25mM氯化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)北京现货促销

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名称：25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)北京现货促销
编号：BTN130307
规格：5mL
英文名：MnCl2，PCR Grade
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本产品为专门用于易错PCR的MnCl2水溶液，浓度为25mM，可用于调节MnCl2的浓度。由于Mg2+在PCR过程中可以稳定非互补的碱基对，Mn2+能够降低聚合酶对模板的特异性，因而调整两种离子的浓度，可获得不同突变频率的多样性文库。

*化锰分子量为125.8，CAS号为7773-01-5，水合*化锰外观为玫瑰色单斜晶体；无水*化锰外观为桃红色结晶。密度为2.977g/cm3。熔点是650℃。在高于熔点温度下升华。沸点1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

25mM*化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)北京现货促销正在火爆，除此之外，为您推荐下别产品：

·酵母化学感受态细胞制备试剂盒(A型)
编号：BTN81109A
英文名称：Yeast Chemical Competent Cell Preparation Kit
规格：20次
本酵母化学感受态细胞制备试剂是一种通过化学处理，GX快速制备酿酒酵母化学感受态细胞，用于长期冻存以备后续转化的产品。

产品特点：
1.一次制备，-80℃保存，多次使用，免去每次转化都要制备酿酒酵母感受态细胞。
2. 操作简单，单溶液制备，除酵母培养的时间外，整个操作只需要30分钟
3. 主要用于酿酒酵母S. cerevisiae，也适用于其他多种实验用酵母菌株，包括S. pombe、C. albicans、Pichia pastoris等。
4. 受体酵母可以不含质粒，也可用于携带有选择性质粒的酵母。
5. 对酿酒酵母，转化效率可达到0.2-1×105个转化子/μg质粒DNA。对其他酵母，效率稍低，范围在100-2000个转化子/μg质粒DNA。
6. 得到的感受态细胞可以用各种线性或环状酵母穿梭质粒DNA进行转化，例如YIp，YRp，YCp，YEp和YAC等。
7.可以用于酵母双杂交、定点突变(Site－Directed Mutagenesis)、基因破坏(Gene Disruption)、等位突变基因修复(Mutant Allele Recovery)等实验。
8. 本产品可以制备20 只酵母感受态细胞(需要200mL 酵母培养液)，其中A型只用于制备感受态细胞，B型还带GX转化液。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

产品组成：

 

成分	20T(A)	20T(B)
制备液A	120ml	120ml
制备液B	6ml	6ml
制备液C	10ml	10ml
转化液A	无	30ml
转化液B	无	30ml
说明书	1份	1份

自备试剂：YPD培养基

使用方法：

一：酵母化学感受态细胞的制备
说明：按本方法制备1 管酵母化学感受态细胞就需要OD600达到0.6-1.0的新鲜酵母培养液10mL，用户需根据所需酵母感受态细胞的数量决定培养细胞的体积。如果超过10mL，则制备液的使用量需要按比例增加。
1. 挑取酵母受体菌的新鲜的单菌落(4℃放置不超过3周的也可以)，接种到装在50mL离心管中的10mL的自备的YPD培养基中。
2. 30℃摇晃培养，摇床速度250rpm/分钟，直到OD600达到0.6-1.0(相当于0.6-1×10⁷细胞/mL)。
3.室温3000rpm离心5 min，弃上清得酵母细胞沉淀。
4. 新鲜制备适量的酵母感受态制备工作液。对10mL 酵母需要5.25mL的工作液，其配制方法是：将4.75mL 制备液A、0.25mL 制备液B和0.25mL 制备液C 加入到一个无菌的离心管中后充分震荡混匀即可。酵母感受态制备工作液可放室温待用。
5. 用0.5倍体积的新鲜配制的酵母感受态制备工作液洗涤酵母细胞沉淀一次(对10mL 酵母则需要5mL 酵母感受态制备工作液)。即混合后振荡1分钟，室温3000rpm离心3分钟，去上清得洗涤后的酵母细胞沉淀。
6. 再用0.02倍体积的酵母感受态制备工作液充分重悬菌体(对10mL酵母，则需要0.2mL 酵母感受态制备工作液)。
7. 按每管0.2mL 分装到冷冻管中，放入保温冰盒中冷却半小时后再放入-80℃冰箱待用。0.2mL的感受态细胞足够1次转化使用。注意：放入保温冰盒的目的是使温度缓慢下降，急冻将使转化效率降低，这点跟大肠杆菌感受态制备过程不同。

二：化学转化酵母感受态细胞(只有B型提供相关试剂)
1. 将总体积不超过20μl的0.1-5μg质粒DNA 加到刚从-80℃冰箱取出的、还处于凝固状态的0.2mL 酵母感受态细胞上。注意：Z好同时做一个不加质粒DNA的阴性对照组。
2.室温充分振荡直到凝固的感受态细胞完全融化。注意：此步非常关键，如果能在恒温振荡器上37℃振荡5分钟，则效果更好。
3. 加入1.4mL转化液A，轻柔颠倒混匀一分钟。
4. 30℃培养1小时。
5.室温3000g离心5秒，弃上清。
6.在酵母细胞沉淀中加1.0mL转化液B，振荡一分钟。
7.室温3000g离心5秒，弃上清。
8.在酵母沉淀细胞中加入适量(如100μl)的转化液B，混匀后在在选择培养基上全部涂盘。
9. 30℃培养3-5 天后即得酵母转化菌落。


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