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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京2×BAmp MasterMix(含染料)现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:2×BAmp MasterMix(含染料)
产地:国产|进口
规格:5ml
英文名:2×BAmp MasterMix(With Dye)
编号:WE0106
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以GX扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段Z长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可限度地减少人为误差和污染。的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
组份 | 1ml | 5ml |
2×BAmp MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BAmp MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
ddH2O | up to 50μl | |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s |
延伸 | 72℃ | 30 s |
终延伸 | 72℃ | 5 min | |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:2×BAmp MasterMix(含染料),WE0106,2×BAmp MasterMix(With Dye)
更多有关
北京2×BAmp MasterMix(含染料)现货供应的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
编号 | 名称 |
WE0130 | Real-time RT-PCR MasterMix |
WE0152 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料) |
WE0217 | 无RNA酶水 |
WE0324 | BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC) |
WE0290 | G250蛋白快速染色试剂 |
WE0200 | 植物RNA提取试剂盒(含DNase I) |
WE0183 | 游离DNA提取试剂盒 |
WE0268 | Protein A+G琼脂糖凝胶 |
WE0139 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料) |
WE0256 | 蛋白*(代"磷")酸酶YZ剂混合物 |
WE0284 | 1.5 M Tris-HCl缓冲液(pH8.8) |
|
WE0338 | 抗MBP标签单克隆抗体 |
WE0195 | miRNA提取试剂盒 |
WE0137 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒 |
WE0238 | T4 DNA聚合酶 |
WE0279 | Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
WE0339 | 抗RFP标签单克隆抗体 |
WE0253 | BL21(DE3)感受态细胞 |
WE0197 | 血液RNA提取试剂盒(含DNase I) |
WE0320 | 封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液) |
WE0134 | SuperSYBR Mixture(低含量ROX校正染料) |
WE0281 | 蛋白银染试剂盒 |
WE0126 | 防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶) |
WE0109 | Babuddy超保真DNA聚合酶 |
WE0345 | 抗GST标签多克隆抗体 |
WE0387 | HRP标记兔抗山羊IgG(H+L) |
WE0265 | 细胞核/浆蛋白抽提试剂盒 |
|
WE0107 | Pfu DNA Polymerase |
WE0386 | HRP标记链霉亲和素 |
WE0250 | Rosetta(DE3)感受态细胞 |
WE0379 | RRX标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
WE0222 | 无毒RNA酶清除剂 |
WE0293 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
WE0161 | 寡聚核苷酸Oligo(dT)15 |
WE0110 | 2×Babuddy MasterMix(含染料) |
WE0228 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Ion Torrent平台) |
WE0218 | 红细胞裂解液 |
|
温馨提示:不可用于临床ZL。