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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京HRP标记抗His标签单克隆抗体多少钱,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京HRP标记抗His标签单克隆抗体多少钱
编号:WE0335
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:HRP Conjugated Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
北京HRP标记抗His标签单克隆抗体多少钱极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·细菌蛋白抽提试剂盒
编号:WE0261
英文名称:Bacterial Protein Extraction Kit
规格:100次
本试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白及转染昆虫细胞的蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎,有效避免了外源蛋白的污染。细菌蛋白抽提试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNase I和蛋白酶YZ剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP,Western Blot,蛋白纯化等下游操作。
试剂盒组成:
组份 | 100次 |
Bacterial Protein Extraction Reagent | 100ml |
Protease Inhibitor Cocktail | 1ml |
Lysozyme(50 mg/ml) | 200μl |
DNaseⅠ(1000U/ml) | 100μl |
保存条件:Lysozyme、DNaseⅠ、Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于从新鲜或冻存细菌和昆虫细胞中提取蛋白。
2、本品采用Tris缓冲系统,蛋白提取后的纯化操作,请使用相同的缓冲系统。
3、使用本产品获得的蛋白裂解液,可用BCA或Bradford法进行蛋白定量。
4、对于特殊的菌株,如果抽提效果不理想,可在抽提蛋白前冰冻样品。
5、根据具体情况,可在本产品中加入蛋白酶YZ剂、盐、螯合剂、还原剂等。
使用方法:
细菌可溶性蛋白提取1、5000×g离心10分钟,收集菌体。
2、可选步骤:每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入1μl DNase I(1000U/ml)、2μl Lysozyme(50 mg/ml)和10μl Protease Inhibitor Cocktail,涡旋震荡混匀。
3、按照每克菌体沉淀加入20ml Bacterial Protein Extraction Reagent的比例,向菌体沉淀中加入抽提液,充分涡旋或用移液器上下吹打直至菌体完全重悬。
4、重悬后,室温孵育10-15分钟(放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
5、15000×g离心5分钟。
6、转移上清至新的离心管中(上清中即为可溶性蛋白),进行蛋白定量及下游实验。
注意:如目的蛋白以包涵体形式存在,可使用包涵体蛋白溶解液进行溶解或优化表达条件增加可溶性蛋白的表达。
昆虫细胞蛋白提取1、低速离心收集细胞。每1ml Bacterial Protein Extraction Reagent中加入10μl Protease Inhibitor Cocktail即为1×工作液。
2、称量细胞湿重,按10ml/g的量加入1×工作液。
3、重悬后,冰上孵育20分钟(冰上放置时间应根据细胞类型不同进行调整)。
4、15000×g离心15分钟,分离可溶性蛋白。
常见问题分析 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
目的蛋白不溶 | 目的蛋白表达为包涵体 | 优化表达条件或使用包涵体蛋白溶解液 |
在蛋白抽提试剂中加入Lysozyme 和DNase I |
加入Lysozyme 后目的 蛋白仍没有提取出来 | 温度过低 | 将使用试剂恢复至室温 |
Lysozyme 活性降低或失活 | 加入更多的Lysozyme 或更换新的酶 |
提取物粘度高 | DNase I 活性降低或失活 | 加入更多的DNase I 或更换新的DNase I |
将*离子的终浓度增加至2 mM |
蛋白抽提后仍有大 部分蛋白存在于沉淀中 | 蛋白量过大 | 加入Lysozyme及DNase I |
蛋白抽提试剂有沉底析出 | 温度过低 | 将蛋白抽提试剂恢复至室温 |
储存条件:-20℃
北京HRP标记抗His标签单克隆抗体多少钱关键词:重组His标签抗体,HRP标记抗His标签单克隆抗体,小鼠抗重组His标签,WE0335,HRP标记重组His标签抗体
·TRIzon试剂(总RNA提取)
编号:WE0191
英文名称:TRIzon Reagent
规格:100ml
TRIzon是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围广泛,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。样品在TRIzon中被充分裂解的同时能够限度地保证RNA的完整性。在加入*仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译等。
自备试剂:*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、本品中含有*酚,具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛,应立即用大量的水冲洗并前往医院ZL。
4、样品用TRIzon 匀浆后,如不即刻加入*仿,置于-70℃下可放置一个月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2~8℃可以保存一周,-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,Northern Blot等。
