特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖抗GAPDH单克隆抗体折扣价在内的抗体抗原产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:抗GAPDH单克隆抗体折扣价
编号:WE0356
规格:100μl
英*(代"文")名:Anti GAPDH Mouse Monoclonal Antibody
品Pai:百奥莱博
产地:北京
GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱*酶)是参与糖酵解的一种关键酶,由4个36kDa的亚基组成。除参与糖酵解外,有证据表明哺乳动物细胞中的GAPDH参与了多种胞内生化过程,包括膜融合(membrane fusion)、微管成束(microtubule bundling)、磷酸转移酶(phosphotransferase)激活、核内RNA出核、DNA复制与DNA修复等。GAPDH蛋白几乎在所有组织中都高水平表达,常用于Western Blot检测中校正系统的内参。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG
免疫原:纯化的GAPDH蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)
应用种属:人、小鼠、大鼠、兔、猪,鸡、拟南芥
关于抗GAPDH单克隆抗体折扣价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以Z饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·抗β-Actin单克隆抗体(植物)
编号:WE0353
英*(代"文")名称:Anti β-Actin Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
Actin是细胞骨架的主要成分, 广泛表达于真核细胞。 目前发现Actin至少存在6种异构体形式。 Actin已经在各种物种的细胞中发现,并且在在免疫原性及物理特征上都比较相似,具有高度保守性,在细胞中的表达相对稳定,因此它常被用于校正系统的内参。本抗体经常作为各种模式生物如拟南芥,水稻等的内参。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
克隆号:6D1
免疫原:全长Actin蛋白
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索稀释度)
应用种属:拟南芥,水稻,斑马鱼,果蝇,秀丽线虫,酿酒酵母
·Taq酶抗体
编号:WE0121
英*(代"文")名称:Taq Antibody
规格:500U|2500U
本品是抗Taq酶鼠单克隆抗体,适用于Hot Start PCR。Taq Antibody与Taq酶结合后能YZDNA聚合酶活性,进而能够在低温条件下有效YZ引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq Antibody在PCR反应Z初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到热启动效果。因此无需对Taq酶抗体进行特殊失活处理。
产品特点;
1、在37℃,可YZ>95%的聚合酶活性。
2、可提高PCR反应的特异性和灵敏性,包括复杂的人基因组DNA或cDNA模板,低拷贝的模板,多重PCR等。
3、PCR反应速度快于普通化学修饰的聚合酶。
活性定义:Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合,25℃孵育15 min后,将在37℃,30 min条件下YZ97%以上的1 U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。
使用方法:
将Taq DNA Polymerase和Taq Antibody等体积混合,20-25℃下放置15 min冰上待用。
注意:通过实验,我们建议Taq Antibody和 Taq DNA Polymerase混合的分子数之比为13:1较为合适,实际操作中由于引物、目的产物或Taq DNA Polymerase不同,可以摸索一系列的比例以得到Z合适的结果。
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增300 bp的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 |
10×PCR Buffer | 5μl |
dNTP Mix,10μM each | 1μl |
Forward Primer,10μM | 1μl |
Reverse Primer,10μM | 1μl |
Template DNA | 4μl |
Taq酶和抗体的混合液 | 0.36μl |
ddH2O | up to 50μl |
2、PCR反应条件,可以按照各种PCR用DNA Polymerase的常规PCR反应条件进行PCR反应。
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s |
延伸 | 72℃ | 30 s |
终延伸 | 72℃ | 2 min | |
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
抗GAPDH单克隆抗体折扣价关键词:AP标记重组GAPDH抗体,小鼠抗重组GAPDH,抗GAPDH单克隆抗体,WE0356
K13252 6号染色体开放阅读框206抗体 Rabbit Anti-C6orf206 antibody
K22354 嗅觉受体52K1抗体 Rabbit Anti-OR52K1 antibody
Q03084 CD30/TNFRSF8抗体 Anti-CD30 Antibody(Mouse Monoclonal antibody)
K28103 丝*酸/苏*酸蛋白激酶38抗体 Rabbit Anti-STK38 antibody
K11126 骨形态发生蛋白2受体抗体 Rabbit Anti-BMPR2 antibody
K20227 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK3/6抗体 Rabbit Anti-Phospho-MKK3(Ser218) + MKK6(Ser207) antibody
Q00958 TNFRSF11A抗体 Anti-RANK Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K25977 血小板源性生长因子A相关蛋白2抗体 Rabbit Anti-TUSC2 antibody
