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北京百奥莱博专业生产供应人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂
品Pai:百奥莱博
编号:ZN1558
规格:100ng
来源:大肠杆菌
特异性:人
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
更多有关人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
ARB10023 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA代测服务 Human 5-lipoxygenase,5-lo/lox ELISA KIT
4618-18-2 Lactulose 乳果糖
福林酚 β-Dextranase
ARB11929 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)检测服务 Rat 15-lipoxygenase,15-lo/lox ELISA KIT
87-99-0(16277-71-7) 木糖醇 xylitol
ARB12073 大鼠内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)酶标法分析 Rat endo*(代"c")rine gland vascular endothelial growth factor,eg-vegf ELISA KIT
ARB11889 人磷脂酶A2(PL-A2)elisa检测说明书 Human phospholipidase a2,pl-a2 ELISA KIT
PY02-014 肉汤琼脂培养基 250克
直链淀粉 Sodium DL-lactate 9005-82-7
001012 狗血清 100ml|500ml
BTN130424 SP交换介质 SP Medium
SSC缓冲液(20×,pH7.4) 500ml
ARB11912 人鞭毛蛋白(flAgellIn)elisa检测说明书 Human flagellin ELISA KIT
BTN80102 柱式粪便DNAOUT Column Stool DNAOUT
人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂关键词:人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白,ZN1558,百奥莱博
·小鼠Cystatin C重组蛋白
编号:ZN1755
规格:100ng
来源:大肠杆菌
特异性:小鼠
应用:WB 阳性对照
形态:冻干粉
纯度:>98%,RP-HPLC&SDS-PAGE
保存条件:-20℃保存 1 年以上,避免反复冻融。
·GALR1 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0561
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:rat
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液 2ml;
3.GALR1 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液 2ml;
4.封闭液 5ml;
5.生物素化鼠抗地高*(代"辛") 5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶 5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用 PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:Z重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以YZRNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗地高*(代"辛"):37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
GALR1的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂关键词:人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白,ZN1558,百奥莱博
ARB10567 人过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)elisa测定使用说明书 Human lipid peroxlde,lpo ELISA KIT
PY02-358 沙氏葡萄糖液体培养基 250克
改良油红O染色液 2×50ml|2×100ml
ARB12200 大鼠皮质酮(CS)尿液中含量检测 Rat cortisol,cs ELISA KIT
BL1418 "Western blotting(人IgG)
F030504 FITC标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*FITC
ARB10074 人CC趋化因子受体1(CCR1)含量测试 Human cc-chemokine receptor 1,ccr1 ELISA KIT
ARB12701 大鼠糖皮质激素受体β(GR-β)elisa检测操作说明书 Rat glucocorticoid receptor-β,gr-β ELISA KIT
ARB11383 人总蛋白S(TPS)酶标法分析 Human total protein s,tps ELISA KIT
ARB10385 人可溶性CD30配体(sCD30L)elisa检测说明书 Human soluble cluster of differentiation 30 ligand,scd30l ELISA KIT
PY01-009-2 牛肉膏(牛肉浸膏) 发酵级 1公斤
人工胃液(无菌) 500ml
BTN70303 绿如蓝核酸染料(UV型) DNAGREEN(UV)
ARB14099 小鼠瘦素受体(LEPR)ELISA检测服务
氧化型谷胱甘肽 DEHA 27025-41-8
ARB11121 人肺炎支原体IGM(MP)Elisa分析
BTN131053 蛋白级DTT DTT,Protein Grade
ARB12802 小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)酶联免疫定量检测 Mouse amyloid beta Peptide 1-42,aβ1-42 ELISA KIT
C0801 兔血清(无菌过滤)
ARB10237 人γ*基丁酸(GABA)elisa检测说明书 Human gamma-aminobutyric acid,gaba ELISA KIT
pGM-T重组菌落PCR鉴定试剂盒
BL0703 Trizol
北京百莱博科技有限公司专业生产重组蛋白产品,欢迎来电咨询选购人AnnexinV/Annexin A5重组蛋白 分子生物学试剂。
温馨提示:不可用于临床ZL。