6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213A)对RNA进行处理。
操作步骤:
1.各种材料的处理
1a.植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRIzon中迅速研磨,每30-50 mg组织加入1ml TRIzon,混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1b.动物组织:取新鲜或-70℃冻存的动物组织尽量剪碎,每30-50 mg组织加入1ml的TRIzon,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入TRIzon 1ml混匀。
注意:样品体积一般不要超过TRIzon体积的10%。
1c.单层培养细胞:吸去培养液,可直接在培养板中加入适量TRIzon(每10cm2面积需要1ml TRIzon),用取样器反复吹打使细胞裂解。也可用胰蛋白酶处理后,将细胞溶液转移至RNase-Free的离心管中,300×g离心5 min,收集细胞沉淀,仔细吸除所有上清,加入TRIzon 1ml混匀。
注意:
1)收集细胞数量不要超过1×107。
2)TRNzol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定。如果TRIzon加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集细胞时一定要将细胞培养液去除干净,否则会导致裂解不完全,造成RNA的产量降低。
1d.细胞悬液:离心收集细胞。每5×106-1×107动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加入1ml TRIzon。
注意:
1)加入TRIzon前不要洗涤细胞,以免RNA降解。
2)一些酵母和细菌细胞可能需要匀浆仪或液氮研磨处理。
1e.血液处理:直接取新鲜的血液,加入3倍体积TRIzon(推荐0.25ml全血加入0.75mlTRIzon),充分振荡混匀。
1f.可选步骤:对于蛋白、脂肪、多糖或胞外物质含量高的样品,如肌肉组织、脂肪组织或植物的块茎,可以在匀浆处理后4℃,12000rpm(~~13400×g)离心10分钟以除去不溶物质,此时沉淀中含胞外物质、多糖和高分子量的DNA,而RNA存在于上清中。
2、样品中加入TRIzon后反复吹打几次,使样本充分裂解。室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、向以上溶液中加入*仿,每使用1ml TRIzon加入0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2-3分钟。
4、4℃下12000rpm离心15分钟,此时样品分成三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA 主要在水相中,把水相(约600μl)转移到一个新的RNase-Free离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇,颠倒混匀,室温放置10分钟。
6、4℃ 12000rpm 离心10分钟,弃上清。
7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml TRIzon用1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
8、4℃ 12000rpm离心3分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃RNA沉淀。
注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。
9、室温放置2-3分钟,晾干。加入30-100μl无RNase的水,充分溶解RNA,得到的RNA保存在-70℃,防止降解。
注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。
储存条件:2~8℃避光。
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PY08-048 BS琼脂 9CM 10皿/盒,用于分离培养沙门氏菌属细菌
PC4201 THERMOscript One Step qRT-PCR Kit(一步法荧光定量耐热反转录PCR试剂盒)
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葡萄糖-6-磷酸脱*酶(G6PD)检测试剂盒(简易微板法) 100T
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FMOC-L-甘*酸 Dibenzo-18-crown-6 29022-11-5
电解脱*液(甲*(代"酸")法) 500ml
ARB11672 人维生素D结合蛋白(DBP)含量检测 Human vitamin d-binding protein,dbp ELISA KIT
F030807 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*BIOTIN
CYB164011 羊抗人IgG(1:500~2000)-HRP
RN1201 PLANTeasy 植物RNA提取试剂
PY02-268A 哥伦比亚琼脂培养基基础 250克
CBZ-D-谷*酸 Methyl palmitoleate 63648-73-7
BL1289 8%多聚甲醛
ARB11475 人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA检测服务 Human insulin-like growth factors binding protein 3,igfbp-3 ELISA KIT
F030409 胶体金标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*GOLD
ARB13837 猪γ干扰素(IFN-γ)Elisa分析 Porcine interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
透析袋27mm,截留分子量25kd 1卷,5M
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