HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家
编号：BTN130594
规格：20μL
英文名：HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-Tubulin)
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本产品包含三种Z常用的HRP标记内参抗体，β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594)，该系列抗体无需二抗孵育，可缩短实验周期，节约实验成本，大幅降低背景信息强度。

抗体类型：小鼠IgG1
应 用：Western blotting
建议浓度：1:1000～10000
交叉反应性：人，大鼠，小鼠

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·Oligo(dT)纤维素
编号：BTN131231
英文名称：Oligo(dT) Cellulose
规格：25mg
本产品是共价交联的Oligo(dT)纤维素亲和基质，可用于分离纯化带有poly(A)结构的真核生物mRNA，本产品结合能力大于400 A260 U/g。

储存条件：常温运输，4℃保存、有效期两年。

·NP-40裂解液
编号：BTN131009
英文名称：NP-40 Lysis Buffer
规格：100mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。

产品特点：
1. 本产品裂解能力强度温和，对膜蛋白的处理能力一般；对核蛋白的提取能力较好；对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2. 本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶YZ剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3. 本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate，β-glycerophosphate，sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种YZ剂，可以有效YZ蛋白降解。
4. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1. 融解NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
 裂解液用量说明 ：通常6孔板每孔细胞加入150 微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200 微升或250 微升。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的浓度为1mM。
3. 按照每20 毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注：
1. 为取得的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。


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·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)
编号：BTN81212C
英文名称：One-Stop Protein Native PAGE Pack(C)
规格：30次
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同，它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同，所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐，为此本公司开发了本产品。

产品特点：
1．即开即用，不需单独准备各种成分，十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2．非变性，电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用，得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3．可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5．提供具有3种不同pH的缓冲液套装，便于客户选择Z适合的缓冲液体系。

产品组成：

 

成分	规格
丙*(代"烯")酰胺干粉	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉	3g
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵干粉	1g
高中低缓冲液套装选一	ABC之一(见下)
说明书	1份
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
高pH分离胶配胶液(pH8.9)，4×	200ml
高pH电泳液(pH8.3)	10L(干粉)
高pH上样液，5×	1ml
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5)，4×	100ml
中pH分离胶配胶液(pH7.5)，4×	200ml
中pH电泳液(pH7.0)干粉A	55.2g
中pH电泳液(pH7.0)干粉B	10g
中pH上样液，5×	1ml
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
低pH分离胶配胶液(pH4.3)，4×	200ml
低pH电泳液(pH4.5)	10L(干粉)
低pH上样液，5×	1ml

注：高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液，只是pH不同。

储存条件：常温运输和保存(上样液需-20℃保存)，保存期为一年。

使用方法：
如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶，高pH分离胶，高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液，电泳液，配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要，缓冲液的pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI，则蛋白质分子带电多(电荷密度大)，电泳速度快，分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性，失去活性，所以pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡，需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定，没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5，所以在不知道目标蛋白的pI时，可以先选用高pH缓冲系统。

一、配制分离胶
1．确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质，可选用3-5%的胶；对分子量在20-150KD之间的蛋白质，可选用5-10%的胶；对分子量在10-80KD之间的蛋白质，可选用10-15%的胶。对未知样品，建议使用7.5%的胶。
2．配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液，该溶液可以在4℃存放一周。
3．配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液Z好在一个月内用完，必须4℃避光保存。
4．配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。注意：如果购买的是低pH缓冲系统，由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低，所以需要增加上述两成分的用量。
7．在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水，使胶顶部液面平整。由于比重不同，水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8．室温聚合30-60分钟后，用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。

二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率，适合于成分复杂的样品，一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同，蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品，可以不用浓缩胶，此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度，尺寸和形状相关。)
1．配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3．按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4．在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
5．室温聚合30-60分钟，拔出梳子，用1×电泳液冲洗加样孔。

三、电泳
1．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注：本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种，低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液，可以室温放置，用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH，但保险起见，可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3，7.0和4.5。
 注意：中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液，否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A，5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀，加去离子水至彻底溶解，调PH7.0，定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2．连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI，目标蛋白将带负电荷并向阳极移动，可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极)；如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI，目标蛋白将带正电荷并向阴级移动，此时应该下阴极上阳极。
3．300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4．换电泳液。
5．在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl，1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意：如果用考染检测，每个孔的蛋白Z好在50-100μg总蛋白，如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀，可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA)，用前Z好用pH试纸测试一下，不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6．上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7．用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意：电泳过程Z好在冷室或有冷却系统，以免电泳产热使蛋白质变性。
8．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。


HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家关键词：HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-Tubulin),HRP标记内参抗体(β-Tubulin),BTN130594


