特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖SDS-PAGE快速电泳液哪里卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:SDS-PAGE快速电泳液哪里卖
编号:WE0277
规格:500ml
品Pai:百奥莱博
英文名:Fast SDS-PAGE Running Buffer(10×)
SDS-PAGE是蛋白质科学研究中Z为常用的技术之一,使用常规SDS-PAGE电泳缓冲液(TG,Tris-Glycin系统)进行电泳时,电泳所需的时间一般为90分钟左右(mini胶),应用本产品可使同样的mini胶的SDS-PAGE所需的电泳时间缩短至20-30min,同时电泳后的条带较使用常规的TG电泳缓冲液所跑出的条带分辨率提高且更加清晰。本产品的使用非常简单,只需将您使用的常规TG电泳缓冲液系统更换为本产品的稀释液,调整电压后进行电泳即可,无需添加任何实验步骤。同时稀释为工作液的本产品可重复使用4-5次。本产品既可节省您宝贵的时间也可降低您的实验成本。
注意事项:
1、操作时请务必佩戴手套,如溅到皮肤上,请立即用大量水冲洗。
2、本产品中含有SDS,适合变性凝胶电泳,不适合非变性凝胶电泳。
3、应用本产品所进行的SDS-PAGE的结果显示,本产品的应用会使蛋白的分辨范围发生变化,同等浓度的凝胶,其分辨的分子量要小于使用TG电泳缓冲液(见下表)。
操作步骤:(以Bio-Rad mini胶及相关配套设备为例)
1、本产品为10倍浓缩液,使用时用纯水10倍稀释后配制成工作液(例如:取100ml本产品后用纯水定容至1 L)。
2、将适量的本产品加入到电泳槽的内、外槽中,调整电源为恒压200-250 V进行电泳。电泳指示剂*酚蓝至凝胶底部,所需时间约20-30 min。
3、电泳完成后收集电泳槽内、外槽电泳液,4℃保存,可重复使用4-5次,但如发生浑浊请勿使用。
表1 速泳电泳液与常规TG电泳液的分辨率的比较
凝胶浓度 | 速泳电泳液 | 常规TG电泳液 |
8% | 20-250 kDa | 50-325 kDa |
10% | 15-140 kDa | 30-180 kDa |
12% | 10-80 kDa | 20-140 kDa |
15% | 5-70 kDa | 12-100 kDa |
储存条件:室温
关于
SDS-PAGE快速电泳液哪里卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以Z饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·低背景ECL化学发光检测试剂盒
编号:WE0307
英文名称:cwECL Western Blot Kit
规格:50ml|250ml
低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光,可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原,发光信号强
烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
组成 | 50ml | 250ml |
cwECL-A(Luminol) |
25ml | 125ml |
cwECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将cwECL-A和cwECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
问题 | 可能原因 | 解决方法 |
胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
膜上出现棕色或黄色条带 |
暗室中看到强烈发光 |
发光信号持续时间过短 |
信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 |
蛋白转移率低 | 优化转移系统 |
高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
封闭不足 | 优化封闭程序 |
封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 |
冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 |
曝光过度 | 减少曝光时间 |
抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 |
蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
膜未平衡 | 按照说明书处理膜 |
胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 |
出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) | 系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) | 一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
SDS-PAGE快速电泳液哪里卖关键词:WE0277,SDS-PAGE快速电泳液,Fast SDS-PAGE Running Buffer(10×)
·30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1)
编号:WE0291
英文名称:30% Acr-Bis(29:1)
规格:2×250ml
30%Acr-Bis(29:1)即30%的聚丙*(代"烯")酰胺-N,N"-亚甲双丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide)的水溶液,其中Acrylamide与-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide 的比例为29:1。本产品常用于配制各种浓度的变性及非变性聚丙*(代"烯")酰胺(PAGE)凝胶,进行常规的蛋白或核酸电泳实验,使用方便。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与分离范围 SDS-PAGE 分离胶浓度 | 分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) | 10%APS | TEMED |
6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 |
15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 |
20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 |
8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 |
15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 |
20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 |
10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 |
12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) | 10%APS | TEMED |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
SDS-PAGE快速电泳液哪里卖关键词:WE0277,SDS-PAGE快速电泳液,Fast SDS-PAGE Running Buffer(10×)
乙*(代"烯")利 C12E8 16672-87-0
巴比*(代"妥")*溶液(0.1mol/L,pH9.4) 100ml|500ml
119-44-8 酵母粉
ARB10814 人抗血小板抗体IgG/M/A(PA-IgG/M/A)酶免分析 Human platelet antibodies igg/m/a,pa-igg/m/a ELISA KIT
ARB12568 大鼠脑红蛋白(NGB)elisa检测说明书 Rat neuroglobin,ngb ELISA KIT
BL1136 JM109受体菌
BTN131224 Helly固定液 Helly Solution
BL0263 DifcoTM Skim Milk 脱脂奶粉
ARB13045 小鼠尿微量蛋白(mALB)Elisa方法检测 Mouse microalbunminuria,malb ELISA KIT
BTN130595 双荧光素酶活性检测试剂盒 Dual Luciferase Assay Kit
DP424 TRNzol Universal总RNA 提取试剂
BTN70904 酵母tRNA溶液 Yeast tRNA Solution
抑肽酶溶液(Aprotinin,2mg/ml) 1ml
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温馨提示:不可用于临床ZL。