特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销是高品质的细胞凋亡与增殖产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Hoechst 33258 染液(即用型)等细胞凋亡与增殖产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销
编号:SY0498
规格:10ml
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本系列产品均以溶液形式提供,其中Hoechst 33258 染液 (1mg/ml)(SY0562)为特定浓度的产品,其浓度为1mg/ml。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。Hoechst 33258染液(即用型)(SY0498)为浓度经过优化的产品,确保可以满足各种常规染色的需要。如需使用粉末状该产品,可选购Hoechst 33258(SY0497)。
Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。可用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可用于活细胞或组织的细胞核染色。
中文名称:二*甲亚胺, 三*化* 2-(4-羟基*基)-5-(4-甲基-1-哌*(代"嗪")基)-2,5-二-1H-*并咪唑
英文名称:2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride;bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式:C25H24N6O·3HCl
分子量:533.88
CAS:23491-45-4
纯度:≥95%(HPLC)
储存条件:-20℃,有效期12个月
结构式
使用方法
对于1mg/ml的Hoechst33258在使用时需用PBS或合适的缓冲液配制成0.5-10μg/ml的染色液。
1. 对于固定的细胞或组织
1) 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258 染色。
2) 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液,并混匀。室温放置 3~5分钟。
3) 吸除 Hoechst 33258 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2~3 次,每次3~5 分钟。
4) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。观察细胞凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。激发波长350nm,发射波长460nm。
2. 对于活细胞或组织:
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在适宜于细胞培养的温度培养 20~30 分钟。
c) 弃染色液,用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Hoechst 33258 染液(即用型)特价促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·NTP套装(100 mM each)
编号:SY0056
英文名称:NTP Set (ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)
规格:4×1mL
本品为ATP、UTP、GTP和CTP共4种溶液的套装,可用于分子生物学中多种相关应用,如体外转录、RNA扩增,siRNA合成等。还可作为多种酶的反应底物或辅酶。
本品为纯度≥99%的ATP、UTP、GTP和CTP的三*盐配制所得的无色透明水溶液,pH (25℃)= 7.0±0.1,浓度为100mM,且无DNase和RNase污染。
产品组份:
组分名称 | 规格 | 保存 |
ATP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
UTP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
CTP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
GTP(100mM) | 1 ml | -20℃保存 |
注意事项
1) 可以室温溶解,溶解后需置于冰上,使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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GL1987 低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒(Sol微板法) 100T
SK169 α-半乳糖苷酶检测试剂盒 α-GAL Test Kit
GL1077 增强型抗荧光淬灭封片剂 5ml|10ml
GL0645 黏蛋白异染染色液(天青A法) 100ml
GL1751 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2) 100ml|500ml
SNM558 DMEM高糖培养基(不含L谷*酰胺,不含丙*(代"酮")酸*) DMEM high glucose medium
GL0794 神经HRP示踪显色液(TMB法) 50T
GL0342 甲**(代"胺")蓝染色液(1%,硼*(代"酸")盐法) 100ml
GL1500 考马斯亮蓝快速染色液 "100ml
SNM357 石蜡切片抗酸染液 Acid-fast Stain Kit
SNM039 谷*酸脱*酶测试盒(紫外比色法) Glutamate dehydrogenase (GLDH) test kit
GL0069 Earle"s平衡盐溶液(含**糖,含酚红) 1×EBSS|10×EBSS 500ml
GL1247 P:C:I(25:24:1,pH﹥7.8) 100ml
SNM155 肝/肌糖原测定试剂盒 Liver / Muscle glycogen assay kit
GL1921 铁检测试剂盒(亚铁嗪比色法) 50T
SK108 己糖激酶检测试剂盒 Hexokinase Test Kit
GL0999 Sorensen磷酸缓冲液(1×,pH6.2) 500ml
GL2052 乳酸脱*酶(LDH)检测试剂盒(LD-L微板法) 100T
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·逆转录酶
编号:SY0293
英文名称:M-MLV (H-) Reverse Transcriptase
规格:5000U
本品适用于链cDNA合成,cDNA 片段长度可达12kb。也可用于低拷贝基因的检测。野生型的M-MuLV包含RNase H活性,该活性可催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA,因而在cDNA 条链的合成过程中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA,本品为通过基因重组技术得到的点突变型RNase H活性缺失的逆转录酶,即M-MLV (H-) Reverse Transcriptase,与M-MuLV相比,不仅改善了模板RNA可能被降解情况,且具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建。
注意事项
1)为保证反转录成功,建议使用高质量的RNA样品。
2)请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free,以防止RNase污染。
3)如果RNA模板GC含量丰富或者具有复杂的二级结构,可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀,65℃变性5min,冰上冷却,短暂离心后加入其他成分继续下面的反转录步骤。
4)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
使用方法
1条链cDNA合成(以20μl反应体系为例)
1.1 按照表【1】配制反应体系
RNase free ddH2O | to 20μl |
5×Reaction Buffer | 4 μl |
dNTP Mixture (10 mM each) | 1 μl |
Oligo(dT)18(0.5μg/μl) |
or Random hexamer (0.1μg/μl) |
or GSP(Gene Speicific Primer)(2 μM) | 1 μl |
RNase inhibitor (40 U/μl) | 0.5 μl |
M-MLV (H-) Reverse Transcriptase | 1 μl |
模板RNA | Total RNA: 50ng-5μg mRNA: 5-500ng |
表1 cDNA条链合成反应体系表 |
1.2 轻轻混匀
若使用Oligo(dT)18或基因特异性引物,42℃孵育50min。
若使用Random hexamer,25℃孵育10min,42℃孵育50min。
1.3 65℃加热15min失活M-MLV (H-) Reverse Transcriptase。
2 RT-PCR
建议取1/10~1/5体积(2~4µl)的反转录产物作为PCR模板。
2.1 按照【表2】配制反应体系表
组分体积终浓度
cDNA模板 | 2μl | 依需要调整 |
Forward Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
Reverse Primer (10μM) | 1μl | 0.2 μM each |
10×Taq Buffer(含Mg2+) | 5 μl | 1× |
2.5mM dNTPs | 4μl | 0.2 mM |
Taq DNA Polymerase | 0.5μl | 2.5units |
ddH2O to final volume | 50μl | / |
表2 RT-PCR反应体系表 |
2.2 按下列条件进行PCR反应:
储存条件:-20℃。
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温馨提示:不可用于临床ZL。