北京现货RNA提取试剂怎么卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货RNA提取试剂怎么卖在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货RNA提取试剂怎么卖
编号：RFT034
规格：100ml
英文名：RNA Extraction Reagent
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本试剂是从细胞和组织中提取总RNA的即用型试剂，可以提取细菌、植物、动物组织和细胞以及新鲜血液的总RNA。提取的总RNA可用于Northern blot、RT-PCR、Dot blot、RNase保护分析等分子生物学实验。

产品特点：
1 分相明显：本试剂为粉红色，便于*仿分相后区分水相和有机相。
2 结果可靠：该试剂含有强烈YZRNase活性的物质，可靠保护RNA不降解。
3 价廉物美：其提取效果与国外进口产品相媲美，价格却低于它的三分之一。

自备试剂及耗材：
*仿、异丙醇、75%乙醇(用RNase-free 水配制)、RNase-free的水、RNase-free的耗材(Tip头，离心管等)。

操作步骤：

1、匀浆处理
组织中提取总RNA：
a.植物组织：植物叶片直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100mg植物叶片加入1ml RNA 提取试剂。
b.动物组织：按10-30mg组织加入1ml RNA 提取试剂，用电动匀浆器或者一次性研磨杵充分匀浆。
培养细胞中提取总RNA：
a.贴壁细胞：无须胰酶消化，可直接用RNA 提取试剂进行裂解，每10cm2培养面积加1mlRNA 提取试剂。
b.悬浮细胞：可直接离心收集、裂解，每1ml RNA 提取试剂可裂解5×106动物或酵母细胞，或107细菌细胞。
血液中提取总RNA：
直接取新鲜的血液，加入3 倍体积红细胞裂解液，混匀后室温放置10分钟，9,000 g离心1分钟。彻底吸弃上清，收集白细胞沉淀。每100-200μl血液收集的白细胞沉淀加入1ml RNA提取试剂。

2、分层(Phase Separation)
根据样品，选择使用方法A或者方法B。如果不确定，则使用方法 B。
A、(细胞，血液，一般动物组织)
室温静置5 分钟，再按照1 ml RNA 提取试剂使用200μl的比例加入*仿，用力颠倒离心管以混匀；室温静置3 -5 分钟使之分层后，4℃ 12000g 离心15
分钟。
B、(植物，脂肪及肝脏等某些杂质含量较高的样品)
室温静置5 分钟后，4℃条件下12000 g 离心10 分钟，将上清移入另外一个离心管中。再按照1 ml RNA提取试剂使用200μl 的比例加入*仿，用力颠倒离心管以混匀。室温静置2 - 5 分钟使之分层后，4℃条件下12000 g 离心15 分钟。
注意：
·4℃ 离心对于降低基因组DNA 的污染是很重要的。
·杂质含量高的样品一定要使用2-B 操作。2-B 操作不仅可以将大部分杂质离心去除，也可以将大片段的基因组
DNA 离心去除，方便加入*仿后的分层，不过，如果想同时抽提总RNA 和基因组DNA，则使用2-A 操作。
·加入*仿后的混匀是非常重要的，否则静止分相易出现分相倒置，即水相在离心管下部而有机相在上部。不推荐振荡混匀，而推荐直接用手混匀：将管底斜向朝上，手斜向快速摇动，使体系成粉色乳状。

3、RNA沉淀(RNA Precipitation)
小心将上层水相(通常可吸取550μl)移至另外一个离心管中，再加入等体积冰冷的异丙醇混匀，室温放置10 - 20 分钟，4℃12000g 离心10min，弃上清，RNA沉淀于管底。
注意：
·中间层和红色下层置于 4℃ 保存，以便接下去抽提基因组DNA。
·用冰冷的异丙醇能更迅速的沉降RNA。
·取上层水相时要特别小心，不要吸入白色中间层及红色下层。移取水相时要使用小体积移液器：200μl 移液器，Tip 的尖嘴要贴在管壁，慢慢松手吸出液体。
·对于脂肪类组织，包括脑组织，在上清的Z上层为脂肪，取上清时不要吸入，必要时用等体积*仿对上清再抽提一次。
·如果是杂质含量高的样品，强烈建议将此步操作改为：在上清中加入一半体积的异丙醇，混匀后，再加入一半 (指上清) 体积的RNA 沉淀试剂(1.2M NaCl，0.8M 柠檬酸*)。再混匀后，室温放置10 – 20 分钟。
·弃上清后，将离心管置于离心机中离心数秒，再用移液器将残留液体小心吸出。这是Z彻底的去除上清的方法，比倒掉上清后再将离心管倒扣在吸水纸上的方·法可靠得多。如果是杂质含量高的样品，强烈建议增加此步操作。如果肉眼看不见沉淀，则不要用移液器吸。

4、RNA漂洗(RNA Wash)
a.RNA 沉淀中加入1ml 75%乙醇(用RNase-free 水配制)，温和振荡离心管，悬浮沉淀。每1ml RNA提取试剂加入1ml 75％乙醇。
b.4℃ 7,500 g离心5min，弃上清。
注：转速不要高于7,500g，否则得到的RNA不易溶解。
c.短暂快速离心，用移液器小心吸弃上清，注意不要吸弃沉淀。室温放置1-2分钟晾干沉淀。
注：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。

