Western中分子量蛋白Marker 蛋白质研究

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Western中分子量蛋白Marker 蛋白质研究的品Pai：百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Western中分子量蛋白Marker等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：Western中分子量蛋白Marker 蛋白质研究
英文名：Western MidiWT Protein Marker
产地：国产|进口
编号：WE0292
品Pai：百奥莱博
  本品是专门为Western Blot实验设计的分子量标准。由4种不同分子量的蛋白组成(20 kD、35 kD、60 kD、110 kD)，这四种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合，因此该Marker能与待检抗原在同一张胶片上曝光，阳性信号的分子量大小可以直接通过MidiWT的位置做出准确判断，无需后续图片拼接即可确定目的蛋白。另外该Marker还可以作为Western Blot实验的阳性对照。本产品不经过任何化学修饰，分子量精确，可以准确衡量目的蛋白的分子量大小，推荐上样量为5-10 µl。

注意事项：
1、本产品可直接使用，不需要加热。
2、将产品取出后于室温放置融化，务必使其完全融化，否则影响实验结果。
3、该产品与抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带，此时可降低该Western Blot Marker的上样量至2-5μl。
4、使用新配制的凝胶，及时更换电泳缓冲液和转膜液，以免影响实验结果。

操作步骤：
1、将产品取出后于室温放置融化。
2、温和地充分混匀，取5μl至上样孔中，进行SDS-PAGE电泳。
3、电泳完毕后将凝胶上蛋白转至NC或PVDF膜，依次孵育一抗、二抗。
4、孵育完毕并经充分洗涤后，将印迹膜与ECL工作液反应数分钟，使用X-光胶片曝光或化学发光成像。

实验图例

12%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后转膜，化学发光法曝光结果。

储存条件：-20℃保存，避免反复冻融

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肥皂草素 Potassium fluoaluminate 8047-15-2
甲**(代"胺")蓝染色液(1%,磷酸盐法)   100ml
八烷基三甲基*化铵 2′-dC 10108-86-8
L-谷*酸二甲酯盐*(代"酸")盐 Copper gluconate 23150-65-4
ARB10400 人可溶性肿瘤坏死因子-1(sTNF-1)ELISA代测服务 Human soluble tumor necrosis factor1,stnf-1 ELISA KIT
CYB168013 豚鼠血清 10ml/瓶
1400-61-9 Nystatin    制霉菌素
H0501 大牛血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
PY04-084  多粘菌素B  0.5mg/支×10支  每支添加于15ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤培养基基础中，用于蜡样芽孢杆菌的MPN值测定
SJ0615 Validamycin 井冈霉素
BTN71001 柱式病毒RNAOUT Column Viral RNAOUT
ARB13609 兔子视黄醇结合蛋白4(RBP-4)含量检测 Rabbit retinol binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
ARB11430 人热休克蛋白47抗体(HSP47-Ab)ELISA检测服务 
Western中分子量蛋白Marker 蛋白质研究关键词：Western中分子量蛋白Marker,Western MidiWT Protein Marker,WE0292

ARB10582 人网膜素(omentin)ELISA代测服务 Human omentin ELISA KIT
BL1439 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚红
ARB10233 人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)Elisa方法检测 Human interferon-inducible protein 16,ifi16/p16 ELISA KIT
ET103 Long Taq DNA polymerase
SJ0784 延胡索酸
HC0219 大龙系列
ARB11578 人基质金属蛋白酶YZ因子2(TIMP-2)定量分析 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 2,timp-2 ELISA KIT
ARB13882 猪白细胞介素15(IL-15)ELISA检测服务 Porcine interleukin 15,IL-15ELISA KIT
5-*基荧光素 DMT 3326-34-9
人纤溶酶 Sinapic acid 9001-90-5
迪夫快速染色液 Diff-Quik Stain  2×100ml|2×500ml|3×100ml|3×500ml
PY02-041  普通肉汤培养基  250克  
F030704 BIOTIN标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*BIOTIN
ARB10409 人可溶性粘附分子(SAm)酶标法分析 Human soluble adhesion molecules,sam ELISA KIT
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·Alexa Fluor 488/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号：WE0327
英文名称：Annexin V-Alexa Fluor 488/PI Apoptosis Detection Kit
规格：50次
  本试剂盒是一种采用Annexin V-Alexa Fluor 488与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
  细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色， 因此通常将Annexin V与PI配合染色， 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。

试剂盒组成：

 

组份	50次
4×Binding Buffer	10ml
Propidium Iodide，PI	500μl
Annexin V-Alexa Fluor 488	250μl

注意事项：
1、消化细胞时不能用含EDTA的胰酶。
2、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
3、需自备PBS和去离子水。
4、荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
5、PI对人体有刺激性，请注意适当防护。
6、请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作步骤：

1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。

2、用去离子水按1:3稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V-Alexa Fluor 488 和10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。

实验图例：

Jurkat细胞用顺铂诱导凋亡后用Annexin V-Alexa Fluor 488/PI双染流式分析图谱
储存条件：2～8℃，避光保存

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