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名称:北京dNTP混合溶液(10 mM)价格
规格:1ml|5ml
品Pai:百奥莱博
编号:WE0159
本产品为高质量的脱氧核苷酸(dNTP)的混合物,包括等摩尔的dATP、dGTP、dCTP、dTTP。经过PCR检测的脱氧核苷酸,可与所有的耐热聚合酶配套使用。其中高纯dNTP纯度均达到99%以上,超纯dNTP纯度均达到99.9%以上,不含DNase和RNase。
使用方法:
dNTP(10 mM each)可直接使用,或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于PCR反应、Real-time PCR、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。
储存条件:-20℃。
更多有关北京dNTP混合溶液(10 mM)价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1)
编号:WE0291
英文名称:30% Acr-Bis(29:1)
规格:2×250ml
30%Acr-Bis(29:1)即30%的聚丙*(代"烯")酰胺-N,N"-亚甲双丙*(代"烯")酰胺(Acrylamide-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide)的水溶液,其中Acrylamide与-N,N"-Methylene*(代"b")isacrylamide 的比例为29:1。本产品常用于配制各种浓度的变性及非变性聚丙*(代"烯")酰胺(PAGE)凝胶,进行常规的蛋白或核酸电泳实验,使用方便。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
注:加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触,是否加入上层筛板可根据实际情况选择。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与分离范围
SDS-PAGE 分离胶浓度 | 分离范围 |
6%胶 | 50-150 kD |
8%胶 | 30-90 kD |
10%胶 | 20-80 kD |
12%胶 | 12-60 kD |
15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×) | 10%APS | TEMED |
6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 |
15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 |
20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 |
8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 |
15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 |
20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 |
10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 |
12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 |
15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 |
20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) |
纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×) | 10%APS | TEMED |
2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
北京dNTP混合溶液(10 mM)价格关键词:dNTP Mix(1mM each),dNTP混合溶液,10 mM,WE0159,dNTP混合溶液(10 mM)
·固定组织RNA提取试剂盒
编号:WE0196
英文名称:RNAtiqu FFPE RNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒适用于从固定、石蜡包埋的组织中有效纯化总RNA。适合从小于30 mg的石蜡包埋组织或切片中抽提高纯度的总RNA,本试剂盒无需使用酚/*仿抽提和异丙醇沉淀,一小时内即可完成多个样品的抽提。本品使用专门优化的裂解液和蛋白酶K,释放固定或组织切片样本中的RNA,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除由交联造成的YZ作用,有效释放组织切片中的RNA,而避免危害RNA的完整性;优化的缓冲系统使裂解液中的RNA可特异结合到硅胶吸附膜上,而其他污染物可流过膜;可通过漂洗步骤有效去除,经过洗脱的RNA可直接用于RT-PCR、Real-Time PCR和印迹分析等实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 |
Buffer GTL | 15ml |
Buffer GL | 25ml |
蛋白酶K | 12.5mg |
蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
RNase-Free Water | 10ml |
过滤柱FM及收集管 | 50套 |
吸附柱RS及收集管 | 50套 |
RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
自备试剂:无水乙醇(新开封或提取RNA专用)、10mM PBS(PH7.4)(固定液中的组织)。
产品特点:
1、安全-无酚*仿等有机物抽提。
2、快速-可在一小时内完成实验。
3、GX-提取RNA得率高、纯度好。
4、可从石蜡包埋或固定样品中提取高纯RNA。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入0.625ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、预防RNase污染,应注意以下几方面:
1)使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
3、获得样品后,要尽快将样品在4%-10%的中固定,固定时间以14-24小时为宜,时间过长易导致RNA断裂,影响下游实验。
4、确保包埋前的样品彻底脱水,残留的会YZ蛋白酶K 的作用。
5、次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
6、使用前请检查Buffer GTL和Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GTL和Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、样本处理:
① 石蜡包埋样本:用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织。
② 等固定液中的样本:取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,重复3次,可直接进行第7步操作。
2、将组织块切成5-10μM的薄片。
注意:如果样品表面已经暴露在空气中,请将接触空气的2-3片弃掉不用。
3、取约1×1cm2的切片(共约4-5片切片)置于离心管(自备)中,加入1ml二甲*,盖紧管盖,涡旋震荡10秒。
4、12000rpm离心2分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃沉淀。
5、加入1ml无水乙醇,涡旋震荡混匀。12000rpm离心2分钟,弃上清,注意不要吸弃沉淀。
注意:乙醇可以除去样品中残余的二甲*。
6、打开管盖,室温或至37℃孵育10分钟,直至无乙醇残留。
7、加入150μl Buffer GTL,重悬沉淀;加入10μl 蛋白酶K ,涡旋震荡混匀。
8、56℃孵育15分钟,直至样品完全溶解。80℃孵育15分钟。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成RNA断裂,产生RNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到80℃后再把样品置于80℃孵育。
9、加入320μl Buffer GL,涡旋震荡彻底混匀。
10、将步骤9中所得到的溶液全部加入到已装入收集管的过滤柱中。12000rpm离心1分钟,收集滤液。
11、在步骤10得到的滤液中,加入720μl无水乙醇,涡旋震荡彻底混匀。
注意:加入无水乙醇后,可能有少量沉淀物析出,但不影响后续操作。
12、将步骤11中所得的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
13、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
14、重复步骤13。
15、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应(酶切、PCR等)。
16、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-50μlRNase-Free Water,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集RNA溶液,-20℃保存RNA。
注意:
1)RNase-Free Water体积不应小于20μl,体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量,可用20-50μl新的RNase-Free Water重复步骤16。
3)如果要提高RNA浓度,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,重复步骤16。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京dNTP混合溶液(10 mM)价格关键词:dNTP Mix(1mM each),dNTP混合溶液,10 mM,WE0159,dNTP混合溶液(10 mM)
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PY02-141 TTC营养琼脂 250克
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BFD049 克伦-莱克-沙丁-三联检测卡
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京dNTP混合溶液(10 mM)价格。
温馨提示:不可用于临床ZL。