特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、YL及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")生物素化兔IgG供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:生物素化兔IgG供应
英文名:Biotin-Rabbit IgG
产地:国产|进口
编号:BTN131102
品Pai:百奥莱博
规格:5mg
本产品为生物素标记的IgG,溶于含有0.04%叠氮*的PBS或HBS(10mM HEPES,0.15M NaCl,pH7.8)。可用于检测细胞或组织中的低浓度的Fc受体或抗免疫球蛋白抗体。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
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我公司的生物素化兔IgG供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·miRNA尿素-PAGE上样液
编号:BTN70608
英文名称:miRNAload
规格:1.5mL
本品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳上样液,含有RNase-free的去离子甲酰胺、RNase-free的EDTA和RNase-free的染料等。
产品特点:
1. 即开即用,不需要制备RNase-free的各种溶液。
2. 使用简单,电泳时,先将miRNA样品与本上样液1:5混合,70℃加热处理2-3分钟后,0℃冷却即可直接上样。
3.染料分子小,不会干扰mi R N A的染色。
4.跟本公司的一站式miRNA 尿素-PAGE电泳套装兼容。
5.还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
·大肠杆菌TG1电击感受态细胞
编号:BTN160801
英文名称:E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell
规格:50μL×5
TG1电击感受态细胞只能用于电击转化,不能用于热激转化。TG1 来源于E. coli K-12菌株,是目前生长速度Z快的克隆用大肠杆菌菌株,在平板上37℃,7小时可见克隆,是主要的噬菌体展示用菌株,同时也可用于普通质粒的构建,lacIqZΔM15的存在使其可以用于蓝白斑筛选等实验;但不含核酸酶endA1突变,体内核酸酶含量较高,提取质粒时推荐使用质粒提取试剂盒中去蛋白液以去CJ体内大量的核酸酶。TG1电击感受态细胞适用于噬菌体展示文库的构建,经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率>0.5×1010cfu/μg DNA。
菌株基因型:[F´ traD36 proAB lacIqZΔM15] supE thi-1 Δ(lac-proAB)Δ(mcrB-hsdSM)5(rK–mK–)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC培养基等。
使用方法:
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟,待其沥干水分,正置5分钟,使乙醇充分挥发,待乙醇挥发干净立即插入冰中,压实冰面,电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖,冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的TG1电击感受态细胞插入冰中5分钟,待其融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀,避免产生气泡,立即插入冰中。(注:对于质粒,测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19;对于连接产物,请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬,DNA浓度不超过100 ng/μL,体积不超过5μl/50μl感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中,避免产生气泡,盖上杯盖。
4.启动电转仪,设置参数:C=25 μF,PC=200 Ω,V=1.8 kV(此为BioRad电转仪推荐参数,也可按所用电转仪推荐的参数操作),将电击杯快速放入电转槽中,电击完成快速插入冰中。
5. 2分钟后从冰中取出电击杯,放室温,加入1mL 不含抗生素的无菌SOC培养基(室温),用1mL 枪吹吸电击杯底部数次混匀后,转移到50mL离心管(BD Falcon 50mL 锥形离心管等),向离心管中补加SOC培养基至10mL。倾斜45 度放入摇床,37℃,225 rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌,重悬后取100-200μl 涂布到含相应抗生素的SOC 平板上(因菌量较大,若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养13-17小时。
注意事项:
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡,气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐,乙醇,蛋白及缓冲液等污染时,转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导,增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率,推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化,Z好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物,保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率,增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作,吸取感受态细胞时避免用力过猛,以免剪切力过大损伤细胞膜,降低转化效率。转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少用于涂板的菌量。
