北京现货Maximov固定液供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货Maximov固定液供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货Maximov固定液供应
编号：BTN131288
规格：250mL
英文名：Maximov Fixative Solution
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本固定液主要成分为*化汞、重铬酸*、甲醛。与Zenker固定液相比，本产品不含铬酸，所以重铬酸*未被酸化，因此，对细胞浆固定较好。甲醛有促染胞浆的作用，增加对酸性染料的亲和力。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

北京现货Maximov固定液供应正在火爆，除此之外，为您推荐下别产品：

·Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒
编号：BTN131083
英文名称：Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
规格：20次
血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料，但这些样品通常数量有限，质量不高，还没法进行第二次取样。所以得到足够RNA量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解决这一问题，本公司根据Ribo-SPIA技术，开发了本产品。Ribo-SPIA技术的核心是利用DNA/RNA嵌合引物，以带polyA尾巴的mRNA为模板进行逆转录并得到双链cDNA、RNase H不间断地在cDNA第1链中的RNA部分产生裂口，DNA聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应，产生cDNA单链。

产品特点：
1.GX，能线性扩增1000-10000倍，能用5-100 ng总RNA模板扩增得到5μg左右的单链cDNA(扩增的cDNA主要来源于总RNA中的mRNA)。
2. 步骤简单方便，扩增在恒温进行，只需要4个小时，不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好，保持RNA样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于RNA产量和质量都不高的样品。
5.扩增得到的单链cDNA能直接用于各种后续试验，包括qPCR、芯片分析、杂交反应等。
6. 本产品足够做10次双链cDNA的合成，20次SPIA扩增。

试剂盒组成：

 

成分	规格
cDNA一链合成缓冲液	40μl
MMLV逆转录酶	10μl
cDNA二链合成缓冲液，5×	160μl
cDNA二链合成酶混合液20×	40μl
SPIA RT引物	40μl
SPIA反应液，5×	320μl
SPIA扩增引物	320μl
SPIA酶混合液	120μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为1年。

使用方法：

一：样品RNA的制备
本产品不含RNA相关试剂，用于Ribo-SPIA扩增的每个批次的RNA样品Z好先做一个预实验。总RNA样品的浓度必须在1-20ng/μL，一次RIBO-SPIA所需总RNA的量为1ug。也可以使用mRNA，一次Ribo-SPIA所需总mRNA的量为5-100 ng。过低则需要浓缩，过高则需要用无RNase的水稀释。RNA必须经过DNase处理，不能含DNA污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。注意：本产品只能扩增含带polyA尾巴的RNA，不能扩增DNA和不含polyA尾巴的RNA。

二：一管式双链cDNA的合成
1.在0.5mL PCR管中，按下表配制双链cDNA合成反应。
注意：Z好每次实验设置一个阴性对照组，在此对照中用超纯水替代自备的mRNA或总RNA:

成分	用量
自备mRNA或总RNA	4μL mRNA(5-100ng)或4μL总RNA(1ug)
SPIA RT引物MTA3 20uM	1μl
65℃，5分钟后室温放置2分钟，短暂离心后放4℃
cDNA一链合成缓冲液	4μl
MMLV逆转录酶	1μl
轻柔吹打混匀后得到10μL的反应体系。42℃保温90分钟合成链cDNA。结束后70℃保温15分使酶变性，4℃放置，然后加入下列成分，得到80μL反应体系。
超纯水	50μl
cDNA二链合成缓冲液	16μl
cDNA二链合成酶混合液	4μl
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时合成cDNA第二链，然后75℃ 15分灭活酶，4℃放置待用

三：SPIA扩增
2.在0.5mL PCR管中，按下表配制20μL的SPIA反应体系。注意：Z好设置两个阴性对照组，在此两个对照中分别用超纯水替代SPIA引物和cDNA双链反应液。

成分	用量
cDNA双链反应产物	40μL(来于上步)
SPIA扩增引物10uM	16μl
SPIA反应液，5×	16μl
超纯水	42μl
94℃20秒后50℃放置复性待用
SPIA酶混合液	6μl
轻柔吹打混匀后得到120μL反应体系，50℃扩增60分钟，4℃放置

四：SPIA扩增产物的检测
3. 取5μL SPIA扩增产物进行PAGE电泳检测。标准的反应结果是产生长度在200-2000bp之间的产物。
4. 如果产物将用于PCR定量，则可以不经过纯化直接使用，如果需要用于芯片杂交和浓度测定，则需要按常规的方法纯化cDNA以便去除残留的dNTP和引物。
5. OD检测纯度和浓度。在OD260的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产物是单链DNA，故1OD260=33ug/mL。
6. 所得DNA可以放-20℃长期放置。


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·2%明胶溶液(PCR级)
编号：BTN70905
英文名称：Gelatin Solution，PCR Grade
规格：1.5mL
大量实验显示一定比例的明胶能够促进PCR反应。本产品为2%的明胶溶液，按1/5到1/20(具体取决于PCR反应体系)的比例加入到PCR反应体系中，可以提高PCR的效率。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

·Benzonase核酸酶
编号：BTN101001
英文名称：Benzonase Nuclease
规格：500U
Benzonase是由粘质沙雷氏菌分泌的、由两个大小为26 kD的亚基组成的一种广谱核酸酶，由Benzon公司商品化，故名Benzonase。其活力比DNase I 强34倍，能以相同的效率酶切单联和双链DNA和RNA，将其消化成3-5 碱基长度(杂交限度以下)的5´-单磷酸寡核苷酸。其活性需要Mg2+，pH在6-10 之间，Z适温度在35-44℃。本产品是在野生型的Benzonase的基础上经过基因工程改进而得。

