姬姆萨染色液(吉姆萨染液)北京厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应姬姆萨染色液(吉姆萨染液)北京厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：姬姆萨染色液(吉姆萨染液)北京厂家
编号：BTN170502
英文名：Giemsa Staining Solution
品Pai：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：250mL
本产品由溶液A(Giemsa Stain 储存液,10×)和溶液B(磷酸盐缓冲液)组成,溶液A：溶液B=1：9混合成工作液后使用；亦可以分开使用,即先用Giemsa Stain染色,再经磷酸盐缓冲液处理,亦可以得到满意的染色效果。

姬姆萨色素(又称吉姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Giemsa染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深,核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。本产品以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含本公司特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输,室温避光保存,有效期一年。

使用方法：(仅供参考)

一、一步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制：
按照溶液A：溶液B=1：9 混合,即取1 份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1～3min。
3. 将血液涂片或涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染15～30 min。
4. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
5.(可选)0.1%乙酸分化数秒。
6.干燥,镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

二、两步法涂片染色
1. Giemsa工作液的配制：
按照溶液A：溶液B=1：4混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到4份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2. 常规方法制备血液涂片或涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1～3min。
3. 将血液涂片或涂片放置染色架上,滴加Giemsa工作液覆盖涂片,室温滴染10～15min。
4. 加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置15min。
5. 用自来水或蒸馏水从玻片一端缓慢的轻轻冲洗。
6.干燥,镜检。

染色结果：

嗜酸性颗粒	粉红色
嗜碱性颗粒	紫蓝色
中性颗粒	淡紫色

三、组织切片染色
1．Giemsa工作液的配制：
按照溶液A:溶液B=1:9混合,即取1份溶液A(Giemsa Stain储存液,10×)加入到9份溶液B(磷酸盐缓冲液)中充分混匀,即成Giemsa工作液(此工作液不易保存,现配现用)。
2．新鲜组织立即置于Regaud固定液(按3%重铬酸*:甲醇=4:1 配置,用前混匀,1-2天即失效)固定2天,期间更换1次固定液。
3．3%重铬酸*固定1天。
4．流水冲洗16个小时或过夜。
5．照常规脱水、包埋。
6．切片厚度约为5μm,常规脱蜡至水。
7．蒸馏水清洗2次,每次1～2min。
8．入含Giemsa工作液染缸,浸染18～24h。
9．蒸馏水稍清洗。
10．0.5%乙酸清洗1～2min。
11．自来水稍洗。
12．用无水乙醇迅速脱水3次,每次5～10s。
13．二甲*透明,中性树脂封固。

染色结果：

细胞核	蓝色至紫色
细胞质	淡蓝色
嗜铬细胞	黄绿色
结缔组织	淡红色

注意事项：
1．血液涂片或涂片应厚薄均匀,否则影响染色效果。
2．涂片染色中Giemsa染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。
3．如果染色过深或过浅,应调整染色时间或染色液的浓度。
4．Giemsa涂片染色和组织切片染色中,pH值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,否则影响染色效果。
5．染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。
6．Giemsa组织切片染色中,染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速冲洗,避免浮面沉淀物污染切片后难以洗脱。
7．0.5%乙酸分化常用于Giemsa组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应适量下调。0.5%乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止。
8．组织切片染色中,无水乙醇脱水要迅速,否则切片亦褪色。
9．本染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。

除姬姆萨染色液(吉姆萨染液)北京厂家外，我公司正在打折促销以下产品：
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·10nt随机引物(0.5μg/uL)
编号：BTN131227
英文名称：Octomer
规格：250
本产品为长度为10nt的随机引物，序列为5´-(NNNNNNNNNN)-3´，主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响？
A: 文献报道，长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。

·通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒
编号：BTN101114
英文名称：Universal Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
规格：50次
本试剂盒可以用于RT-LAMP等温扩增，RT-LAMP即逆转录和Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)的结合，专门用于快速扩增RNA。LAMP是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温条件下(63℃左右)30－60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于RT-PCR技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

产品特点：
1.高特异性，由于同时使用4-6条特异引物，所以特异性比RT-PCR更高。
2.高扩增效率，扩增效率可达到10E9-10E10，比PCR灵敏一个数量级，可检测到单拷贝的RNA分子
3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增，不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用，包含了除引物和模板RNA外的所有成份，十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果，不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

试剂盒组成：

成分	规格
RT-LAMP Mix(2×)	0.5ml
AMV-Bst混合液	75μl
对照引物混合物	40μl
对照模板	5μl
MgCl2(25mM)	0.2ml
RNase-free水	1ml
说明书	1份

注：RT-LAMP Mix(2×)稀释到1×时，已经有8mM Mg2+，本试剂盒提供的MgCl2(25mM)用于用户优化条件用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在冰上溶解除酶外的各种组份，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：

成份	样品管	阴性对照
RT-LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
自备FIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
自备BIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
自备F3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
自备B3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
自备Loop F引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
自备Loop B引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
自备模板 RNA	1-100ng	不加
AMV-Bst 混合液	1.5μl	1.5μl
补水到	20μl	20μl

 注：如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL)，则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀，置于60-65℃保温30-120分钟。注意：如果不使用Loop引物，则Z好保温120分钟；如果使用Loop引物，则Z好保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。此酶有外切酶活性，所以必须灭活。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱；
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；
c)荧光定量检测。
5. 结果分析：
a)如果没有扩增，则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供阳性对照，反应按下表设置：

成份	阳性对照管
RT-LAMP Mix(2×)	10μl
对照引物混合物	4.0μl
对照模板	1μl
AMV-Bst 混合液	1.5μl
水	3.5μl

 混匀后，置于60℃保温120分钟，其余操作同上。注意：本对照引物中没有Loop引物，所以Z好保温120分钟。
b)如果阳性对照能够扩增出，则说明试剂盒没有问题，可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带，则是试剂盒的问题，请跟厂家联*(代"系")。

注意事项：
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外，尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP，加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起，配制成10.浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此，必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染，所有相关试剂必须全部更换，必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因，可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床ZL、食品等用途。

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