北京生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)哪里卖

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名称：北京生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)哪里卖
编号：BTN100920
规格：50μL
英文名：Biotin-dUTP Solution
品Pai：百奥莱博
产地：北京
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式：C28H41N6O17P3SNa3，分子量：927.6。分子结构式图如下：

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

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·大肠杆菌BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL化学感受态细胞
编号：BTN140378
英文名称：E.coli BL21-CondonPlus(DE3)-RIPL Chemical Competent Cell
规格：10*100μl
本产品来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株，缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶，从而减少对重组蛋白的降解，补充大肠杆菌缺乏的4 种稀有密码子(AGA、AUA、CCC、CUA)对应的tRNA(argU、ileY、proL、leuW)，提高外源基因，尤其是富含AT-或GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3 区(DE3 区含有T7 噬菌体RNA聚合酶)，可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等质粒的蛋白表达，同时具有四环素，*霉素，链霉素，壮观霉素抗性。本产品由特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率高达108cfu/μg。
菌株基因型为：F- ompT hsdS(rB-mB-)dcm+ Tetr galλ(DE3)endA Hte [argU proLCamr] [argU ileY leuW Strep/Specr]。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
4. 诱导时，IPTG浓度可选(0.1-2mM 均可)。
5. 为获得需要量的蛋白，诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。


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WE0116 2×富含GC PCR MasterMix 2×GC-rich PCR MasterMix
SV0349 EcoRI-HF限制性内切酶 EcoRI-HF Restriction Endonuclease
SV1592 重组人源组蛋白 H2A  Recombinant human protein H2A
BTN130915 dCTP溶液(2.5mM) dCTP Solution(2.5mM)
YT125 细胞毒性检测试剂盒(乳酸脱*酶法) LDH Cytotoxicity Assay Kit
SV1184 pUC19 载体
HR0269 NP-40裂解液 NP-40 lysis solution
BTN131119 HRP稳定剂/稀释剂 HRP Stablizing Solution
YT534 R-羰基还原酶 R-Carbonyl Reductase (Crude Enzyme)
ALH089 高纯度质粒大量提取试剂盒(柱式提取质粒) A large number of high purity Plasmid Extraction Kit
KFS166 Fluo-2, AM(Ca2+ GPCR分析-*离子指示探针) Fluo-2, AM
RFT051 宽分子量蛋白Marker(10～200KD) Broad Molecμlar Weight Protein Marker
SY0191 Pax6-GFP报告基因质粒 Pax6 GFP Reporter Plasmid
BTN130931 Southern级血液DNA提取试剂盒 Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
WE0220 X-gal溶液(20mg/ml) X-gal Solution(20mg/ml)
SV0653 SacII限制性内切酶 SacII Restriction Endonuclease
SY0556 *黄绿素，超纯级 Calcein, AM, Ultrapure Grade
BTN130204 Oligo快速复性液 Oligo Rapid Renaturing Solution
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·dTTP溶液，100mM
编号：BTN120617
英文名称：dTTP Solution，100mM
规格：0.5mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于PCR、RT-PCR、cDNA合成、DNA测序、DNA探针标记等反应。

dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1，消光系数为：9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·柱式动物RNA大量提取试剂盒
编号：BTN80901
英文名称：Animal RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是柱式动物RNA提取试剂盒(BTN71201)的大提升级产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNA提取试剂盒相比，其主要特点是：
1.大规模提取，一次可以提取到80-100μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟(对一个样品而言)。
3. RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

试剂盒组成：

 

成分	5T
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将1-2 g左右剪切好的动物组织放入50mL塑料离心管中，加10mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
2. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 5000-7000rpm室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约6-7mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时Z好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。
6. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
7. 加10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加10mL 通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温5000-7000rpm离心2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。
11.室温5000-7000rpm离心2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. 重复10-11 步一次，大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱能洗脱较次洗脱更多的RNA。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH在7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260 RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议Z好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如RNA上样液)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

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