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百奥莱博专业生产供应北京现货BTN140105型Zamboni固定液厂家直销,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京现货BTN140105型Zamboni固定液厂家直销
编号:BTN140105
规格:250mL
英文名:Zamboni Fixative Solution
品Pai:百奥莱博
产地:北京
本产品主要由多聚甲醛、饱和苦味*(代"酸")、磷酸盐等组成,是常用的混合型固定液之一。本产品适用于电镜免疫细胞化学,对超微结构的保存较纯甲醇为优,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。
固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味*(代"酸")盐类固定液等,较为常用的是醛类中的、醇类中的乙醇。固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、YZ细菌和霉菌的生长。
储存条件:常温运输及保存,保存期为一年。
使用方法:(按具体实验要求具体操作,以下内容仅供参考)
1.一般需固定30~60分钟。如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。
2.固定后组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,经乙醇脱水后组织留有一点黄色,对染色无影响。
注意事项:
1.本产品对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。
2.组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3.固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。
4.温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。
5.取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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北京现货BTN140105型Zamboni固定液厂家直销正在火爆,除此之外,为您推荐下别产品:
·CTP溶液(100mM)
编号:BTN120627
英文名称:CTP Solution,100mM
规格:0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测),不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染,可以直接用于体外RNA转录合成。
GTP分子式为C9H13N3O14P3Na3 ,分子量是549.1,消光系数为9.0×103M -1×cm-1(pH7.0),λmax为271nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(中pH)
编号:BTN81212B
英文名称:One-Stop Protein Native PAGE Pack(B)
规格:30次
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一,跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同,它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同,所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐,为此本公司开发了本产品。
产品特点:
1.即开即用,不需单独准备各种成分,十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2.非变性,电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用,得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3.可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5.提供具有3种不同pH的缓冲液套装,便于客户选择Z适合的缓冲液体系。
产品组成:
成分 | 规格 |
丙*(代"烯")酰胺干粉 | 60g |
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 | 3g |
TEMED | 1.5ml |
过硫*(代"酸")铵干粉 | 1g |
高中低缓冲液套装选一 | ABC之一(见下) |
说明书 | 1份 |
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分) |
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× | 100ml |
高pH分离胶配胶液(pH8.9),4× | 200ml |
高pH电泳液(pH8.3) | 10L(干粉) |
高pH上样液,5× | 1ml |
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分) |
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5),4× | 100ml |
中pH分离胶配胶液(pH7.5),4× | 200ml |
中pH电泳液(pH7.0)干粉A | 55.2g |
中pH电泳液(pH7.0)干粉B | 10g |
中pH上样液,5× | 1ml |
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分) |
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7),4× | 100ml |
低pH分离胶配胶液(pH4.3),4× | 200ml |
低pH电泳液(pH4.5) | 10L(干粉) |
低pH上样液,5× | 1ml |
注:高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液,只是pH不同。
储存条件:常温运输和保存(上样液需-20℃保存),保存期为一年。
使用方法:如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶,高pH分离胶,高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此,绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液,电泳液,配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要,缓冲液的pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI,则蛋白质分子带电多(电荷密度大),电泳速度快,分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性,失去活性,所以pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡,需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定,没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5,所以在不知道目标蛋白的pI时,可以先选用高pH缓冲系统。
一、
配制分离胶1.确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质,可选用3-5%的胶;对分子量在20-150KD之间的蛋白质,可选用5-10%的胶;对分子量在10-80KD之间的蛋白质,可选用10-15%的胶。对未知样品,建议使用7.5%的胶。
2.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液,该溶液可以在4℃存放一周。
3.配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液Z好在一个月内用完,必须4℃避光保存。
4.配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6.加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。注意:如果购买的是低pH缓冲系统,由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低,所以需要增加上述两成分的用量。
7.在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水,使胶顶部液面平整。由于比重不同,水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8.室温聚合30-60分钟后,用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。
二、