·两性霉素B
编号：BTN120681
英文名称：Amphotericin B Solution
规格：1mL
本品为浓度为20mg/mL两性霉素B的水溶液。两性霉素B(二性霉素B；节丝霉素B；Fungizone)分子式：C47H73NO17，分子量：924.08，CAS号：1397-89-3，可溶性两性霉素B系来自链霉菌的多烯抗真菌类抗生素，它与真菌细胞膜的固醇类物质，特别是麦角固醇有亲和性，在膜上形成通道，使一些小分子流失。KJ谱为真菌和酵母，多用于细胞培养。在日光下易被破坏失效。

储存条件：低温运输、-20℃避光保存，有效期6个月。

·BCIP/NBT显色试剂盒
编号：BTN81224
英文名称：BCIP/NBT Chromogenic Kit
规格：100mL
BCIP即5-*-4-*-3-吲哚-磷酸盐(5-bromo-4-chloro-3-inodlylphosphate)。NBT即四唑淡蓝(Nitro-Blue-Tetrazolium)，为深蓝色无定形微溶物质。当二者存在时，在碱性磷酸酶作用下，NTB被还原形成不溶性的蓝色(在硝酸纤维素膜上)或紫色(在尼龙膜上)沉淀，据此颜色反应来鉴定碱性磷酸酶。该反应的示意图如下：


产品特点：
1．即开即用，省去自配溶液的麻烦。
2．条件经过优化，可以检测到0.5fmol的靶分子(在硝酸纤维素膜上)，并且背景低，不需要自己摸索。
3．与硝酸纤维素膜和尼龙膜兼容，也可用于琼脂糖凝胶原位杂交。
4．适用于中等灵敏度检测各种印迹膜检测，包括Southern杂交、Northern杂交、Western blot沉淀、免疫组化等。如果要高灵敏度检测，Z好使用ECL 检测。
5．肉眼观察实验结果，直观简单，不需要额外的试剂和仪器。

试剂盒组成：

成分	规格
25×BCIP	1ml
25×NBT	1ml
AP缓冲液，10×	50ml
说明书	1份

注意：本产品可以配制100mL BCIP/NBT 显色液，具体使用次数与膜的大小密切相关。

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期一年。

自备试剂：超纯水、结合有AP 标记的探针或抗体的印迹膜。

使用方法：

一、配制溶液
1．按每cm2 印迹膜需要0.1mL BCIP/NBT 显色液的比例计算所需显色液的用量，并按下表的配方配制的所需量的BCIP/NBT 显色液待用。说明：下表以10mL 为例，用户需要根据计算得到的所需显色液体积按比例增减各成分用量。

成分	用量
超纯水	9ml
AP缓冲液，10×	1ml
BCIP溶液	50μl
NBT溶液	50μl

注意：此溶液必须在1小时内使用。
2．用10×AP缓冲液配制跟NBT-BCIP显色液等体积的1×AP缓冲液待用。

二、显色
3．同钝头镊子将印迹膜浸入到新鲜配制的1×AP缓冲液中，脱色摇床上摇晃5分钟。本方法也可以用于琼脂糖凝胶原位杂交，处理方法一样，只是把经过AP 标记探针或抗体杂交的印迹膜改成经过AP 标记探针或抗体杂交的凝胶。
4．同钝头镊子将印迹膜浸入到新鲜配制的BCIP/NBT 显色液中(每cm2 印迹膜需要0.1mL BCIP/NBT 显色液)，室温避光静置显色直到看见所需条带。在硝酸纤维素膜上，条带将呈现蓝色；在尼龙膜上，条带将呈现紫棕色。注意：显色过程中不要摇晃，否则有色沉淀物不容易聚集。高丰度的靶分子可能只需5-30分钟显色，低丰度的靶分子可能需要24小时显色。显色反应一般会在24小时结束，所以显色时间没有必要超过24小时。37℃放置可加速显色反应，缩短显色时间。
5．显色结束后，将印迹膜转移到盛有超纯水的托盘中摇晃以终止显色反应。数分钟后需要换水，共三次。
6．用吸水纸吸干膜上的水分，照相或扫描处理后避光干燥保存印迹膜。对硝酸纤维素膜，如果用二甲*将膜浸湿，则条带会增强约5倍(膜变得透明，使背景变低，条带更明显所致)。
7．如果不避光保存条，印迹膜上的条带会逐渐褪色。硝酸纤维素膜上的颜色不能脱去，如果想脱去尼龙膜上条带的颜色，可以将膜浸入到装在玻璃容器的DMF溶液中，再进行热水浴直到颜色脱去(需要在通风柜中进行)。硝酸纤维素膜上的条带不能脱去。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购HRP标记内参抗体(β-Tubulin)北京厂家。