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北京百奥莱博专业生产供应罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)北京现货促销,我公司销*(代"售")全品类的抗体抗原,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)北京现货促销
编号:WE0378
规格:100μl
英文名:Goat Anti-Mouse IgG, TRITC Conjugated
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本产品为TRITC标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别小鼠IgG重链和轻链。使用本产品检测灵敏度高,本底低,稳定性好。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学的研究。TRITC(四甲基异硫*酸罗丹明)为罗丹明的衍生物,激发后呈现明亮的橙红色荧光。与FITC的黄绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢,也可用于单独标记染色。
免疫原:小鼠IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:TRITC,Amax=550; Emax=570
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)
除罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)北京现货促销外,我公司正在打折促销以下产品:
·细菌基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0178
英文名称:Bacteria Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌中提取高纯度总DNA,也适用于真菌等样本。本试剂盒每次可处理106-108个细胞,获得多至20μg总DNA。纯化过程中不需*酚或*仿等有毒溶剂,无需乙醇沉淀,一小时内即可获得高纯度DNA。本试剂盒采用优化的缓冲体系使裂解液中的DNAGX特异的结合到硅基质离心吸附柱上,而其他污染物可流过膜,PCR和其他酶促反应的YZ剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
Buffer GTL | 15ml |
Buffer GL | 15ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
Buffer GE | 15ml |
蛋白酶K | 25 mg |
蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
吸附柱DM及收集管 | 50套 |
产品特点:
1、适用于从革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌等样品中分离纯化基因组DNA。
2、无需使用有机溶剂,彻底去除污染物以及下游反应YZ物,快速提取高品质DNA。
自备试剂:无水乙醇;提取革兰氏阳性菌需自备Enzymatic Lysis Buffer。
Enzymatic Lysis Buffer配制方法:20 mM Tris,pH8.0;2 mM Na2-EDTA,pH8.0;1.2% Triton X-100。121℃灭菌处理20分钟,加入适量的Lysozyme(溶菌酶)其终浓度为20mg/ml。详细配制方法可登录百奥莱博网站,搜索WE0178S产品查询。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、如果提取次生代谢产物大量积累或细胞壁厚的细菌培养物的基因组,建议在对数生长期早期收集样品。
4、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀出现,请将Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
7、如果提取样品为革兰氏阳性菌,需客户自行配制Enzymatic Lysis Buffer处理菌体,其中需使用浓度为20 mg/ml的Lysozyme(溶菌酶),Lysozyme本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0214S。
操作步骤:
一、革兰氏阴性菌基因组DNA的提取:
1、取细菌培养物1-5ml(106-108个细胞,Z多不超过2×109个细胞)置于离心管(自备)中,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,尽量吸净上清。
2、向沉淀中加入180μl Buffer GTL,振荡使菌体重悬。
3、加入20μl 蛋白酶K ,涡旋混匀,56℃孵育,直至溶液变清亮,孵育过程中每隔一段时间颠倒或震荡离心管使样本分散。
注意:如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
4、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡充分混匀。加200μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)如果多个样品一起操作,Buffer GL和无水乙醇可以等比例混匀后一起加入,震荡混匀。
2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
5、将步骤4所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,弃废液,将吸附柱放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤9所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤9;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μlBuffer GE或灭菌水洗脱。
5)保存在水中的DNA会受到酸性水解作用影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
二、革兰氏阳性菌基因组DNA的提取:
1、取细菌培养物1-5ml(106-108个细胞,Z多不超过2×109个细胞)置于离心管(自备)中,12000rpm(~13400×g)离心1分钟,尽量吸净上清。
2、加入180μl Enzymatic Lysis Buffer(自备)使菌体重悬。Enzymatic Lysis Buffer配制方法见说明书前部分自备试剂。
3、37℃孵育30分钟。
4、加入20μl 蛋白酶K 涡旋震荡,充分混匀。加入200μl Buffer GL,涡旋震荡混匀。
