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名称:北京现货10%SDS溶液(不含RNase)哪里买
编号:BTN60702
规格:250mL
英文名:RNase-free SDS
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·Cre重组酶
编号:BTN130665
英文名称:Cre Recombinase
规格:50U
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别元件是一个34bp序列,其两端是两个13bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据 loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP 位点的DNA将被融合。两个正向重复 loxP位点间的DNA将以环状形式切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。
产品用途:
➤ 两个loxP位点之间DNA的切割。
➤含loxP位点DNA分子的融合。
➤ loxP位点之间DNA序列的翻转。
产品组成:
成分 | 规格 |
Cre重组酶,1000 U/mL | 50μl |
10× Reaction Buffer | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟使0.25μg的pLox2+对照DNA产生位点特异性重组所需要的酶量。重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行*苄抗性平板筛选。
热灭火:70℃加热10分钟。
使用举例:1.按下列组份配制反应液:
DNA溶液 | - |
10×Reaction Buffer | 5μl |
Cre重组酶 | 1μl(1U) |
超纯水 | Up to 50μL |
2.37℃孵育30分钟。
3.70℃孵育10分钟,灭活酶活。
注意事项:1.建议进行琼脂糖凝胶电泳前,将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
2.由于Cre重组酶反应是一个动态平衡过程,用loxP2+对照底物仅有20-30%发生重组。由于重组产物的量较少,故*化乙锭染色后呈现微弱条带,同时伴有底物染色强度相应减弱。
3.延长温育时间不会提高重组效率,相反,还可能导致大分子量重组产物的生成。
4.反应中增加Cre重组酶量将形成loxP依赖性Cre-DNA复合物,从而YZ重组反应。
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改良Gram-Weigert革兰染色液(**(代"胺")结晶紫法) 5×50ml
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L-谷*酸二甲酯盐*(代"酸")盐 Copper gluconate 23150-65-4
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·蛋白marker(14.4~97.4kD)
编号:BTN70102B
英文名称:Protein Marker(14.4-97.4kD)
规格:20次
本产品为蛋白质电泳标准系列,为已知的标准蛋白质混合物,在SDS-PAGE时可以作为分子量标准,估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:1.简单,不需要自己单独购买各种蛋白质配置。
2.本产品有粉末型和溶液型两种,十分稳定。
3.本系列三种产品涵盖从 3.3 KD-200 KD的分子量范围。
所含成分及其分子量 | A型 | B型 | C型 |
肌球蛋白重链 | 200.0KD | | | 有 |
*调素结合蛋白 | 130.0KD | | | 有 |
兔磷酸化酶B | 97.4KD | | 有 | 有 |
牛血清白蛋白 | 66.2KD | | 有 | 有 |
兔肌动蛋白 | 43.0KD | | 有 | 有 |
牛碳酸酐酶 | 31.0KD | | 有 | |
人生长激素 | 22.0KD | | | |
大豆胰蛋白酶YZ剂A | 20.1 KD | 有 | 有 | |
鸡蛋清溶菌酶 | 14.4KD | 有 | 有 | |
人工合成肽1 | 7,823D | 有 | | |
人工合成肽2 | 5,856D | 有 | | |
人工合成肽3 | 3,313D | 有 | | |
产品组成: 成分 | A型 | B型 | C型 |
蛋白分子量标准A型(低分子量) | 15T | - | - |
蛋白分子量标准B型(中分子量) | - | 20T | - |
蛋白分子量标准C型(高分子量) | - | - | 10T |
1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml | 0.5ml |
说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
使用方法:一、干粉型的使用:
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70102A)需要150μL。
中分子量标准(BTN70102B)需要200μL。
高分子量标准(BTN70102C)需要100μL。
2.沸水浴中加热 5分钟。
3.短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
4.使用时每次取一管,室温放置直到液体融化后,沸水浴中加热3~5分钟,即可上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
5.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用:
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70102A型推荐使用Tricine-甘油SDS-PAGE胶、BTN70102B 推荐使用12%的分离胶、BTN70102C 推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
疑难解答:1.分子量不同,SDS-PAGE的分离胶和浓缩胶浓度不同。需要自己根据具体情况调整。
2.电泳之后可将胶进行染色观察,如果使用传统配方进行染色时效果不好或考虑其毒性,请选择本公司的一步式蓝色PAGE染液(BTN61204),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等物点,是常规蛋白染色液的替代品。
10%SDS溶液(不含RNase)如何储存?
化学试剂的变质,大多数情况是因为受外界条件的影响,如空气中的氧气、二氧化碳、水蒸气、空气中的酸碱性物质以及环境 温度、光照等,都可使化学试剂发生氧化、还原、潮解、风化、析晶、稀释、锈蚀、分解、挥发、升华、聚合、发霉、变色以及燃爆等变化。经常检查储存中的化学 试剂的存放状况发现实际起过的储存期或变质应及时报告,并按规定妥善处理 ( 降级使用或报废) 和销帐。在正常储存条件下,一般化学试剂贮有不宜超过2年,基准试剂不超1年。为了避免环境和其他因素的干扰,所有化学试剂一经取出不得放回贮有容器: 属于必须回收的试剂或指定、退库、的试剂,必须另设专用容器回收或贮存,具有吸潮性或易氧化,易变质的化学试试剂必须密封保存,避免吸湿解,氧化或变质。 定期盘点,核对出现差错应及时检查原因,并报主管领导或部门处理。
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温馨提示:不可用于临床ZL。