Q06707 埃博拉病毒 埃博拉病毒(Subtype Sudan, strain Gulu)Glycoprotein/GP1(mucin domain deleted)抗体 Ebola virus EBOV(Subtype Sudan, strain Gulu)Glycoprotein/GP1(mucin domain deleted)Antibody, Rabbit PAb, Antigen Affinity Purified(Rabbit Polyclonal antibody)
K18102 单纯疱疹病毒2抗体 Rabbit Anti-HSV2 antibody
K14749 DNA聚合酶δ催化亚单位/DNA pol δ cat抗体 Rabbit Anti-DNA Polymerase delta, catalytic subunit antibody
K23852 脂肪营养素PNPLA3抗体 Rabbit Anti-PNPLA3 antibody
Q04581 Semaphorin 4D/SEMA4D/CD100抗体 Anti-Semaphorin 4D Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K15976 FAM113B蛋白抗体 Rabbit Anti-FAM113B antibody
K12623 12号染色体开放阅读框4抗体 Rabbit Anti-C12ORF4 antibody
K21726 神经丝蛋白抗体 Mouse Anti-Neuronal thread protein AD7c-NTP antibody
Q02455 Carbonic Anhydrase XII/CA12抗体 Anti-CA12 Antibody(Mouse Monoclonal antibody)
K13850 促肾上腺皮质释放激素受体1抗体 Rabbit Anti-CRHR1 antibody
K10497 凋亡相关蛋白TGFb信号抗体 Rabbit Anti-ARTS/SEPT4 antibody
K19599 宫颈癌原癌基因2抗体 Rabbit Anti-LETMD1 antibody
抗GAPDH单克隆抗体折扣价关键词:AP标记重组GAPDH抗体,小鼠抗重组GAPDH,抗GAPDH单克隆抗体,WE0356
·快速实时荧光定量PCR预混体系
编号:WE0141
英*(代"文")名称:BaFaSYBR Mixture
规格:5ml
本品是专用于染料法(SYBR GreenⅠ)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含Fast Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green I荧光染料和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列检测。本品所含荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA相结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。本品含有的Fast Taq DNA Polymerase能有效减少在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活仅需在95℃孵育20s。整个PCR反应过程比普通反应可节省约40分钟,大大缩短了PCR的反应时间。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,有效YZ了非特异产物的产生,并显著提高PCR的扩增效率。该产品应用范围广,适用于普通和快速定量PCR程序,可适用于无需ROX校正的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0141):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0142):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0143):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
组份 | WE0141-5ml | WE0142-5ml | WE0143-5ml |
2×BaFaSYBR Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
50×Low ROX | - | 200μl | - |
50×High ROX | - | - | 200μl |
ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、本产品中含有荧光染料SYBR Green I,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
3、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
4、本品不能用于探针法荧光定量PCR。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BaFaSYBR Mixture | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
Template DNA | 2μl | |
50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
ddH2O | up to 50μl | |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定的模板使用量。
3)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX.
2、PCR反应条件:
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 20 s | |
变性 | 95℃ | 3 s | 35-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 30 s |
融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
60℃ | 1 min | |
95℃ | 15 s | |
60℃ | 15 s | |
注意:
1)本产品所采用的酶须在预变性95℃、20s条件下实现酶的活化。在此条件下,大多数模板可良好的进行解链。对GC含量高、二级结构复杂的模板,可将预变性时间延长至1分钟,以使起始模板充分解链。若高温处理时间过长,会对酶的活性造成影响。可根据模板情况确定的预变性时间。
2)建议采用两步法PCR反应程序,退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
3)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定,本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
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