注意:不要把蛋白酶K 直接加到Buffer GL中。
5、56℃孵育30分钟。
注意:
1)如果需要,95℃孵育15分钟可以使病原体失活,但是95℃孵育会造成一些DNA的降解。
2)如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置5-10分钟。
6、加入200μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。
注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
7、将步骤6所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已装入收集管的吸附柱,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤9。
10、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新离心管(自备)中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤11所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤11;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)保存在水中的DNA会受到酸性水解作用影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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K19340 KIAA1191蛋白抗体 Rabbit Anti-KIAA1191 antibody
Q00070 APC标记CD4抗体 Anti-CD4 Antibody(APC)(Mouse Monoclonal antibody)
K25090 SGEF蛋白抗体 Rabbit Anti-SGEF antibody
Q05819 流感病毒 H3N2(A/Wyoming/03/2003)血凝素抗体 Influenza H3N2(A/Wyoming/03/2003)Hemagglutinin/HA Antibody, Rabbit PAb(Rabbit Polyclonal antibody)
K17214 通用转录因子3C多肽5/TFIIIC90抗体 Rabbit Anti-GTF3C5 antibody
K26316 骨骼肌快/慢肌肌*蛋白T抗体 Rabbit Anti-Troponin T fast + slow skeletal muscle antibody
K22964 孕激素受体膜相关元件抗体 Rabbit Anti-PGRMC antibody
Q03693 Carboxypeptidase A2/CPA2抗体 Anti-Carboxypeptidase A2 Antibody(Rabbit Monoclonal antibody)
K15088 内皮粘蛋白EMCN抗体 Rabbit Anti-Endomucin antibody
K11735 活化诱导分子CD69抗体 Rabbit Anti-CD69 antibody
K20837 有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶2抗体 Rabbit Anti-MSK2 antibody
Q01567 PD-L1/B7-H1/CD274抗体 Anti-PD-L1 Antibody(Mouse Monoclonal antibody)
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K18711 IQCF5蛋白抗体 Rabbit Anti-IQCF5 antibody
K27814 锌指蛋白655抗体 Rabbit Anti-ZNF655 antibody
K10836 乙*(代"醛")脱*酶1型抗体 Rabbit Anti-ALDH1 antibody
Q05190 ACE2/Angiotensin-Converting Enzyme 2抗体 Anti-ACE2 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K16585 糖皮质激素诱导转录蛋白1抗体 Rabbit Anti-GLCCI1 antibody
K25688 溶质载体转运蛋白家族35成员G2抗体 Rabbit Anti-SLC35G2 antibody
K22335 OVOS2蛋白抗体 Rabbit Anti-OVOS2 antibody
Q03065 APC标记CD40/TNFRSF5抗体 Anti-CD40 Antibody(APC)(Mouse Monoclonal antibody)
K14459 无精症缺失基因4抗体 Rabbit Anti-DAZ4 antibody
K23562 磷脂合成酶2抗体 Rabbit Anti-PTDSS2 antibody
K20208 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MKK6抗体 Rabbit Anti-Phospho-MEK6 (Ser202) antibody
Q00939 ADAM17/CD156b抗体 Anti-ADAM17 Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K12333 卷曲螺旋结构域蛋白124抗体 Rabbit Anti-CCDC124 antibody
K21436 NADH脱*酶α家族8抗体 Rabbit Anti-NDUFA8 antibody
K18082 热休克蛋白90β2抗体 Rabbit Anti-HSP90B2P antibody
K27185 锌指蛋白195抗体 Rabbit Anti-ZNF195 antibody
K10207 磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体 Rabbit Anti-phospho-ALK (Tyr1604) antibody
Q04562 IL20RB抗体 Anti-IL20RB Antibody(Rabbit Polyclonal antibody)
K15956 骨骼肌蛋白FHL1抗体 Rabbit Anti-FHL1 antibody
K25059 突触结合蛋白1样2抗体 Rabbit Anti-SCFD1 antibody
Q05788 VNN2/Vanin-2抗体 Anti-VNN2 Antibody(Rabbit Monoclonal antibody)
Q02436 TNF-α/TNFA/TNFSF2抗体 Anti-TNF-alpha Antibody(Rabbit Monoclonal antibody)
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