北京pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒厂商，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒厂商
编号：SY0115
规格：1μg
英文名：pGMLR-TK luciferase reporter Plasmid
品Pai：百奥莱博
产地：北京
pGMR-TK海肾荧光素酶报告基因（pGMLR-TK luciferase reporter）是野生型海肾荧光素酶（RLUC）报告基因对照载体。它可与萤火虫荧光素酶报告基因载体联合共转染哺乳动物细胞。海肾荧光素酶的表达为试验中的荧光素酶报告基因正态化提供内对照值，减少实验材料背景值得影响。

PGMR-TK海肾荧光素酶报告基因是以HSV-胸腺嘧啶核苷激酶为启动子（TK），适合于海肾荧光素酶报告基因载体中组成型表达。

质粒图谱



注意事项
本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

更多有关北京pGMLR-TK海肾荧光素酶报告基因质粒厂商的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·通用型动物组织PCR试剂盒
编号：SY0049
英文名称：Animal Tissue Direct PCR Kit
规格：50T|200T
该试剂盒可用于转基因型鉴定、动物基因分型等多种大规模基因检测。动物组织直接PCR试剂盒是一种可直接对不同动物组织进行PCR扩增的试剂盒，适应性广、稳定性强。试剂盒中采用独特的裂解缓冲液体系，可以简便快速的裂解多种动物组织样品并释放出基因组DNA。整个过程不需要除去蛋白、RNA及其它次生代谢物，也无需有机溶剂抽提，即可得到质量稳定的基因组DNA，无需后续纯化步骤即可直接用于PCR反应。而且样品需求量小，少到5mg动物组织即可进行实验。

试剂盒中提供的 2×Tissue Master Mix 具有很强的扩增兼容性，能直接以待测样品裂解液为模板，进行GX特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合物，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，并以dUTP替代了dTTP，另外加入了能够降解含有dUTP 模板的 UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG 酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。优化的2×Tissue Master Mix与直接裂解液配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、兼容性强、特异性强、稳定性好等特点。

产品组分：

 

组分	50T	200T	储存
2×Tissue MasterMix*	500 μl	1 ml×2	-20℃
Buffer AL	5 ml	20 ml	室温或4℃
Protease	220 μl	880 μl	4℃
6×DNA Loading Buffer	1.5ml	1.5ml	4℃

注：2×Tissue Master Mix中包含Tissue Taq DNA 聚合酶、UNG酶、dNTP（dUTP替代了dTTP）、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。

保存方法
① 本试剂盒的2×Tissue Master Mix保存在-20℃，避免反复冻融。
② Buffer AL在常温干燥条件下，可保存12个月，如需保存更长时间可置于4℃。
③ Protease溶液具有独特配方，常温保存（25℃）可长期具有活性，在4℃保存，其活性和稳定性会更好，因此建议将其置于在4℃保存，请勿置于-20℃保存。

注意事项
1）本试剂盒适用于常规PCR，请勿用于多重PCR鉴定；建议扩增片段在1kb以内。
2）注意实验用具的清洁以及实验的操作手法，避免样本间的交叉污染。
3）建议采用新鲜采取的动物组织，若为长期冷冻组织，应尽量避免反复冻融，否则会导致模板的降解，影响PCR效率。
4）Buffer AL若低温保存，容易产生沉淀。在使用前务必将其在室温中放置一段时间，也可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀，混匀后再使用。
5）电泳检测时，切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中出现一大团拖尾亮带，影响实验结果。
6）建议设立阳性及阴性对照反应。阳性对照可用50ng纯化的动物DNA为模板，阴性反应以ddH2O为模板，引物可采用以前成功扩增的引物。
7）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法

