特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京G250蛋白快速染色试剂现货供应在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京G250蛋白快速染色试剂现货供应
编号:WE0290
规格:250ml
英文名:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
品Pai:百奥莱博
产地:北京
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
我公司的北京G250蛋白快速染色试剂现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·固定组织基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0171
英文名称:FFPE DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总DNA,包括基因组DNA和线粒体DNA。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放固定或组织切片样本中的DNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由交联造成的YZ作用,有效提高DNA的产量和纯度;优化的缓冲系统使裂解液中的DNA可特异结合到硅胶吸附膜上,而其他污染物可流过膜;PCR和酶反应的YZ剂以及残留的杂质可通过两步漂洗步骤有效去除,使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP基因分型、STR基因分型和药物基因组学研究等。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
Buffer GTL | 15ml |
Buffer GL | 15ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
Buffer GE | 15ml |
蛋白酶K | 25mg |
蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
吸附柱DS及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇、10mM PBS(PH7.4)(固定液中的组织)。
实验前准备及重要注意事项:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、获得样品后,要尽快将样品在4%-10%的中固定,固定时间以14-24小时为宜,时间过长易导致基因组断裂,影响下游实验。
3、确保包埋前的样品彻底脱水,残留的会YZ蛋白酶K 的作用。
4、次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如果需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
操作步骤:
1、样本处理:
a. 石蜡包埋样本:用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织。
b. 等固定液中的样本:取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,重复3次,可直接进行第7步操作。
2、将组织块切成5-10μM的薄片。
注意:如果样品表面已经暴露在空气中,请将接触空气的2-3片弃掉不用。
3、取约1×1cm2的切片(共约4-5片切片)置于离心管(自备)中,加入1ml二甲*,盖紧管盖,涡旋震荡10秒。
4、12000rpm离心2分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃沉淀。
5、加入1ml无水乙醇,涡旋震荡混匀。12000rpm离心2分钟,弃上清,注意不要吸弃沉淀。
注意:乙醇可以除去样品中残余的二甲*。
6、打开管盖,室温或至37℃孵育10分钟,直至无乙醇残留。
7、加入180μl Buffer GTL,重悬沉淀;加入20μl 蛋白酶K ,涡旋震荡混匀。
8、56℃孵育1小时,直至样品完全溶解。90℃孵育1小时。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成DNA断裂,产生DNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到90℃后再把样品置于90℃孵育。
3)如需除去RNA,可将样品温度降到室温后,加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
9、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡彻底混匀。加入200μl无水乙醇,涡旋震荡彻底混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即充分混匀。
2)如果需要对多个样品进行操作,可以将Buffer GL和无水乙醇事先混匀后加样。
10、将步骤9所得溶液全部加入已装入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
12、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
13、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
14、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的20-100μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤14所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤14;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用20μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京G250蛋白快速染色试剂现货供应关键词:G250蛋白快速染色试剂,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent ,WE0290
·蛋白标准溶液BSA
编号:WE0274
英文名称:Protein Standard Solution(BSA)
规格:5ml
·鼠尾基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0186
英文名称:Mouse&Rat Tail Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的小鼠或大鼠鼠尾中提取高纯度的总DNA。该试剂盒提供的方法简单易行,纯化过程无需*酚或*仿抽提,可获得为50 kb的DNA片段,同时对100 bp的片段也能有效回收。本试剂盒采用独特的裂解液,有效裂解鼠尾样本,优化的缓冲体系使裂解鼠尾后产生的DNAGX结合到硅基质吸附柱上,而其他污染物可流过膜;PCR和其他酶促反应的YZ剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,使用低盐缓冲液或水洗脱,即可得到高纯度的DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
Buffer GTT | 15ml |
Buffer GL | 15ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
Buffer GE | 15ml |
蛋白酶K | 25 mg |
蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
吸附柱DM及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇
产品特点1、专用于从大鼠或小鼠的鼠尾中分离纯化高纯度总DNA。
2、无需有机溶剂提取以及乙醇沉淀,彻底去除污染物及下游反应YZ物,快速提取高品质DNA。
实验前准备及重要注意事项:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取一段大鼠或两段小鼠长度为0.4-0.6 cm的尾巴,在液氮中研磨成细粉或剪碎放入离心管(自备)中。加入180μl Buffer GTT,振荡混匀。
注意:确保组织的起始量不要超出推荐范围。
2、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋振荡,彻底混匀。
3、置于56℃水浴,直至组织溶液完全清澈,一般情况下需要消化6-8小时,孵育过程中涡旋震荡,使样品均匀分散。
注意:1)如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质,必要时过夜消化或再加入20μl 蛋白酶K 消化,不会影响后续操作。
2)如需去除RNA,在上述步骤完成后加入4μl 100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
4、12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,以除掉未消化的类似于鼠毛等组织。将上清转移到一个新的离心管(自备)中。
5、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡,充分混匀。加入200μl无水乙醇,涡旋震荡,充分混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)如果多个样品一起操作,Buffer GL和无水乙醇可以等比例混匀后一起加入样品。
3)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
6、将步骤5中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μlBuffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京G250蛋白快速染色试剂现货供应关键词:G250蛋白快速染色试剂,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent ,WE0290
SV0786 XmnI限制性内切酶 XmnI Restriction Endonuclease
WE0266 His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白) His-Tagged Protein Purification Kit(Inclusion Body Protein)
BTN100919 消解酶干粉(溶细胞酶)(≥200U/mg) Digestion enzyme,powder
SV1186 pBR322 载体
RFT087 Western封闭液II
KFS211 罗丹明123染色试剂盒 "Cell Apoptosis Detection Kit(Rhodamine 123)
SY0450 髓鞘蛋白脂质蛋白多肽PLP(139-151) Myelin Proteolipid Protein (PLP) 139-151
SV0354 EcoRI-HF RE-Mix限制性内切酶 EcoRI-HF RE-Mix Restriction Endonuclease
BTN130848A 即用型LB平板培养基(无抗) LB Petri Dish
HR0354 丽春红染色液 Ponceau S Solution
SY0089 c-Jun-Luc荧光素酶报告基因质粒 c-Jun luciferase reporter plasmid
YT171 β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 In Situ β-galactosidase Staining Kit
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温馨提示:不可用于临床ZL。