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北京百奥莱博专业生产供应北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)价格
规格:1ml|5ml
产地:国产|进口
编号:WE0125
品Pai:百奥莱博
本品是由热启动酶、PCR Buffer、dNTPs、Mg2+以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,具有高保真性、高延伸性、低偏好性的特点,对复杂的DNA模板(如高GC含量模板)有均衡的扩增效率,特别适合于二代建库中多重PCR的扩增。
本品所含的GX热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品有效提升了基因组中高GC或高AT区域的扩增效率,降低扩增偏好性从而提高测序覆盖度。
产品组成:
组份 | 1ml | 5ml |
2×HiFi PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、该产品不适用于有修饰的引物。
2、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
3、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
试剂 | 50μl反应体系 |
2×HiFi PCR Mix | 25μl |
Primer Pool | 0.1 -0.3μM |
DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 2 min | |
变性 | 98℃ | 20 s | 30-40 个循环 |
退火延伸 | 65℃ | 90 s |
终延伸 | 72℃ | 5 min | |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
想要了解更多关于
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但马胶 Saponin 9000-16-2
三*乙酸 Phenylhydrazine hydrochloride 76-05-1
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D0502 脱纤维驴血(无菌 袋装) 500ml/1000ml/2000ml
74-79-3 L-Arginine L-精*酸
NH水溶液 1mol/L|10% 100ml|500ml
北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)价格关键词:HiFi PCR Mix for NGS,下一代测序用,高保真多重PCR Mix(下一代测序用),WE0125
·高纯质粒中提试剂盒
编号:WE0163
英文名称:PlaPure Midi Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒提供一种简单、快捷、GX的提取质粒的方法,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方,通过离心吸附柱在高盐状态下GX专一的结合溶液中的质粒DNA,经过两步洗涤,一步洗脱,限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
Buffer P1 | 30ml |
Buffer P2 | 30ml |
Buffer N3 | 40ml |
Buffer PB | 10ml |
Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
Buffer EB | 10ml |
RNase A(10 mg/ml) | 600μl |
吸附柱DL及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2~8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2–8℃保存,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer N3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
7、所有离心步骤均可在室温下进行。
操作步骤:
1、取5-15ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。
注意:质粒拷贝数较低或>10 kb时,可以使用更多菌液通过二次离心将菌体沉淀收集到同一个离心管中,同时后续所加试剂Buffer P1、P2及N3的量需加倍。所加试剂的量必须能够充分裂解菌体,菌体过多、裂解不充分都会降低质粒的提取效率。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮菌体沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,导致提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀6-8次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。并且此步骤所用时间应不超过5分钟,避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入700μl Buffer N3,立即上下颠倒混匀6-8次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。13000rpm离心10分钟。
注意:Buffer N3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5、将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DL中,13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的容积为750μl,如果样品体积大于750μl可分批加入。
6、向吸附柱中加入150μl Buffer PB,13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
8、将吸附柱重新放回收集管中,13000rpm离心1分钟。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜中间部位加入100-200μl Buffer EB,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟。将质粒溶液收集到离心管中。
2)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
3)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Buffer EB在65-70℃水浴预热,适当延长吸附和洗脱的时间,可以增加提取效率。
储存条件:室温(15~30℃)
北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)价格关键词:HiFi PCR Mix for NGS,下一代测序用,高保真多重PCR Mix(下一代测序用),WE0125
ARB13465 鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)酶标法分析 Chicken anti-thrombin Ⅲ,at-Ⅲ ELISA KIT
茜素 PABA 72-48-0
NF-268 AFP阳性对照
碳酸*水溶液(0.05%) 500ml
乙氧基喹*(代"啉") TES sodiu*(代"m") salt 91-53-2
F030804 BIOTIN标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*BIOTIN
13755-38-9 硝普* Sodium Nitroprusside
磁珠法基因组提取试剂盒
4-**氧乙酸* Apple, Malus sylvestris, ext 13730-98-8
ARB10944 人谷*酸脱*酶(GDH/GLDH)Elisa方法检测 Human glutamate dehydrogenase;gdh/gldh ELISA KIT
维生素C* Ammonium molybdate tetrahydrate 134-03-2
ARB10634 人血清淀粉样蛋白P(SAP)代做ELISA实验 Human serum amyloid p,sap ELISA KIT
BTN130628 Lambda核酸外切酶 Lambda Exonulease
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购北京高保真多重PCR Mix(下一代测序用)价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。