5、溶解RNA(Redissolving the RNA)
根据需要，沉淀中加入适量(一般可加50-100μl)RNase-free 水，轻弹管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存。

储存条件：2～8℃，避光，有效期12个月。

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·2×Taq PCR MasterMix
编号：RFT095
规格：500μl|5×500μl
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高，有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基，可以直接用于TA克隆。以50μl PCR反应体系为例，每次使用25μl 2×MasterMix，500μl可做20次 50μl PCR反应。

质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余基因组DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系：

 

	50μl反应体系	终浓度
2×MasterMix	25μl	1×
上游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
下游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
模板	×μl	10pg-1μg
水	补至50μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
延伸	72℃	5 min	1

*注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定的反应条件(温度、时间等)。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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·PAGE预制胶(8-16%)
编号：RFT155
规格：10gel×10孔
本PAGE预制胶是一款高性能的小型聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，能满足客户上样量大的需求。其独特的胶板设计可以提高条带分辨率，改善样品在上样孔里的分布状态，使得条带更加均匀。该预制胶采用独特的凝胶缓冲系统，比常规的Tris-Glycine系统具有更强的缓冲能力，在pH中性条件下灌注，能够更好地减少聚丙*(代"烯")酰胺的降解，提高凝胶稳定性。本PAGE预制胶不含有SDS，依赖于采用合适的电泳缓冲液和相应试剂，是SDS-PAGE和非变性凝胶电泳的理想材料。依赖特有的灌注技术可以保证预制胶批次间稳定性和条带分布一致性。本PAGE预制胶兼容实验室Z为常用的Tris-Glycine电泳缓冲液，而不必使用昂贵的Tris-MOPS或Tris-MES电泳缓冲液，有效降低成本。独特的凝胶配方，可以高电压电泳，25-30分钟完成电泳，能够实现GX、可靠地分离蛋白质，便于后续染色或转膜检测。

本PAGE预制胶提供不同浓度的梯度胶和固定浓度胶。梯度胶的浓度包括4-20%、4-12%和8-16%；固定浓度胶包括8%、10%、12%和15%。每种浓度的预制胶有12个点样孔。胶板尺寸：长×宽×高为100 × 80 ×50 mm；凝胶尺寸：长×宽×厚为80×70×1 mm。

产品特点：
1、适用范围广：配合不同电泳缓冲液，能进行变性和非变性电泳适合大多数小型电泳槽
2、高分辨率：蛋白条带分离更为清晰和均一
3、超快电泳：可以260-300V高电压电泳，25-30分钟结束电泳
4、超长保质期：室温可稳定保存6个月，2-8℃可保存24个月
5、重复性高：不同批次预制胶的一致性好
6、物美价廉：兼容Tris-甘*酸缓冲液，节约实验成本

其他可选PAGE预制胶：
PAGE预制胶(8%)
PAGE预制胶(10%)
PAGE预制胶(12%)
PAGE预制胶(15%)
PAGE预制胶(4～12%)
PAGE预制胶(4～16%)
PAGE预制胶(4～20%)


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·随机六聚体引物
编号：RFT106
英文名称：Random Hexamer Primer
规格：100μl
pd(N)6随机六聚体引物含有6个碱基的随机序列引物。5’末端带有磷酸基，3’末端为羟基末端。5’-P-d(NNNNNN)-3’ N = G, A, T or C。随机引物适用于长的或具有发夹结构的RNA。它的特异性较低，常用于获取5’末端序列或从带有二级结构区域的模板获取cDNA。为了能得到较长的cDNA，需要经过摸索确定样品中引物与RNA的比例。该产品是含有6个碱基的随机引物，已经配成20倍的即用型溶液，如20μl反应体系中使用1μl。本品浓度为0.2μg/μl(100μM)

适用范围：
1、链cDNA合成。
2、用随机引物与[α-32P]dCTP组合，可以代替切口平移法进行DNA的标记，准备成的探针可以直接应用于DNA杂交。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

·即用型PMSF溶液(100mM)
编号：RFT193
英文名称：Phenylmethanesulfonyl fluoride
规格：10ml
PMSF是一种不可逆的丝*酸蛋白酶YZ剂，如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、凝血酶等，作用原理是特异性识别并磺化决定酶活性的丝*酸残基活性位点。此外，其对半胱*酸蛋白酶(如木瓜蛋白酶)和哺乳动物来源的乙酰胆碱酯酶也有YZ效果。PMSF常在细胞或组织裂解之前加入到裂解液中以预防蛋白的降解。PMSF可以单独使用，也常与其他蛋白酶YZ剂如胃抑肽酶A或者磷酸酶YZ剂如正钒酸*混合使用。

本产品配备有PMSF溶解液，可以方便配制成100mMPMSF储备液。由于PMSF不溶于水，有毒性，不稳定的缺点，另有PMSF的无毒替代物，AEBSF(货号：AE1020)，活性和功能与PMSF相同，具有毒性低，稳定，溶于水的优点。在蛋白提取中，PMSF推荐使用终浓度为0.1-1 mM，由于PMSF在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

配制使用方法：
取一管PMSF晶体全部加入到PMSF溶解液中，彻底溶解后即配成100mMPMSF溶液。在蛋白提取缓冲液中稀释100倍使用，如500μl提取缓冲液中加入5μl。
注：PMSF溶液在水系缓冲液中极其不稳定，必须现用现加。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

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