供应商: 北京百奥莱博科技有限公司 保质期: 长期 数量: 416
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖,是高品质的动物疫病PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖
编号:SYA356
规格:48次/盒|96次/盒
品Pai:百奥莱博
产地:北京
一、简介:
本试剂盒用一对禽传染性支气管炎病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用一步法荧光RT-PCR技术对禽传染性支气管炎病毒RNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测气管渗出物、支气管和肺组织、肾脏或输卵管等标本中禽传染性支气管炎病毒(AIBV)RNA,用于禽传染性支气管炎病毒(AIBV)感染的辅助诊断及流行病调查,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
禽传染性支气管炎荧光qRT-PCR反应液(AIBV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 107copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 106copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 105copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 104copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 103copies/μL) 1管 50μL/管
阳性对照(AIBV-PTC 107copies/μL) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中,6000rpm离心20s,取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(Z好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIBV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(AIBV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(AIBV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明SEA核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明SEA核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行SEA qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明SEA核酸阳性;否则判为样本阴性。
(5) 标准曲线相关系数数值介于0.97~1之间。(相关系数数值等同于r2值),根据斜率及Y轴截距列出计算公式,并通过标准曲线计算样品RNA含量拷贝数。
例如:Y轴截距=41.5 斜率=-3.83
公式为:Y=-3.83(logX)+41.5
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管Z好高压灭菌,而且必须不含RNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
除禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·马尔堡病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA232
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA543
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·马源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA305
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·诺如病毒G1/ G2分型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA215
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·金黄色葡萄球菌杀白细胞素(PVL)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA039
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·腮腺炎/乙脑/肠道病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA223
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·高致病性猪蓝耳和猪蓝耳(hp-PRRSV/PRRSV)通用双重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA563
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·口蹄疫(FMDV)通用型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA500
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·辛诺柏病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA238
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·拉沙热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA242
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·霍乱弧菌霍乱毒素基因(ctxA)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA075
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肉毒杆菌E型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA021
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·立氏立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA128
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对立氏立克次体特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对立氏立克次体的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于检测全血等样本中的立氏立克次体,用于立氏立克次体感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
立氏立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720uL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
立氏立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50uL,加入100uL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照:均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明立氏立克次体核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明立氏立克次体核酸阴性。
(3) 如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行立氏立克次体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明立氏立克次体核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管Z好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖关键词:IBV,禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV),SYA356,百奥莱博
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SYA189 博卡病毒(HBocaV)/偏肺病毒(HMPV)双重荧光PCR检测试剂盒
SYA007 副溶血弧菌单重荧光PCR检测试剂盒 Fluorescent PCR detection kit for Vibrio parahaemolyticus
SYA433 猪轮状病毒A(ROV-A)单重荧光PCR检测试剂盒
SYA628 猪蓝耳病毒抗体ELISA检测试剂盒
SYA230 西尼罗病毒单重荧光PCR检测试剂盒
SYA055 流感嗜血杆菌/肺炎链球菌双重荧光PCR检测试剂盒
SYA119 犬种布鲁氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
FZ017 地塞米松快速检测试剂盒 96T/盒
SYA277 转基因植物NOS终止子单重凝胶PCR检测试剂盒
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SYA160 禽流感H9N2病毒双重荧光PCR检测试剂盒
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SYA136 鼻疽伯克霍尔德菌/类鼻疽伯克霍尔德菌双重荧光PCR检测试剂盒
SYA201 诺如病毒G1型单重荧光PCR检测试剂盒
SYA019 肉毒杆菌B型单重荧光PCR检测试剂盒
SYA465 轮状病毒(ROV)单重荧光PCR检测试剂盒
禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖关键词:IBV,禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV),SYA356,百奥莱博
·辛诺柏病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA238
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鼠源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号:SYA307
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·汉坦病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA244
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA388
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·巨细胞病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA143
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小反刍兽疫病毒(PPRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA575
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·单纯疱疹病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA142
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·布鲁氏菌(BS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA498
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪口蹄疫病毒A型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA645
等级:科研实验专用
规格:192次/盒|480次/盒
·肠出血性大肠杆菌致贺毒素2(Stx2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA085
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·轮状病毒(ROV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA465
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA494
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测气管分泌物试子、肺组织等样本中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),用于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(40T/Kit)
组份 数量 规格
IBRV反应液(IBRV-qPCR MIX) 1管 800μl/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes Mix) 1管 40μl/管
阴性对照(NTC) 1管 250μl/管
IBRV阳性对照(IBRV-PTC) 1管 50μl/管
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
六、样本采集、前处理与DNA提取
6.1 样本采集
病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉试子沾取气管分泌物,放入无菌试管中。
6.2 样本前处理:
组织样本:每份组织分别从3个不同的位置称取样本约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5ml生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5ml灭菌离心管,8000rpm离心2min,取上清液100μl于1.5ml灭菌离心管。
6.3 DNA提取
6.3.1 对于上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50μl核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mlEP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接去4μl加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的制备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(IBRV-qPCR MIN)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 20μl N×20μl
酶混合物 1μl N×1μl
总量 21μl N×21μl
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(IBRV-PTC)4μl,10000rpm瞬时离心10s。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
预变性 1循环 94℃ for 2 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基因:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的点为准。
8.2 试验成立判断
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(IBRV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明IBRV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明IBRV核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可以样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行IBRV qPCR检测。如果重复扩增曲线为为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明IBRV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配制、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
我公司生产供应销*(代"售")的动物疫病PCR检测试剂盒产品正全系列现货促销,满分期待您的垂询选购禽传染性支气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(定性/定量)(IBV)哪里卖。
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