特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销
编号:ALH089
规格:10次
英文名:A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
去蛋白液PD———————————100ml
漂洗液WB————————————2×25ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达到12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3和去蛋白液PD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。
本品别名:高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)|高纯质粒大量制备试剂盒
除北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销外,我公司正在打折促销以下产品:
·植物直接PCR试剂盒(无需提取DNA)
编号:ALH207
英文名称:Plant direct PCR Kit (without extraction of DNA)
规格:100次|500次
本试剂盒采用独特的裂解缓冲液快速裂解植物组织,释放的DNA无需纯化便可以作为模板,用高度耐YZ物的2×Direct PCR Mix扩增,扩增产物可直接上样电泳。适用于简单非多糖、多酚植物。操作简单,高通量筛选;一般扩增大小<2kb。
试剂盒组分(100次):
Stock A——————————0.5ml
Stock B——————————1ml
Buffer N-—————————5ml
2 × Direct PCR Mix————1ml
双蒸水(PCR级)———————10ml
注意事项:
1. 如果扩增条带较弱,可以适当增加减少模板加入量,裂解混合物模板一般可以在0.5μl-2μl内调节,但是注意一般不能超过4μl,加入太多,反而YZPCR反应。
2. 如果样品多酚多糖较多,扩增效果不理想,可在20 μl PCR反应体系加入2μl 10%PVP40改善效果。
3. 如果非特异扩增较多,可调整退火温度,或者适当增减模板用量。
4. 各溶液使用完毕后,应该立刻盖紧盖子,以免PH改变影响质量。
储存条件:-20℃。
本制品别名:植物免DNA提取直接PCR试剂盒
·植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
编号:ALH036
英文名称:Plant RNA Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取植物组织细胞总RNA,是在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上,又采用基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除,然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱,基因组DNA清除柱子同时吸附清除残留的DNA, 然后RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
本试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷,单个样品操作一般可在25分钟内完成,世界上Z简单快速的试剂盒。
3.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
4.独特研发成功基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留,得到的RNA一般不需要DNase消化,可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
5.适应性极其广泛,可以提取包括棉花、松针、冬青树叶、葡萄叶片、等100多种国内外试剂盒提取失败的样品。详细样品列表请参考公司主页产品介绍。
6.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.2,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
组份 | 20次 | 50次 |
裂解液RLT | 20ml | 50ml |
裂解液CLB | 8ml | 8ml |
裂解液RLT Plus | 10ml | 25ml |
去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
漂洗液RW | 5ml | 10ml |
RNase-freeH2O | 10ml | 10ml |
PLANTbalb | 2ml | 5ml |
基因组DNA清除柱和收集管 | 20套 | 50套 |
吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均可在室温完成(4℃离心也可以),使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇,研钵(可选)。
3. 样品处理量不要超过基因组清除柱DA和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或产量降低。开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时可使用较少的样品处理量,将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
4. 裂解液RLT和RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留(DNase 消化也无法做到无残留),本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁,请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前,直接在吸附柱上进行DNase I柱上消化处理。购买DNA酶柱上消化试剂盒前可先索取具体操作说明书。
6. 仔细阅读补充说明2,如果裂解液CLB效果好,可以联*(代"系")我们单独订购裂解液CLB,或者购买试剂盒的时候,指明将裂解液RLT换成裂解液CLB。
储存条件:室温,有效期6个月。
本制品别名:植物RNA抽提试剂盒|植物RNA纯化试剂盒
北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销关键词:高纯质粒大量制备试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)
·RNA提取试剂盒(富含纤维的组织)
编号:ALH031
英文名称:RNA extraction kit for fibrous tissue
规格:20次|50次
本试剂盒适用于快速提取心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织RNA,采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
试剂盒组份:
组份 | 20次 | 50次 |
裂解液RLT | 20ml | 50ml |
去蛋白液RW1 | 15ml | 40ml |
漂洗液RW | 5ml | 10ml |
RNase-free H2O | 20ml | 40ml |
蛋白酶K(40mg/ml)(可选) | 10mg | 20mg |
吸附柱和收集管 | 20套 | 50套 |
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 需要自备乙醇, β-巯基乙醇,一次性注射器,研钵,水浴锅等。
3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT中时不会被RNase降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜,在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留(一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA纯度及浓度检测:
完整性: RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。
储存条件:室温,有效期6个月
本制品别名:纤维类组织RNA提取试剂盒|心脏RNA提取试剂盒|骨骼肌RNA提取试剂盒|血管RNA提取试剂盒|气管RNA提取试剂盒|皮肤RNA提取试剂盒
北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销关键词:高纯质粒大量制备试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒,高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)
ALH257 M-MuLV反转录酶(不含RNase H活性) M-MuLV Reverse Transcriptase
BTN120700 利福平溶液 Rifampicin Solution
YT302 抗氧化剂Catechin hydrate(儿茶素水合物) (+)-Catechin hydrate
SY0217 GCNF-GFP报告基因质粒 GCNF GFP Reporter Plasmid
HR0940 辅酶Q10(Co10)检测试剂盒 Coenzyme Q10 (Co10) ELISA Kit
BTN131228 Tth核酸内切酶IV Tth Endonuclease IV
SY0014 BL21 (DE3)化学感受态细胞 BL21 (DE3) Chemically Competent Cell
SY0583 线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析) Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
KFS337 细胞活力(活死细胞染色)检测试剂盒(Calcein AM,PI法,适用于FACS、FM) "Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells
SV0158 BsaHI限制性内切酶 BsaHI Restriction Endonuclease
SY0366 20×MOPS-SDS 电泳缓冲液 20×MOPS-SDS Running Buffer
BTN70908 PAGE胶DNA回收试剂盒 PAGE DNArc
YT057 考马斯亮蓝染色液(常规法) Coomassie Blue Staining Solution
SV1035 瞬时粘性末端连接酶预混液 The instantaneous sticky ends of premixed liquid ligase
HR0123 石蜡包埋组织蛋白提取试剂盒 Paraffin embedded tissue protein extraction kit
BTN131048 胆酸* Sodium Cholate
YT409 T7 RNA聚合酶 T7 RNA Polymerase
ALH003 总RNA提取试剂(组织/细胞/液体样本) Total RNA extraction reagent From Tissue,Cell and Liquid Sample
KFS094 10×CAPS电转移缓冲液(不含甘*酸,适合大分子量蛋白转移)
BTN101203 1M Tris-HCl(pH6.5)(DNA级)
SY0118 AREB6-Luc荧光素酶报告基因质粒 AREB6 Luciferase Reporter Plasmid
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒)特价促销。
温馨提示:不可用于临床ZL。