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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装打折促销
品Pai:百奥莱博
规格:30次
产地:国产|进口
英文名:One-Stop SDS-PAGE Pack
SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法,但是单独配制各种溶液十分繁琐,为此我们公司开发了本产品。
产品特点:
1.一站式,即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
2.安全,将实验人员接触粉末状丙*(代"烯")酰胺的可能降到。
3.灵活,分开提供的丙*(代"烯")酰胺和甲叉双丙*(代"烯")酰胺便于配制各种比例和浓度的SDS-PAGE,满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4.使用改良的浓缩胶缓冲液,由于其含有染料,制备的浓缩胶呈蓝色,便于上样时识别加样孔。
5.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
成分 | 规格 |
丙*(代"烯")酰胺干粉 | 60g |
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉 | 3g |
分离胶缓冲液,4× | 200ml |
浓缩胶缓冲液,4×(含染料) | 100ml |
TEMED | 1.5ml |
过硫*(代"酸")铵(干粉) | 1g |
SDS-PAGE上样液,5× | 1套(1mL) |
SDS-PAGE电泳液,1×(干粉) | 1套(20L) |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但TEMED和5×SDS-PAGE上样液需低温运输,分别在4℃和-20℃有效期一年。
自备试剂:去离子水。
使用方法:1.次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对SDS-PAGE电泳,丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1左右,因为此时PAGE胶的孔径Z小,分辨率。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中(注意:甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉有神经毒性,避免吸入粉末)。配好的30%AB溶液Z好4℃避光保存并在1月内用完。
3.根据平板的面积和胶的厚度估计需要配制的浓缩胶和分离胶的体积。并根据要分离的蛋白质的大小确定选择浓缩胶和分离胶的浓度,参考下表:
蛋白质大小范围(kD) | 浓缩胶浓度 | 分离胶浓度 |
15-45 | 4% | 15% |
15-60 | 4% | 12.5% |
18-75 | 4% | 10% |
30-120 | 4% | 7.5% |
60-200 | 不需要 | 5% |
注:如果上样体积少于10μL,可以不需要浓缩胶。
4.配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):称0.1克过APS干粉到1mL去离子水中,摇晃溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
5.配制分离胶:在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%AB溶液和4×分离胶缓冲液。以下是配制10mL胶的用量,更大体积则各成分用量需按比例增加。丙*(代"烯")酰胺溶液有神经毒性,一定要戴手套操作。
胶浓度 | 用量(单位:mL) |
水 | 30%AB溶液 | 4×分离胶配胶液 |
5% | 5.83 | 1.67 | 2.50 |
6% | 5.50 | 2.00 | 2.50 |
7% | 5.17 | 2.33 | 2.50 |
7.5% | 5.00 | 2.50 | 2.50 |
8% | 4.83 | 2.67 | 2.50 |
9% | 4.50 | 3.00 | 2.50 |
10% | 4.17 | 3.33 | 2.50 |
11% | 3.83 | 3.67 | 2.50 |
12% | 3.50 | 4.00 | 2.50 |
13% | 3.17 | 4.33 | 2.50 |
14% | 2.83 | 4.67 | 2.50 |
15% | 2.50 | 5.00 | 2.50 |
16% | 2.17 | 5.33 | 2.50 |
6.配制浓缩胶(一般使用4%的浓度):在一个25mL的三角瓶中,先按下表的用量加入水、30%A B溶液和4×浓缩胶缓冲液。以下是配制10mL 4%浓缩胶的用量,丙*(代"烯")酰胺溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
胶浓度 | 用量(mL) |
水 | 30%AB溶液 | 4×浓缩胶缓冲液(含蓝色染料) |
4% | 6.17 | 1.33 | 2.50 |
