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名称:BTN131032型人基因组DNA(女性)特价促销
品Pai:百奥莱博
编号:BTN131032
产地:国产|进口
英文名:Human Genomic DNA(Female)
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
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ARB11694 人硫氧还蛋白还原酶(TrxR)Elisa方法检测 Human thioredoxin reductase,trxr ELISA KIT
PY02-311 CVT琼脂 250克
CYB163061 兔抗羊IgG-FITC
BTN130817 ROX参考染料,高浓度型 ROX Reference Dye
A5512-32 鸡血清 100ml|500ml
尼罗红 Pectin 7385-67-3
BL0966 封闭用鸡血清(原液) 10ml
BS固定液 500ml
荧光素* Glycerokinase 518-47-8
ARB10661 人血管紧张素Ⅰ(ANGⅠ)elisa检测
α-岩藻糖苷酶(AFU)检测试剂盒(PNP-F终点比色法) 100T
BTN120688 Actidione Solution
BL1101 丙*(代"烯")酰胺溶液(定制)
癸二酸二甲酯 3-Hydroxybenzaldehyde 106-79-6
PY08-084 品红亚硫*(代"酸")*琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于饮用水、水源中大肠菌群的选择性分离培养
DL-乳酸 FMOC-OSU 50-21-5
F030305 胶体金标记兔抗牛血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-BSA*GOLD
298-96-4 TTC 2,3,5*化三*基四氮唑
BTN131032型人基因组DNA(女性)特价促销关键词:人基因组DNA(女性),BTN131032,Human Genomic DNA(Female)
·甲基化专一性PCR试剂盒
编号:BTN100923
英文名称:Methylation Specific PCR Kit
规格:50次
本产品是基于PCR的甲基化DNA检测试剂盒(即MSP试剂盒)。它由两个成分组成,一个是亚硫*(代"酸")*盐试剂盒,用于将DNA中所有没有甲基化的C转化成U,而甲基化的C不变。二是优化的PCR试剂盒,利用客户自备的专一性引物,根据PCR来检测甲基化位点的位置。
产品特点:
1.本产品是亚硫*(代"酸")盐修饰试剂盒和即用型PCR 3.0的整合,即开即用,非常方便。
2.柱式DNA回收方法极大提高亚硫*(代"酸")盐修饰后DNA的回收率。
3.优化的PCR mix,含有PCR所需要的所有成分,减少了操作误差。
4.PCR结束后可以直接上样电泳,非常方便。
5.用户需要自备MSP专一性引物。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A | 5ml |
溶液B成分一(干粉) | 2.3g×5瓶 |
溶液B成分二(干粉) | 110mg×5瓶 |
通用溶胶液 | 50mL×2 |
离心吸附柱 | 50套×2 |
通用洗柱液 | 100mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
PCR MagicMix 3.0 | 1.5mL |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(PCR MagicMix 3.0要低温运输,-20℃保存),有效期一年。
自备试剂:超纯水、MSP引物、对照DNA模板和引物。
注:严格的实验一般要求下列5种对照DNA模板和相应的引物对,用户可以根据自身实验的要求只做其中的部分。
对照名称 | 起始DNA | 处理 |
未修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA (无甲基化宿主菌或体外扩增而得) | 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
已修饰未甲基化DNA对照 | 未甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
未修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA (用甲基化酶修饰未甲基化DNA而得) | 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
已修饰甲基化DNA对照 | 甲基化DNA(同上) | 经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
未修饰样品DNA对照 | 样品DNA | 未经过亚硫*(代"酸")*盐修饰 |
使用方法:Ⅰ.
