北京Klenow片段(3´→5´exo-)现货价格

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名称：Klenow片段(3´→5´exo-)
品Pai：百奥莱博
编号：BTN131235
产地：国产|进口
英文名：Klenow Fragment(3´→ 5´exo-)
规格：200U
Klenow片段是大肠杆菌DNA聚合酶I的蛋白水解产物。它保留了DNA聚合酶活性，具有3´→5´外切酶活性，但不具有5´→3´外切核酸酶活性。可以在DNA模板和引物存在的条件下，选择性地催化底物dNTP沿5´→3´方向合成与模板互补的DNA。本产品是重组表达得到。

产品用途：
1．双链DNA 5´突出末端的平滑化。
2．用随机引物制备探针。
3．随机引物标记法。
4．寡核苷酸定向诱变中双链DNA的合成。
5．双脱氧法DNA序列测定(Sanger法)。

产品组成：

 

成分	规格
Klenow片段(5U/μL)	20μl
10×Klenow Fragment Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以合成的Poly d(A-T)DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10nmol的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

使用举例：(随机引物的同位素标记反应)
1．在微量离心管中配制下列反应液

成份	用量
模板DNA	25ng
随机引物(6-9mer)(1nmol/μl)	2μL
补超纯水到	14μL

2．95℃保温3分钟。然后冰中急冷5分钟。
3．加入2.5μl 10×Klenow Fragment Buffer。
4．加入2.5μl dNTP(0.2mM dATP,dGTP,dTTP)。
5．加入5μl 111TBq/mmol[α-³²P].dCTP(3000 Ci/mmol)(1.85 MBq，50μCi)
6．加入1μl本产品，反应液共25μl。
7．37℃反应3小时。
8．65℃加热5分钟。
 反应液可直接作为探针使用。如有必要，可以通过用我司柱式探针纯化试剂盒除去未反应的标记的dCTP。

注意事项：
1．本酶有高度稳定性，稀释时不失活，但剧烈搅拌会失活。
2．由于不含有 5´→3´的外切核酸酶活性，因此没有切口平移活性。
3．可用于双链DNA末端以及缺口的修复。
4．与T4 DNA Polymerase相比，对模板高级结构的抵抗性能较好。
5．由于对DNA的亲和性较强，过量使用易发生凝集作用从而YZ反应进行。
6．若用于5´突出末端的修饰时，补平后有时会多加一个碱基。
7．与DNA Polymerase I相同，ddNTPs的掺入不受底物YZ。
关键词：3´→5´exo-,Klenow片段,Klenow片段(3´→5´exo-),Klenow Fragment(3´→ 5´exo-),BTN131235


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编号	名称
BTN3660	非冻型组织DNA保存液
BTN120501	柱式动物线粒体DNA提取试剂盒(测序级)
BTN90604A	PCR法DNA探针标记试剂盒
BTN81212C	一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)
BTN130815	taq酶抗体
BTN81101	柱式昆虫DNA提取试剂盒
BTN80103	柱式细菌RNA提取试剂盒
BTN90602B	DNA marker(pBR322/MspI)
BTN130970	柱式革兰氏阳性菌RNA提取试剂盒
BTN100821	2×YT培养基(干粉型)
BTN131036	5´末端同位素标记试剂盒
BTN130896	YPG液体培养基
BTN81208	印迹膜抗体稀释液
BTN100920	生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
BTN130905	超级杂交液(芯片)
BTN130979	柱式血清血浆DNA提取试剂盒
BTN120408	绿豆核酸酶
BTN111201	痰液DNA提取试剂盒
BTN80201	一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒
BTN130931	Southern级血液DNA提取试剂盒
BTN140576	大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞
BTN100908B	一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)
BTN140384	农杆菌GV3101化学感受态细胞
BTN131165	核酸液相杂交液
BTN130881	一站式乙酸-尿素PAGE电泳套装
BTN71101	一步法大提质粒DNA提取试剂盒
BTN90507	大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞
BTN130957	免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
BTN101204	1M Tris-HCl(pH7.0)(DNA级)
BTN120601	革兰氏阳性菌质粒DNA提取试剂盒
BTN131071	牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)
BTN3160	RNase A溶液(10mg/mL)
BTN60309	RNase A溶液(2mg/mL)
BTN120676	Southern封堵液(NC专用)
BTN130972	miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)
BTN80401	柱式Oligo回收试剂盒
BTN100921	地高*(代"辛")标记dUTP溶液(Digoxin-11-dUTP)
BTN120720	柱式冻存血液DNA提取试剂盒