配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率,适合于成分复杂的样品,一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同,蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品,可以不用浓缩胶,此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度,尺寸和形状相关。)
1.配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中,先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3.按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4.在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子。
5.室温聚合30-60分钟,拔出梳子,用1×电泳液冲洗加样孔。
三、
电泳1.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注:本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种,低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液,可以室温放置,用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH,但保险起见,可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3,7.0和4.5。
注意:中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液,否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A,5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀,加去离子水至彻底溶解,调PH7.0,定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2.连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI,目标蛋白将带负电荷并向阳极移动,可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极);如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI,目标蛋白将带正电荷并向阴级移动,此时应该下阴极上阳极。
3.300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4.换电泳液。
5.在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl,1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意:如果用考染检测,每个孔的蛋白Z好在50-100μg总蛋白,如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀,可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA),用前Z好用pH试纸测试一下,不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6.上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7.用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意:电泳过程Z好在冷室或有冷却系统,以免电泳产热使蛋白质变性。
8.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。
北京现货BTN140105型Zamboni固定液厂家直销关键词:Zamboni固定液,Zamboni Fixative Solution,BTN140105
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·一站式乙酸-尿素PAGE电泳套装
编号:BTN130881
英文名称:One-Stop Acetic Acid-Urea PAGE Pack
规格:30次
·耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
编号:BTN131210
英文名称:Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
规格:10000U
本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失),拥有RNA和DNA聚合酶活性,但由于在RNase H结构域内进行了点突变,该酶缺少RNase H的活性,不会降解链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA,从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。
产品特点:1.温度稳定性,点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题,增强了与模板的亲和力。
2.能够在较宽的温度范围内保持活性,在42-45℃之间具有活性,在温度高达55℃时仍有活性。
3.聚合酶活性增强,本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比,具有更高的cDNA产率。
4.高产量制备全长的链cDNA,Z长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
5.广泛的工作范围:提高了逆转录的性能,使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。
产品组成: 成分 | 规格 |
耐热型MMLV逆转录酶(H-),200U/μL | 50μl |
5×RT Buffer | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:1.在无RNase的PCR管中加入如下成分:
成分 | 用量 |
▶RNA模板 |
Total RNA 或poly(A)RNA 或specific RNA | 0.1ng-5μg 10pg-500ng 0.01 pg-0.5μg |
▶引物 |
Oligo dT18 或随机引物 或基因特异引物 | 0.5μg(100pmol) 0.2μg(100 pmol) 15-20 pmol |
▶RNase-free水 | Up to 12.5μL |
2.对富含二级结构的高GC RNA模板,65℃保温5分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3.离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4.按顺序向上述反应液中加入下表各成分,反应终体积为20μL:
5×RT Buffer | 4μL |
RNase Inhibitor | 0.5μL(20U) |
dNTP Mix,10mM each | 2μL(终浓度1mM) |
耐热型MMLV逆转录酶(H-) | 1μL(200U) |
轻柔混匀,短暂离心。
5.42℃保温60分钟(Oligo dT18或基因特异引物);如果是随机引物则先在25℃保温10分钟,然后再转移至42℃保温60分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板保温温度可以设为55℃。
6.70℃保温10分钟终止反应后置冰上冷却,得到cDNA。该产物可直接用于PCR扩增或-20℃保存。
北京现货BTN140105型Zamboni固定液厂家直销关键词:Zamboni固定液,Zamboni Fixative Solution,BTN140105
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·ATP溶液(2.5mM)
编号:BTN131216
英文名称:ATP Solution,2.5mM
规格:2mL
ATP分子式为C10H13N5O13P3Na3,分子量是573.1,消光系数为15.4×103 M-1×cm-1(pH7.0),λmax为259nm。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·预染蛋白Marker(14.4~97.4kD)
编号:BTN70704A
英文名称:Prestained Protein Marker(14.4-97.4kD)
规格:10次
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成: 成分 | A型 | B型 |
预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 |
肌球蛋白重链 | 200kD | | 有 |
*调素结合蛋白 | 130kD | | 有 |
兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
牛碳酸酐酶 | 31kD | 有 | |
人生长激素 | 22kD | 有 | |
大豆胰蛋白酶YZ剂A | 20.1kD | | |
鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
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温馨提示:不可用于临床ZL。