立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于Z快速、Z有效的检测产品，包括立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒厂商在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒厂商
编号：SYA128
规格：48次/盒
品Pai：百奥莱博
产地：北京
一、简介：
本试剂盒用一对立氏立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对立氏立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的立氏立克次体，用于立氏立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
立氏立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720uL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
立氏立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50uL，加入100uL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明立氏立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明立氏立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行立氏立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明立氏立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管Z好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


关于立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒厂商的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以Z饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
SYA208 小双节RNA病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA026 创伤弧菌单重荧光PCR检测试剂盒
SYA480 口蹄疫O型(FMDV-O)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA654 牛口蹄疫3ABC抗体 ELISA检测试剂盒
SYA249 新布尼亚病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA074 霍乱弧菌(O1)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA138 三日疟原虫/卵形疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒
FZ003 沙丁安醇快速检测试剂盒 96T/盒
SYA297 鼠源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
SYA115 布鲁氏杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
SYA179 冠状病毒(SARS)单重荧光PCR检测试剂盒
FZ114 赭曲霉毒素检测试剂盒 96T/盒
SYA405 猪蓝耳病病毒(PRRSV)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA156 禽流感H7病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA220 轮状病毒A/B分型双重荧光PCR检测试剂盒
SYA045 嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
SYA507 牛支原体(mycoplasma)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA773 禽传染性喉气管炎病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA268 玉米转基因Bt176单重荧光PCR检测试剂盒
SYA086 肠出血性大肠杆菌黏附抹平因子(Eae)单重荧光PCR检测试剂盒
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·高致病性禽流感H5N1病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA153
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·脊髓灰质炎病毒1型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA205
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·铜绿假单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA036
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对铜绿假单胞菌特异性引物，对铜绿假单胞菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的铜绿假单胞菌(PA)，用于铜绿假单胞菌(PA)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
铜绿假单胞菌PCR反应液(PA-PCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(PA-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
6.1.1 如使用原始样本进行检测，样本(菌落、菌苔等)应新鲜采集并使用灭菌生理盐水悬浮原始样本。
6.1.2 如需在增菌后进行PCR检测，则应使用选择性增菌液对原始样本进行增菌。
6.1.3 应避免样本间交叉污染。
6.1.4 样本采集后应及时检测，也可保存于-20±5℃待检，长期保存应置于-70℃一下，样本应尽量避免反复冻融。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(PA-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PA-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(PA-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明PA核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明PA核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行PA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明PA核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒厂商关键词：SYA128,立氏立克次体荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博


·甲型H1N1流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA147
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪瘟(CSFV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA548
等级：科研实验专用
规格：10次/盒|48次/盒

·嗜肺军团菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA045
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪链球菌/脑膜炎奈瑟菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA113
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·副溶血性弧菌毒素调控基因(TOXR)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA071
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·流感嗜血杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA043
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(竞争法)(注：竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)
编号：SYA651
等级：科研实验专用
规格：192次/盒

·肠产毒性大肠杆菌(ETEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA088
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·风疹病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA248
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·肠致病性大肠杆菌(EPEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA093
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·普氏立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA130
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对普氏立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对普氏立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的普氏立克次体，用于普氏立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
普氏立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720uL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
普氏立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50uL，加入100uL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明普氏立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明普氏立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行普氏立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明普氏立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管Z好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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