1. 取5-10mg动物材料，置于离心管中。尽量剪碎动物材料，以使之后的酶解反应容易进行。
2. 取100μl Buffer AL并加入4μl Protease，涡旋混匀。
3. 向混合液中加入动物组织，涡旋混匀。
4. 65℃孵育10-30min，然后95℃处理5min。
【注】：65℃孵育，一般只需10min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难酶解，可以将时间延长至30min。组织块不需完全酶解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。
5. 12,000 rpm (~13,400×g )离心5min。
6. 转移上清至新的离心管，4℃或-20℃放置备用或直接用于PCR扩增。
【注】：用于后续PCR检测时，模板量占PCR体系的1-10%之间，不能超过20%。如50μl 的PCR体系中，加入0.5-5μl 裂解液即可，但不能超过10μl。
7. PCR反应体系配制*
按照下表配制PCR反应体系，配置好反应体系后，短暂涡旋充分混匀并瞬时离心，将所有试剂收集到管底。

ddH2O	Up to 20μl
2×Tissue Master Mix	10μl
正向引物（10μM）	0.5μl
反向引物（10μM）	0.5μl
模板 DNA	xμl

【*】：① 配制的PCR反应体系可根据所需终体系（如50μl）按照该比例进行调整。
② 通常引物终浓度为0.2-0.25μM可以得到较好结果。反应性能较差时，可以在0.1-0.5μM范围内调整引物浓度。
8. PCR反应条件设置
此表PCR反应条件仅供参考。PCR反应条件因模板、引物等的结构条件不同而各异。具体操作中需要根据模板类型、目的片段大小、扩增片段的碱基序列和引物的GC含量及长短等具体情况来优化的反应条件，包括退火温度，延伸时间等。

循环步骤	温度	时间	循环数
UNG酶处理	50℃	5min	1
灭活UNG酶&预变性	94℃	5min	1
变性	94℃	10sec	30-40循环
退火a	50-65℃	20sec
延伸b	72℃	30 sec/kb
彻底延伸	72℃	5min	1

【注】：a. PCR程序中的退火温度需根据引物的Tm值自行设置；
b. 延伸时间需要根据片段的长度来确定，对于1kb以内的DNA片段，建议延长时间为30秒。


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·NF-κB-GFP报告基因质粒
编号：SY0153
英文名称：NF-κB GFP Reporter Plasmid
规格：1μg
NF-κB-GFP报告基因是用于检测NFκB转录活性水平为目的的报告基因。 NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和YZ细胞凋亡等方面有着重要的作用。

NF-κB-GFP报告基因主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-KB的调控机制的研究。

pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点，可以GX地检测NF-κB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NF-κB-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMNF-κB -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMNF-κB -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂，可作为NF-κB报告基因的阳性对照。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

·1×STE Buffer(无菌)
编号：SY0010
英文名称：1×STE Buffer (Sterile)
规格：500ml
本品为1×STE工作液，且已经CJ处理，可直接用于相关实验。STE Buffer，即Sodium Chloride-Tris-EDTA (STE) Buffer，又称TEN buffer，是分子生物学常用的一种缓冲试剂，可用于DNA提取、DNA电泳等，也可用于蛋白纯化相关实验。

组份：1×STE缓冲液含有100 mM NaCl; 10mM Tris-HCl pH8.0; 1mM EDTA pH 8.0
储存条件：RT，有效期一年。


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GL0184 高糖DMEM(不含丙*(代"酮")酸*） 500ml
GL1346 pH标准缓冲溶液(pH=6.86) 50ml|100ml
GL0953 亚甲基蓝染色液 0.1%|0.2%|0.5%|1% 100ml
GL2014 维生素C检测试剂盒(铜氧化微板法) 100T
SK193 血*浓度检测试剂盒 Blood magnesium concentration detection kit
SNM465 TEMED TEMED
GL0684 碳酸*水溶液(0.05%) 500ml
GL1793 *化铵溶液(50mmol/L) 100ml
SNM581 甘油激酶(GK)(EC2.7.1.30) Glycerol kinase
SNM264 载脂蛋白B测定试剂盒(免疫比浊法) Apolipoprotein B Assay Kit
GL0384 红细胞稀释液(计数用) 100ml
GL1523 Tween20/TBS溶液(20×TBST,pH7.5) 500ml

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