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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")磷酸化p53(Ser15)抗体厂家,我公司供应的抗体抗原品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:磷酸化p53(Ser15)抗体厂家
英文名:anti-Phospho-p53(Ser15) antibody
规格:>20次
产地:国产|进口
编号:YT835
品Pai:百奥莱博
本抗体是用人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽经过适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Phospho-p53(Ser15)抗体识别Ser15被磷酸化的p53,可以检测内源性的Phospho-p53(Ser15),不识别其它位点被磷酸化的p53。
p53是一种肿瘤YZ蛋白,在细胞对DNA损伤或基因组异常响应过程中起关键作用。p53激活可以导致细胞周期阻滞(cell cycle arrest),DNA修复或细胞凋亡。MDM2是p53的E3 ligase,可以导致p53的泛素化修饰并被蛋白酶体降解。p53可以被多种蛋白激酶在多个位点磷酸化修饰。DNA损伤诱导的p53 Ser15和Ser20磷酸化可以减弱p53和其负调控因子MDM2的结合。p53可以被ATM,ATR和DNA-PK等在Ser15和Ser37位磷酸化,从而YZp53的泛素化降解,促进p53的激活和积累。Chk1和Chk2可以磷酸化p53的Ser20,促进p53的四聚化,增强其稳定性和活性。p53的Ser46磷酸化和其诱导细胞凋亡密切相关。p53的Ser392可以被CAK磷酸化,该位点磷酸化和p53的YZ生长功能及其DNA结合和转录激活有关。p53可以被p300和CBP乙酰化修饰,可以被Sirt1去乙酰化修饰。p53的乙酰化修饰可以促进其在应激反应中的累积和激活。
产品组份:
Phospho-p53(Ser15)抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽
宿主:兔
用途:WB,IP
交叉反应性:人,小鼠,大鼠,猴
p53分子量:~53kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:200)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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·HBSS
编号:YT902
英文名称:Hanks" Balanced Salt Solution
规格:500ml
本品含137.93mM NaCl, 5.33mM KCl, 4.17mM NaHCO3,0.441mM KH2PO4, 0.338mM Na2HPO4, 5.56mM D-Glucose。本溶液经过过滤CJ,可以直接用于细胞培养过程中细胞的洗涤等常规用途。使用前不必再进行稀释或过滤CJ等任何处理。
注意事项:
1. 在使用Hanks" Balanced Salt Solution的过程中要特别注意避免溶液被微生物污染。
2. 本Hanks" Balanced Salt Solution溶液不含Ca2+与Mg2+,如需使用含有Ca2+与Mg2+的Hanks" Balanced SaltSolution 溶液,请订购YT903
储存条件:-20℃,有效期12个月。
·YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)
编号:YT373
英文名称:YT Taq DNA Polymerase
规格:200U|1000U
YT Taq DNA Polymerase简称YT Taq酶,是一种兼顾了高保真性和高扩增效率的DNA聚合酶,是我司优先推荐的基因PCR克隆用酶。
YT Taq 酶可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合。同时YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性(proofreading activity)。另外,YT Taq 酶有5’至3’外切酶活性,但YT Taq 酶没有反转录酶活性。
由于YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,因此在PCR扩增过程中出错的几率大大降低,出错率为1.6×10-6,略低于Pfu酶的2.6×10e-6
。
YT Taq 酶的DNA扩增效率大大高于Pfu酶,和Taq酶的扩增效率比较接近。因此YT Taq 酶很好地兼顾了扩增效率和扩增的准确性。
用途:高保真PCR (high fidelity PCR)、点突变、T载体克隆等各种常规PCR反应。
1)用YT Taq 酶扩增产生的PCR产物带有3’-dA overhangs,可以用于基于T载体的PCR片断克隆。
2)YT Taq 酶可以扩增长度达5kb的DNA片断,Z长可以扩增长达10kb的DNA片断。通常适合扩增3kb以下的DNA片断。
活性定义:One unit of the enzyme catalyzes the incorporation of 10 nmol of deoxyribonucleotides into a
polynucleotide fraction (adsorbed on DE-81) in 30 min at 72℃. Enzyme activity is assayed in the following mixture: 20 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 2 mM MgSO4, 10 mM (NH4)2SO4, 10 mM KCl, 0.1% (v/v) Triton X-100, 0.1 mg/ml BSA, 0.75 mM activated calf thymus DNA, 0.2 mM of each dNTP, 0.4 MBq/ml [3H]-dTTP.
纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶,不含RNA酶,满足常规PCR反应要求。
酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 100 mM KCl, 0.1% (v/v) Nonidet P40, 0.1% (v/v) Tween 20 and 50% (v/v) glycerol。
10×YT Taq Buffer (with Mg2+):200 mM Tris-HCl (pH 8.8 at 25℃), 100 mM (NH4)2SO4, 100 mM KCl, 20mM MgSO4, 1% (v/v) Triton X-100, 1 mg/ml BSA。
失活或YZ:酚*仿抽提可以使YT Taq 酶失活。
储存条件:-20℃
注意事项:
1)由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍,在使用YT Taq 酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。
2)YT Taq 酶有3’至5’的外切酶活性,在没有dNTP的情况下可以降解引物。因此YT Taq 酶一定要加入,并且要在冰浴上操作。
磷酸化p53(Ser15)抗体厂家关键词:磷酸化p53(Ser15)抗体,YT835,人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽抗体,兔抗人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽
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·NF-E1凝胶迁移突变探针(10μM)
编号:YT267
英文名称:YY1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格:30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的YY1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-YY1的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。YY1也称NF-E1或NF-δ。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时,可以进行约30个冷竞争反应。
YY1 consensus oligo的序列如下:
5"-CGC TCC CCG GCC ATC TTG GCG GCT GGT-3"
3"-GCG AGG GGC CGG TAG AAC CGC CGA CCA-5"
EMSA突变探针-YY1中YY1的公认的结合位点发生了突变,从而使YY1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和YY1的结合的条带会被YZ;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和YY1的结合的条带不会被YZ。参考下图。

一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
磷酸化p53(Ser15)抗体厂家关键词:磷酸化p53(Ser15)抗体,YT835,人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽抗体,兔抗人工合成的含磷酸化Ser15的一段人p53多肽
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·cDNA链合成试剂盒II(RNase H-)
编号:YT397
英文名称:First Strand cDNA Synthesis Kit II (RNase H minus)
规格:20次|100次
本试剂盒是一种采用了经过改造和优化的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394),用于以总RNA、mRNA等为模板反转录合成cDNA链的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA链合成所需的各种试剂。
使用本试剂盒合成的链,可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、 cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。
使用本试剂盒可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1),反转录的长度可以超过10 kb。在采用M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)的情况下,由于缺失了RNase H酶活性,RNA和DNA双链复合物中的RNA不会被降解,这样反转录出来的cDNA的长度就会更长,并且产量更高。

使用本试剂盒对总RNA反转录后,对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常GX地被反转录。
本试剂盒中的M-MLV反转录酶II(RNase H-)(YT394)热稳定性高,Z适反应温度为42-45℃,但当温度达到50℃时仍具有很高活性,且可获得较高产量的cDNA。
试剂盒中提供了RNase Inhibitor,确保在反转录过程中的RNA不会被RNA酶所降解并取得较好的反转录效果。
试剂盒还提供了Oligo(dT)18和random hexamer这两种引物,前者适合用于带有Poly(A)尾的mRNA的反转录,后者进行反转录时不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特异性引物进行cDNA链的合成。
本试剂盒用于体积为20微升的cDNA链合成反应时足够进行20个cDNA链样品的合成。
产品组份:
M-MLV反转录酶II(RNase H-)——————————20μl
Reaction Buffer (5X)————————————0.1ml
RNase Inhibitor (20U/μl)——————————20μl
dNTP Mix (10 mM each)————————————40μl
Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl)——————20μl
Random Hexamer Primer (0.2μg/μl)——————20μl
DEPC-treated Water——————————————0.3ml
储存条件:-20℃。
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