亚硫*(代"酸")*盐修饰一、
准备试剂1.配制溶液B成分一溶液:加5.0mL超纯水和27μl溶液A到装有溶液B成分一干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃至溶(尽量少的剧烈摇晃,约需要5分钟),总体积约5.5mL。
2.配制溶液B成分二溶液:加10mL超纯水到装有溶液B成分二干粉的棕色塑料瓶中,轻柔摇晃混匀(尽量少的剧烈摇晃)。
3.配制溶液B工作液:将55μL溶液B成分二溶液加入到溶液B成分一溶液中,轻柔颠倒混匀即可使用。一瓶溶液B工作液可以用10次。
二、
DNA变性处理1.将5μL溶液A加入到45μL DNA溶液中并吹打混匀(总体积没有45μL需要用水补足到45μL,DNA总量在0.2-5μg之间,不能超过 5μg,一般使用2μg DNA即可)。 注意:DNA必须是线状的,长度Z好在20-50 Kb左右。基因组DNA可以预先用酶切处理(酶的位点不得在研究的DNA序列之内),也可以用机械打断法处理(得到的DNA一般在20-50 Kb左右)。
2.37℃放置15分钟使DNA充分变性。
3.立即在DNA溶液中加入500μl溶液B工作液,轻柔颠倒混匀。
4.55℃避光保温8-16小时。如果使用水浴或没有热盖的PCR仪器保温,Z好加50-100μL石蜡油,避免水分蒸发。
注意:必须避光保温。55℃处理8小时足以使95%的C变成U,保温时间过长会引起DNA的断裂。如果有的区域的C难以转化成U,可以改用两步式PCR处理(每55℃保温3小时后95℃变性处理5分钟,共5-10个循环),效果会更佳。
5.冰浴10分钟。
6.加入1mL的通用溶胶液,颠倒混匀后取一半溶液上柱。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
7.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8.取另一半溶液再上柱,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,亚硫*(代"酸")*盐等将穿透过柱。
9.加入0.7mL通用洗柱液,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以洗涤残留的亚硫*(代"酸")*盐。
10.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl新鲜配制的溶液A稀释液(5μl的溶液A原液与45μl的超纯水混合而得),室温放置2分钟后离心半分钟。
11.将洗脱下来的DNA溶液放置在37℃保温15分钟。
12.加入0.7mL的通用溶胶液,混匀后上柱。
13.12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。单链DNA会结合在离心吸附柱上,杂质等将穿透过柱。
14.干甩半分钟后,将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入50μl DNA洗脱液,室温放置2分钟后离心半分钟。
15.所得溶液即为亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA,可以用于下面的甲基化专一PCR。
说明:此方法的回收率一般为50%,2μg DNA可以得到1μg的修饰后的DNA。由于修饰后的DNA呈长短不一的单链,EB染色效果很差,所以不能用灵敏度低的琼脂糖电泳-EB染色的方法检测,但可以用灵敏度更高的PAGE-银染方法检测。
Ⅱ.
甲基化专一性PCR(以60μL的标准PCR反应体系为例)
1.在一干净的PCR管中,加入下列成分(冰上操作):
成分 | 样品管 | 对照管 |
PCR MagicMix 3.0 | 30μl | 30μl |
亚硫*(代"酸")*盐修饰的DNA模板 | 100-500ng | 无 |
对照DNA模板 | 无 | 100-500ng |
自备MSP引物F | 25pmol | 无 |
自备MSP引物R | 25pmol | 无 |
对照模板专一性PCR引物F | 无 | 25pmol |
对照模板专一性PCR引物R | 无 | 25pmol |
补水到 | 60μl | 60μl |
注:有5种对照DNA模板可以供用户根据自身需要选择,详见自备试剂栏。
2.将混合物混匀,放入PCR仪中进行热启动PCR,结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。
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D-Hanks平衡盐溶液(无酚红) 1×|5× 500ml
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L-谷*酸单*盐 1,3-Dihydroxyacetone dimmer 6106-04-3
乳糖酸 TPCK 96-82-2
75881-23-1 阿利新蓝8GX Alcian Blue8GX
乳糖醇 L(+)-Rhamnose monohydrate 585-86-4
ARB11601 人偏肺病毒IGM(HMPV)血清中含量检测
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ARB12793 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)elisa检测 Mouse beta-endorphin receptor,β-epr ELISA KIT
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温馨提示:不可用于临床ZL。