7.将分离胶和浓缩胶溶液摇晃混匀,抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能YZ丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
8.分别加入50μL 10%APS和30-50μL TEMED(这是配制10mL分离胶和浓缩胶的用量,更大体积的胶则用量需按比例增加),迅速摇匀。
9.先灌分离胶,在胶的液面距离顶部1.5 cm的时候,停止灌胶。
10.由于分离胶比重较大,可以立即在上面灌浓缩胶,但灌注时必须小心,不要破坏分离胶和浓缩胶的液面,在浓缩胶液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟。如果不能做到小心灌浓缩胶,则必须待分离胶室温聚合30-60分钟后再灌制。
11.拔出梳子,用1×SDS-PAGE电泳液冲洗加样孔。
12.将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够的1×SDS-PAGE电泳液。本产品提供20升的SDS-PAGE电泳液干粉,将所有干粉溶解在2 L水中即得10×SDS-PAGE电泳液,用时再稀释成1×工作液。
13.在蛋白质样品中加入5×SDS-PAGE上样液(4μL样品中加1μL上样液),100℃煮沸3~5分钟。短暂离心,取上清上样。
14.先用10 mA的电流电泳(对0.75mm厚×14cm×14cm的胶)直到染料进入从浓缩胶进入分离胶。
15.将电流增加到15 mA,直到染料进入分离胶底部时终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理。
北京现货一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装打折促销极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·RNA电泳液,10×
编号:BTN3150
英文名称:10×RNAep Buffer
规格:250mL
本品是预配的10×RNA专用电泳液,专门用于RNA甲醛变性胶电泳分析,产品成分为10×MOPS溶液。其特点是即开即用,用户不需要自己进行RNase灭活、高压灭菌、pH调节等操作。与Northern杂交等后续反应兼容。
储存条件:常温运输及保存、有效期一年。
·KOD DNA聚合酶
编号:BTN101002
英文名称:KOD DNA Polymerase
规格:250U
KOD DNA Polymerase是从克隆有Thermococcus Kodakaraensis DNA聚合酶基因的质粒在大肠杆菌中经诱导表达分离纯化而来。该酶所具有的3´→ 5´外切酶活性使得其扩增保真性比Pfu DNA Polymerase更高,保真性是Taq的约50倍,同时具有合成速度快的特点,聚合速度约为普通Pfu DNA Polymerase的5倍,Taq DNA Polymerase的2倍,达到100-138bp/秒,可以在短时间内获得高产量的扩增产物,特别适合于高保真地扩增6 kb以内的PCR产物,扩增所得的DNA为平末端,可用于基因克隆、表达及突变分析等分子生物学实验。
产品组成: 成分 | 规格 |
KOD DNA聚合酶(5U/μL) | 5μl |
10×KOD DNA聚合酶缓冲液 | 1ml |
dNTP mix(10mM Each) | 0.1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存、有效期一年。
活性定义:1U指75℃条件下,30分钟内使10nmoles的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
使用方法:一、建议PCR条件(以50μl反应体系为例)
成分 | 体积 | 终浓度 |
模板 | - | <0.5μg |
正向引物(10μM) | 1μl | 0.2μM |
反向引物(10μM) | 1μl | 0.2μM |
10×KOD DNA聚合酶缓冲液 | 5μL | 1× |
dNTPs(10mM each) | 1μL | 0.2mM |
KOD DNA聚合酶 | 0.25-0.5μL(1.25-2.5U) | - |
超纯水 | 补足到50μL | - |
注:实际操作中计算好需补加水的量后,建议先加水,然后按上述顺序添加其它成分,添加KOD DNA聚合酶。Z好在冰浴上混合PCR各种成分,防止KOD DNA聚合酶降解引物和模板。待各成分充分混匀后,离心数秒,使反应混合物沉到管底。然后将反应管置于PCR仪中进行扩增。
二、关于
PCR条件的优化
1.质粒或者噬菌体模板(模板量5-20ng,循环参数如下表)
循环参数 | 目标DNA<1kb | 目标DNA<2kb | 目标DNA3-4kb | 目标DNA5-6kb |
Step 1 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 | 94℃ 2分钟 |
Step 2 | 94℃ 20秒 | 94℃ 20秒 | 94℃ 20秒 | 94℃ 30秒 |
Step 3 | Ta 20秒 | Ta 20秒 | Ta 20秒 | Ta 30秒 |
Step 4 | 72℃ 20秒 | 72℃ 30秒 | 72℃ 40秒 | 72℃ 60秒 |
