TRAP-PCR银染法(KGSA006-1)实验服务目的通过TRAP-PCR银染法检测鉴定样品中端粒酶活性
实验服务原理端粒DNA与细胞的寿命密切相关,而合成又依赖于端粒酶。正常人体细胞中不能检测出
端粒酶活性的表达,而肿瘤细胞株及大多数肿瘤组织中的端粒酶活性却异常的高表达。TRAP-银染法端粒酶活性检测试剂盒是采用端粒重复序列扩增的方法,利用银染技术检测端粒酶的活性。阳性结果在凝胶电泳上显示相隔6 bp的梯状条带,条带的深浅表示端粒酶活性的大小。
实验服务材料 试剂:TRAP-PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、PCR相关试剂、聚C3H5NO电泳
试剂、蛋白定量试剂等
仪器:涡旋仪、低温高速离心机、PCR扩增仪等
实验服务内容与方法1、细胞端粒酶或组织标本端粒酶的提取
2、PCR扩增
3、聚C3H5NO凝胶电泳
4、银染
荧光定量PCR法(KGSA006-2)实验服务目的通过荧光定量PCR法检测鉴定样品中端粒酶活性
实验服务原理端粒酶蛋白催化亚基(TERT或TRT)具有反转录酶的主要特征,其表达在正常细胞中受
到YZ,与端粒酶活性的表达一致。实时荧光定量PCR端粒酶检测实验通过检测TERT的mRNA表达水平来间接反应端粒酶的活性。
实验服务材料试剂:荧光定量PCR法端粒酶活性检测试剂盒、Lysis buffer、荧光定量PCR相关试剂、蛋白定量试剂等
仪器:涡旋仪、低温高速离心机、荧光定量PCR扩增仪等
实验服务内容与方法1、样本lysis buffer提取 1:HUVEC cells
2、进行逆转录获得cDNA; 2:HELA cells
3、实时定量PCR反应 3:A549 cells
实验服务周期2周至8周(具体视样品数而定)
结果提交提交实验报告书(包括实验材料、试剂、仪器、实验过程方法、结果及分析)、原始数据、图片,文本或电子版。