匀或者直到出现絮状DNA 沉淀（或者白色浑浊沉淀）。
10. 2,500 x g 离心5 分钟(可根据需要调整加大离心力)，在管底可以见到白色的DNA沉淀块，倒弃上清。
11. 加入20ml 70％乙醇，颠倒几次漂洗DNA 沉淀，2,500 x g 离心2 分钟， 倒去上清（注意不要把DNA 沉淀倒掉了），倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇，还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇，空气晾干沉淀几分钟。注意不要干燥过头，否则DNA极其难溶；也不能残留太多乙醇，否则乙醇可能YZ下游如酶切反应。
12. 加入1-3ml DNA 溶解液重新水化溶解DNA 沉淀，轻弹管壁混匀，可以放置在65℃温育30-60 分钟（不要超过一小时），也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。
13. 加入0.5-1ml RNase A（10mg/ml），颠倒混匀，37℃温育30－60 分钟去除残留RNA。该步骤主要作用为去除残留的RNA，如果残留RNA多，可以适当延长时间或者增加RNase A 用量。如果残留RNA 不影响实验，可略去该步骤。如果残留的RNA酶可能影响实验，也可以用等体积酚/*仿抽提去除，然后用标准的乙醇沉淀回收DNA。
14. DNA 可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：酵母DNA大量提取试剂盒|大龄酵母DNA提取试剂盒

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