8.电击感受态细胞Z好保存在-80℃以下,高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。
生物素化兔IgG供应关键词:BTN131102,Biotin-Rabbit IgG,生物素化兔IgG
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·柱式冻存血液DNA提取试剂盒
编号:BTN120720
英文名称:Frozen blood DNA column extraction kit
规格:50次
血液DNA是重要的研究材料,但是血液DNA在常温下存放的时间很短,因此很多血液样品都是冻凝存放。由于冻存过程中形成的冰晶会刺破细胞膜,释放出DNA,因此从冻存血液中GX提取DNA一直是个棘手的问题。本产品就是北京我公司开发的专门用于从冻存血液中提取DNA的试剂盒。
产品特点:
1.适用于各种动物血液,包括禽类和昆虫。
2. 微量提取,每次可处理400μL 血液。
3. DNA 完整性好,纯化后长度在20-50 Kb 之间。
4. DNA 纯净,OD260/OD280在1.8-2.0 之间,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。DNA产量一般在10μg/mL 血液。
5. 操作简单,整个过程约20分钟,室温操作,适合大规模样品处理。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 20ml |
溶液B | 20ml |
溶液C | 100ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
DNA洗脱液2.0 | 50ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
使用方法:1.从-20℃或更低的冰箱中取出血液样品,室温下静置融化。
2. 将400μL 解冻的血液转移到一个1.5mL的塑料离心管中,加入400μL溶液A,充分震荡混匀。如果是禽类血液,则少加10倍,只加40μL。
3.在混合液中加入400μL溶液B和200μL *仿(自备),振荡1分钟。由于离心管比较满,所以需要确保管底溶液转动起来,否则只是液面振动而已。
4. 4℃12000 g离心10分钟,小心将上清转移至一新的1.5mL塑料离心管
中。注意:Z好不要室温离心,如果室温离心,则离心后部分样品的中间白色层可能会很厚,只能得到很少的上清。
5. 将约0.7-0.8mL上清转移到10-15mL塑料离心管中(不要使用玻璃离心管,否则DNA 会吸附到管壁上。常用的培养提质粒用的细菌的培养管即可)。
6. 加入2.5倍上清体积的溶液C(2mL),立即摇晃混匀。
7. 将混合液分多次转移到离心吸附柱中,每次0.7mL左右,转移后静置2-5分钟,以使DNA与膜充分结合,然后室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液,然后再加入0.7mL,重复上述操作,直到全部混合液挂柱。
8.在离心吸附柱中加入0.7mL 通用洗柱液,室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液。
9.在离心吸附柱中再加入0.3mL 通用洗柱液,室温12000 g离心30秒,弃收集管中的废液。
10.室温12000 g离心30秒,去尽残留液体(此步骤十分重要,不要省略,否则残留的含乙醇的通用洗柱液将YZ后续的酶反应)。
11. 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管中,加入50μL DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA 洗脱液2.0在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果更佳。
12.室温12000 g离心30秒,离心管底部溶液即DNA溶液,可立即使用或-20℃长期保存。
13. 本产品所用离心吸附柱吸附能力比较强,如果再次用DNA 洗脱液2.0洗脱,还能洗脱下一些血液DNA。
疑难解答:Q:保存血液样品时温度越低越好吗?
A:不是。Tegelstrom 曾经比较了分别在-70℃,-20℃,4℃保存了6个月的蛙血,发现保存温度越低,血液DNA的断裂越严重。
Q:本产品是否可以用于放量操作?
A:可以在大的离心管中进行放量操作,如每次处理5-100mL 血液,只是客户需要单独购买红细胞裂解液,并按比例增加溶液A和溶液B的用量。
Q:冷冻血液为何DNA产量很低?
A:冷冻过程中形成的冰晶刺破了细胞膜和细胞核膜,红细胞裂解液处理时释放的DNA将进入上清并丢失,所以得到的DNA是没有被冰晶刺破的细胞的DNA。
生物素化兔IgG供应关键词:BTN131102,Biotin-Rabbit IgG,生物素化兔IgG
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·大肠杆菌M15化学感受态细胞
编号:BTN140429
英文名称:E.coli M15 Chemical Competent Cell
规格:0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌M15菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达107。本产品具有卡那霉素抗性。
菌株基因型为:lac ara gal mtl recA+ uvr+ [pREP4 lacI kanaR]。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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温馨提示:不可用于临床ZL。