Step 5 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 | 72℃ 5分钟 |
Repeat step 2-4 for 30-35个循环 |
Ta=Tm-5℃ |
2.基因组DNA和cDNA模板(基因组DNA模板量为50-100 ng,1-2μl cDNA(起始转录用的RNA为500 ng),循环参数如下表)
循环参数 | 目标DNA<2kb |
Step 1 | 94℃ 2分钟 |
Step 2 | 94℃ 20-30秒 |
Step 3 | Ta 15-20秒 |
Step 4 | 72℃ 20-60秒 |
Step 5 | 72℃ 5分钟 |
Repeat step 2-4 for 30-35个循环 |
Ta= Tm - 5℃ |
北京现货一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装打折促销关键词:One-Stop SDS-PAGE Pack,一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装,BTN80810
阿特拉津 Ceftriaxone sodiu*(代"m") 1912-24-9
*化*溶液(1mol/L) 500ml
87-89-8 Inositol 肌醇
ARB13670 兔主要组织相容性复合体I类(MHCI/RLAI)含量测试 Rabbit major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/rlai ELISA KIT
HEPES溶液(pH7.5) 1mol/L 100ml
ARB10833 人抗卵巢抗体(AOAb)酶联免疫定量检测 Human anti-ovary antibody,aoab ELISA KIT
漆酶 Potassium hydrogen phthalate 80498-15-3
*酚红*盐 D-Norvaline 34487-61-1
7415-69-2 5′-二磷酸鸟苷二* Guanosine5-Diphosphate (GDP)
PY01-186 脑心浸粉(牛) 250克
ARB14085 犬血管活性肽(VIP)elisa测定使用说明书
10191-18-1 N,N-双(2-)-2-*基乙磺酸 BES
革兰阴性菌裂解缓冲液 100ml
ARB10243 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)elisa检测说明书 Human hepatitis b virus x ag,hbxag ELISA KIT
北京现货一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装打折促销关键词:One-Stop SDS-PAGE Pack,一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装,BTN80810
ARB10671 人血管紧张素Ⅱ受体IA型(AgtrIA)酶联免疫定量检测 Human angiotensin Ⅱ receptor type ia,agtria ELISA KIT
ARB11837 人凝血因子Ⅲ(FⅢ)免费代测 Human coagulation factor Ⅲ,fⅢ ELISA KIT
I型核酸染色剂 β-Naphthol Violet
pGM-Simple-T Fast克隆试剂盒
ARB10556 人对氧磷酶(PON)elisa测定使用说明书 Human paraoxonase,pon ELISA KIT
PY02-331 FraserⅡ增菌液基础 250克
伊文思蓝染色液(0.5%) 100ml
(不需DNA酶消化)"
D-甘露糖胺盐*(代"酸")盐 Histones,dried(Calf thymus) 5505-63-5
BTN100821 干粉型2×YT培养基 2×YT Medium Powder
ARB12862 小鼠心*肽(ANP)定量分析 Mouse atrial natriuretic Peptide,anp ELISA KIT
罗红霉素 Potassium benzoate 80214-83-1
BTN100920 生物素标记dUTP溶液 Biotin-11-dUTP Solution
CYB167080 兔抗小鼠IgG
肝素* Sulfamethoxypyridazine 9045-22-1
BTN130810 荧光尺 Fluorescent Ruler
ARB10374 人甘露聚糖结合凝集素相关丝*酸蛋白酶(MASP)elisa检测说明书 Human mannan binding lectin associated serine protease,masp ELISA KIT
PY01-168 孔雀石绿 ind 25克
Ringer"s液(哺乳动物专用) 500ml
BTN110801 核酸浓缩剂 Nucleic Acid Concentration Solution
ARB12975 小鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA检测服务 Mouse dopamine d1 receptor,d1r ELISA KIT
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温馨提示:不可用于临床ZL。