北京现货DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)优惠

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名称：北京现货DAB法显色试剂盒(小鼠IgG)优惠
编号：QN1162
规格：1盒
英文名：Western Blotting Mouse IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗小鼠IgG酶标二抗。

SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。

试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。

常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。

注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）

储存条件：-20℃避光，有效期一年。

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·*霉素溶液
编号：QN0091
英文名称：Chloramphenicol Solution
规格：10mL
本品是浓度为50mg/ml的*霉素溶液，可以加入到细菌液体或者固体培 养基中培养含*霉素抗性基因的细菌。推荐有效工作浓度为5-50µg/ml。

*霉素一种细菌性广谱抗生素，可在肽键转移酶催化形成肽键的过程中YZ50S核糖体上mRNA的翻译，从而YZ革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌的生长。此外*霉素还具有立克次体属微生物抗性以及鹦鹉热-淋巴肉芽肿类衣原体抗性等，因此*霉素可用于细菌筛选。对*霉素乙酰转移酶基因(即CAT gene)进行乙酰化可抵制*霉素的抗性。基于该原理，分子生物学实验中，*霉素可作为一种筛选药物用于筛选含有*霉素抗性基因的转化细胞。

储存条件：4℃

·盐*(代"酸")胍
编号：QN0650
英文名称：Guanidine HCl
规格：500g
盐*(代"酸")胍是常用的分子生物学试剂，常用作蛋白变性剂。

别名：盐*(代"酸")亚*脲
CAS号：50-01-1
分子式：CH5N3· HCl
分子量：95.53
性状：白色结晶性粉末
储存条件：室温干燥保存

(1)作为蛋白质变性剂，可以溶解一些不溶的或变性蛋白质，例如内涵体;也可用于活性蛋白或酶的初始折叠。
(2) 作为提取细胞总RNA实验中的强烈变性剂。盐*(代"酸")胍溶液可溶解蛋白质，导致细胞结构破坏，核蛋白二级结构破坏，从核酸上解离下来。还能够充分YZ细胞和整个组织的核糖核酸酶活性。 由于其生物学上的破坏特性，常称含有盐*(代"酸")胍或者硫*酸胍的缓冲液为离液缓冲液。


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·腺苷-5"-二磷酸葡糖二*
编号：QN0566
英文名称：Adenosine-5′-diphosphoglucose disodiu*(代"m") salt
规格：10mg
本品常用在代谢组学，代谢通路，代谢通路图中的代谢产物和辅酶分子等科研领域。

别名：ADP-Glucose;ADPG
CAS号：102129-65-7
分子式：C16H23N5Na2O15P2
分子量：633.31
储存条件：−20℃
纯度：≥93%
性状：白色粉末
溶解性：溶于水后为无色到浅黄色变化，溶解度为50mg/ml

·6×DNA上样缓冲液
编号：QN1028
英文名称：DNA Loading Buffer,6×
规格：5ml|100ml
本产品是6倍浓缩的DNA上样缓冲液，用于DNA凝胶电泳，能促使DNA样品沉入凝胶加样孔中。其主要成份为甘油，EDTA，*酚蓝和二甲*青等。*酚蓝和二甲*青用作电泳时的指示剂，可指示电泳进程。

使用方法：
1、请按每5微升DNA样品加入1微升6×DNA Loading Buffer上的比例(6倍稀释)来使用。
2、混匀后，直接加到DNA凝胶加样孔中，电泳。

储存条件：4℃，有效期至少12个月。

·非冻型组织RNA保存液
编号：QN0923
英文名称：RNA Storage Solution
规格：10mL|100mL|500ml
本品是一种无毒的可直接使用的样品储存液，能使细胞内的RNA与RNA酶分离，可以快速可靠地保存动物组织、细胞内的RNA。组织获取后立即浸入本保存液中，在室温可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃标本可以长期保存，RNA稳定存在不降解，取出后用各类方法抽提可以获得高质量的RNA。

使用方法：
1. 根据要保存的各样本的体积，计算出所需本保存液用量。本保存液的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml保存液);离心收集2×106细胞本保存液的用量是1ml。
2. 将本保存液按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度＜0.5cm的任意片状，立即完全浸入本保存液中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则本保存液不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、，小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入本保存液。
4. 保存时先将样本浸入本保存液后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的，这样可使本保存液完全渗入到组织中)，然后转移到-20℃冰箱(本品在-20℃时仍为液态，有结晶析出，是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后，从本保存液中取出组织块，转移到-80℃冰箱。在本保存液中保存的标本，反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。

注意事项：
1. 组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入保存液，以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用本保存液保存，因为本保存液不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复苏到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除保存液，再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量保存液保存液不影响后继提取RNA的质量。

储存条件：室温保存，有效期两年。


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YT535 S-羰基还原酶 S-Carbonyl Reductase (Crude Enzyme)
BTN131119 HRP稳定剂/稀释剂 HRP Stablizing Solution
BTN100919 消解酶干粉(溶细胞酶)(≥200U/mg) Digestion enzyme,powder
SV1186 pBR322 载体
YT125 细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法) LDH Cytotoxicity Assay Kit
BTN131139 Deaza dGTP溶液(5mM) Deaza dGTP Solution
SY0450 髓鞘蛋白脂质蛋白多肽PLP(139-151) Myelin Proteolipid Protein (PLP) 139-151
SV0349 EcoRI-HF限制性内切酶 EcoRI-HF Restriction Endonuclease
WE0117 BalbMulti多重PCR Mix BalbMulti PCR Mix
HR0354 丽春红染色液 Ponceau S Solution
SY0088 CREB-Luc报告基因质粒 CREB luciferase reporter plasmid
BTN131292 PFG固定液 PFG Fixative Solution

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