产品特点：
1．微量本产品就能GX降解所有形式(包括单链，双链，线性和环状)的DNA和RNA，尤其适合从细胞裂解物中去除核酸，降低样品粘度而不影响蛋白电泳图谱。
2．在有变性剂存在的条件下(如4M 尿素)还有活性，可以直接加入很多蛋白裂解液中。
3．降解核酸完全，符合FDA 关于核酸污染的处理规程，可以用于工业生产。
4．可以用于蛋白提取、2D凝胶电泳、Western Blot、免疫沉淀等实验。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期两年。

活性定义：在标准反应体系内30分钟内使OD260改变1.0的酶量，相当于彻底降解37μg DNA的酶量。

使用方法：

一、酶的稀释
本产品浓度为1U/μL，如果需要稀释Benzonase，需要自备酶稀释液，稀释液的配方是：50mM Tris-HCl pH8.0，20mM NaCl，2mM MgCl2。
在稀释液中的Benzonase 只能在4℃放置数天。

二、用于去除核酸的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)将500ng鲑鱼精DNA 溶解在50mM Tris-HCl pH8.0，1mM MgCl2，0.1mg/mL BSA中，然后加入90U的Benzonase，37℃保温4小时，只剩下0.2ng可以杂交检测的DNA，如果23℃保温4小时，只剩下0.5 ng可以杂交检测的DNA。如果0℃保温4小时，只剩下1ng可以杂交检测的DNA。

三、用于降低E.coli 裂解液的粘度的标准试验(用户可以以此为参考设计自己的实验)
将7.5 g E.coli 悬浮于15mL悬浮液(10mM Tris-HCl pH9.0，1mMEDTA，6mM MgCl2)中，加入适量的本产品，然后将悬浮液经过弗氏压碎器破碎后迅速置于0℃冰上。

客户可以根据下表自行选择加入本产品的量

本产品在裂解液中的浓度	得到不粘稠裂解液所需孵育时间 (不粘稠是以得到可滴落的E.coli裂解液为标准)
0.24U/mL	＞60min
2.4U/mL	15min
8U/mL	5min
24.0U/mL	1.25min

答客问：
Q：什么情况下应该使用Benzonase核酸酶？
A：Benzonase核酸酶的应用领域包括：降低样品粘度以利操作(例如重组蛋白纯化，哺乳动物细胞裂解特下游要求粘度较低等情况)：减少存放的外周血单核细胞(PBMC)的结块现象，蛋白复性前高质量包涵体的制备，去除带负电荷的核酸对双向SDS-PAGE蛋白样品的影响。
Q：怎样灭活Benzonase核酸酶？如何去除？
A：采用EDTA螯合金属离子会可逆地YZBenzonase活性，极端条件会造成不可逆失活，例如100mM NaOH，70℃处理30分钟等，Benzonase可以用色谱法从目的产物中分离出去，由于这种核酸内切酶极其稳定，建议在终产物中要求不含有核酸酶的应用中不要使用Benzonase。
Q：我的Benzonase核酸酶遗忘在桌上了，还能用吗？
A：根据破坏性稳定性测试，Benzonase 核酸酶非常稳定，即使在37℃下孵育数月仍能保持>90%的活性。
Q：我需要使用别的缓冲液，哪些条件是Benzonase 核酸酶必需的？哪些条件会降低它的活性？
A：Benzonase核酸酶的活性需要1-2mM Mg2+，而在单价阳离子浓度>50%，磷酸浓度>20mM，硫*(代"酸")铵浓度>25mM等情况下，Benzonase的活性会降低50%
Q：Benzonase核酸酶与蛋白酶YZ剂混合物兼容吗？
A：可以兼容，但是对于含有EDTA 配方的蛋白酶YZ剂混合物要特别小心，EDTA浓度大于1mM时会YZBenzonase的活性。
Q：我的目的蛋白不溶，需要进行变性条件纯化，Benzonase 核酸酶能在尿素环境消化核酸吗？
A：实际上Benzonase核酸酶在有尿素(浓度可达6M)的情况下会增加活性，在尿素浓度为6M时活性先增加，随着时间处长活性又有降低。
尿素7M时，Benzonase核酸酶15分钟后出现变性并失活。但是在酶失活前多数核酸已经降解了。如果Benzonase 核酸酶的原浓度较高时会部分补偿7M 尿素的影响。


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GL0154 SOC固体培养基粉剂 1L
GL1314 DTT溶液(1mol/L,RNase free) 10ml
GL0918 亮绿SF染色液(1%) 100ml
GL1986 甘油三酯(TG)检测试剂盒(GPO-PAP双试剂比色法) 100T
SK169 α-半乳糖苷酶检测试剂盒 α-GAL Test Kit
SNM442 蛋白银染试剂盒 Protein silver staining kit
GL0644 黏蛋白染色液(温和甲基化法) 2×50ml
GL1751 乙酸*溶液(3mol/L,pH5.2) 100ml|500ml
SNM558 DMEM高糖培养基(不含L谷*酰胺，不含丙*(代"酮")酸*) DMEM high glucose medium
SNM240 Xmol/L盐*(代"酸") Xmol/L hydrochloride
GL0342 甲**(代"胺")蓝染色液(1%,硼*(代"酸")盐法) 100ml
GL1500 考马斯亮蓝快速染色液 "100ml

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