特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")宽分子量蛋白Marker(10~200KD)折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:宽分子量蛋白Marker(10~200KD)折扣价
编号:RFT051
规格:20T(100μl)
英文名:Broad Molecμlar Weight Protein Marker
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本产品包含14种蛋白质混合物,分子量范围为10kD-200kD,经过SDS-PAGE电泳,用考马斯亮蓝染色后可以得到14条带,可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。
使用方法:
1、次收到该产品,室温融化后,彻底混匀,离心快甩将溶液完全收集到管底,根据需要适量分装成小管,-20℃贮存,每次取一小管使用。
2、取出分装后的Marker,常温融化,轻柔彻底混匀,管底不能见沉淀物。
注:此Marker为即用型,用前不要高温处理!
3、上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量。
4、电泳结束后,染色,观察结果。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
宽分子量蛋白Marker(10~200KD)折扣价极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·2×DNA上样液(变性凝胶电泳)
编号:RFT188
英文名称:2×DNA loading buffer (for denaturating urea gels)
规格:5×1ml
本制品是尿素变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳时使用的上样缓冲液,适用于分离短的单链DNA。本缓冲液常用于SSR标记和AFLP、RFLP等基因分型检测。本制品中含有甲酰胺,可以解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型;另外,本制品中还含有*酚蓝、二甲*菁两种色素,可以观察电泳的进行情况。*酚蓝与二甲*菁在变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中的迁移速率则随凝胶浓度的改变而不同,见下表:
变性胶浓度 | *酚蓝 | 二甲*菁 |
5% | 35 bp | 130 bp |
6% | 26 bp | 106 bp |
8% | 19 bp | 75 bp |
10% | 12 bp | 55 bp |
20% | 8 bp | 28 bp |
注:bp数是指和色素移动相同距离的DNA片段长度。
使用方法:使用前,先离心快甩使溶液至管底,以防开盖后造成污染。取本制品与待测DNA样品或DNA Marker等体积混匀,95℃处理5-10分钟,冰上预冷后进行电泳。
注意事项:1、为了您的安全,使用时请使用一次性手套操作,注意防护。
2、本制品不适用于非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶核酸电泳和蛋白电泳。
储存条件:4℃,有效期12个月。
·四环素盐*(代"酸")盐溶液(50mg/ml)
编号:RFT185
英文名称:Tetracycline HCl Solution
规格:5×1ml
四环素类抗生素主要是与细菌核糖体30S亚单位的A位特异性结合,阻止tRNA在该位置上的联结,阻止肽链延伸,从而YZ细菌蛋白质合成。四环素类还可引起细胞膜通透性改变,使得重要成分外漏,从而YZ细菌生长繁殖。四环素盐*(代"酸")盐的水溶性好,生物利用度比四环素碱好,故常用于临床及研究领域。四环素盐*(代"酸")盐溶液由四环素盐*(代"酸")盐溶于水组成,经0.22μm过滤CJ,可以直接添加到培养基中。一般工作浓度为10~50 μg/ml,其中严紧型质粒常采用10 μg/ml,松弛型质粒常采用50 μg/ml。
使用方法:根据实验具体要求操作,一般四环素在LB中终浓度为10~50μg/ml。可以大体按照1/1000 LB体积加入50mg/ml Amp溶液,如100ml LB中加入100μl 四环素 50mg/ml。
注意事项:1、尽注意无菌操作,避免污染。
2、避免反复冻融。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、*离子是四环素的拮抗剂,四环素抗性菌的筛选应使用不含*盐的培养基(如LB培养基)。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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·100bp DNA ladder(100~1500bp)
编号:RFT001
规格:100T(2×250μl)
本产品是由11条带状双链DNA组成即用型DNA Ladder,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。包含1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。 条带为100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000,1500bp,其中500bp条带为100ng/5μl,其余条带浓度为50ng/5μl。
使用方法:1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中(每1mm×1mm加样孔加1μl,如果加样孔宽于5mm,可以适当增加上样量)进行电泳。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度8-10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间30-35分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注:如果使用Goldview等染料就行染色,由于灵敏度比EB低,请酌情增加Marker的上样量。
注意事项:1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
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·Taq DNA聚合酶
编号:RFT102
英文名称:Taq DNA Polymerase
规格:500U(100μl)|5×500U(5×100μl)|2000U(400μl)|5×2000 U(5×400μl)
本品是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化的,其分子量为94 KD。具有5’-3’DNA聚合酶活性和5’-3’外切核酸酶活性,无3’-5’外切酶活性。在PCR反应中,Taq DNA Polymerase延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3’端带A,可直接用TA载体克隆。一般用于DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A等,产物可以直接用于T/A载体克隆。本品浓度为5 U/μl。
活性定义:1单位(U) Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
10×Taq Buffer:200 mM Tris-HCl (pH 8.4);200 mMKCl;15 mMMgCl2; 其它成分。
贮存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0);0.1 mMEDTA;1 mMDTT;100 mMKCl ; Stabilizers; 50% glycerol
反应举例:
注意:以下举例为常规PCR反应系统,仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况,设定反应条件。
以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段
1、反应体系的建立:50 ml反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系):
Template | <1μg |
Primer 1(10μM) | 1μl |
Primer 2(10μM) | 1μl |
10×Taq Buffer | 5μl |
dNTP Mixture(10mM) | 1μl |
Taq (5 U/μl) | 0.5μl |
ddH2O | 补至 50μl |
2、PCR反应循环的设置:
94℃ 3min
94℃ 30sec
55℃ 30sec 30cycles
72℃ 1min
72℃ 5min
3、结果检测:反应结束后取5 ml反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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温馨提示:不可用于临床ZL。