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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN100805C型酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN100805C型酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)现货促销
编号:BTN100805C
产地:国产|进口
品Pai:百奥莱博
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CYB163007 羊抗人IgM-FITC(μ链特异)
ARB10133 人P27蛋白(P27)酶联免疫定量检测 Human p27 protein ELISA KIT
F040305 猪IgG抗原 Pig IgG
HC0304 Biohit数字瓶口滴定分液器
BL1310 2×Taq PCR MasterMix(不含染料)
玫瑰红6G Tricyanic acid 989-38-8
2-*基-4-羟基 D-Fructose-1,6-diphoshate Magnesium salt 28166-41-8
Tris平衡酚(pH>7.8) 100ml
525-79-1 Kinetin 激动素
70-18-8 L-谷胱甘肽(还原型)/还原型谷胱甘肽
台氏液(无*) Tyrode"s Solution 500ml
PY01-175 酚红 ind 25克
ARB13954 猪载脂蛋白A1(Apo-A1)elisa检测 Porcine apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
次硝酸铋 Aluminum acetate basic 1304-85-4
ARB12727 小鼠3-硝基酪*酸(3-NT)elisa检测操作说明书 Mouse 3-nitrotyrosine,3-nt ELISA KIT
HC0143 暗盒
F040313 猴IgG抗原 Monkey IgG
BTN120674 酪蛋白 Casein
BTN130422 CM交换介质 CM Medium
BTN100805C型酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)现货促销关键词:酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用),百奥莱博,BTN100805C
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·柱式藻类RNA大量提取试剂盒
编号:BTN120504
英文名称:Algae RNA Column large-scale extraction kit
规格:5次
本试剂盒是在本公司柱式藻类RNA提取试剂盒(BTN120503)的大提升级产品,跟柱式藻类RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1.样品处理量大,Z多可以处理50mL液体藻类培养物。
2. 操作简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
3. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Northern杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
4. RNA产量高,一般在20-70μg/mL液体藻类培养物(约2.0×107个细胞)。非酶细胞破裂法,适用于各种形态的藻类和各个种属的藻类。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 50ml |
溶液C | 150ml |
溶液D | 50ml |
大提离心吸附柱 | 5套 |
通用洗柱液 | 100ml |
RNA 洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1. 将50mL液体藻类培养物在塑料离心管中5000-7,000rpm 4℃离心1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入10mL溶液A并充分吹打混匀。注意:溶液A存放时容易产生沉淀,如果有沉淀,用前请置于65℃融化并充分摇晃均匀。
3. 加入10mL溶液B,剧烈振荡30秒。
4. 65℃保温5分钟。注意:不要超过5分钟,否则RNA 容易降解。
5. 5000-7,000rpm 4℃离心3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
6.在上清液中加入2mL自备的*仿,充分振荡30秒混匀。
7. 4℃ 5000-7,000rpm离心3~5分钟,转移上清液到一自备的、干净的50mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清液(约10mL左右)3倍体积的溶液C和1倍体积的溶液D,充分混匀。如果上清为10mL,则加入30mL溶液C和10mL溶液D。
9. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要室温放置2-3分钟以让RNA跟吸附膜充分结合,然后5000-7,000rpm室温离心30-60秒,弃收集管中的穿透液,然后再加入后一批混合液,重复操作,直到混合液全部挂柱。
10. 次洗涤:将10mL 通用洗柱液加到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 第二次洗涤:一次洗涤一般足够去除杂质,但如果样品OD260/280 比值不高,可以再用10mL 通用洗柱液重复上步洗涤一次。
12.室温离心空柱子(带收集管)半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 50mL塑料离心管中,加入1mL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA完整性的电泳检测:
注意:普通DNA上样液不含变性剂,更没经过去RNase处理,所以Z好不要用于RNA电泳。
16. RNA产量和纯度产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在DEPC 水中检测OD260和OD280,否则光吸收比在TE中测得的低10%-15%;也不要稀释过度,使OD读数在仪器的有效范围之外,这样得到的OD 比值没有意义。
疑难解答:Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组DNA 吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议Z好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液RNAload可以使RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用TAE或超快电泳液SuperBuffer-2,Z好不要使用TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用5分钟柱式DNA 清除剂、非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
BTN100805C型酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用)现货促销关键词:酸酚-*仿-异戊醇混合液(RNA提取用),百奥莱博,BTN100805C
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·miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)
编号:BTN90203
英文名称:miRNA isolation Kit(precipitation method)
规格:50次
microRNA(miRNA)和RNA干扰研究是当今分子生物学研究的一大热点,但快速分离和纯化相关的小RNA十分棘手,是目前研究 miRNA的主要技术障碍之一。目前国外相关产品寥寥无几,并且基本采用先提总 RNA 再富集其中的小RNA的两步法策略,国内相关产品更是一片空白。百奥莱博为满足广大用户的需求,开发了具有自主知识产权的本产品。
试剂盒特点:1.从总 RNA中直接分离纯化小RNA,不需要使用离心吸附柱。得到的小RNA 长度大部分在 200nt以下,包括 5S RNA、tRNA、 miRNA、Pre-miRNA、pri-miRNA、siRNA、shRNA和snRNA等。
2. 操作简单快速,整个过程只需要约30分钟。
3.小RNA 纯净,OD260/280一般都在 1.9以上。
4.可用于RT-PCR、miRNA 标记、microarray等后续实验。
5. 此方法能去除 90%左右的大 RNA,但会有少量残留大 RNA,如果需要纯度更高,可以选择 PAGE 回收法。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
溶液A | 5ml |
溶液B | 10ml |
溶液C | 50ml |
RNase-free 水 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:1.在纯化好的100μl 总 RNA(含大 RNA和小RNA)中,加入50μl溶液A,振荡 30秒混匀。如果 RNA样品体积不足 100μl,可以用RNase-free水补足,如果体积超过 100μl,可以用本公司核酸浓缩剂浓缩到 100μl。
2.室温 12000~15000g离心 30分钟。小RNA在上清中,大 RNA在沉淀中。
注意:离心时间不能短于30分钟,否则大 RNA沉淀不充分。
3.小心将上清液转移到干净的1.5mL RNase-free塑料离心管中。留下的沉淀可以用 75%乙醇洗涤后做大 RNA电泳对照用。
4.在上清液中加入200μl溶液B,振荡 30秒混匀。
5.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。由于溶液B中有惰性的助沉剂,所以得到的小RNA沉淀肉眼可见。
6. 加入1mL溶液C,震荡数秒。
7.室温 12000~15000g离心 10分钟,小心弃上清。
8. 短暂离心数秒,小心吸弃残留液体(约50μL左右)。
9.在沉淀中(含小RNA)加入30-100μl RNase-free 水,吹打溶解即得小RNA溶液。注意:不能只吹打管底部分,还需要吹打整个离心管管壁的离心面部分,因为上面也有有小RNA沉淀。
10. Z好先 PAGE-银染检测小RNA 纯度再使用。
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温馨提示:不可用于临床ZL。