猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR试剂盒技术概论:
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断;可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情,用PCR几小时便可完成。PCR技术是生物医学领域中的一项革命性创举和里程碑。
参数规格:
产品名称:
猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR试剂盒
英文名称:Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Europe Strain (PRRSV Europe)RTPCR
产品编号:CP913281
产品类别:PCR检测试剂盒
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒产品。
猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR试剂盒【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
u 存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(Z多冻融3次);
u 运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒,也可选择其他合适的核酸提取产品。
【使用方法】:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
PCR反应体系与反应条件
标准的PCR反应体系:
10×扩增缓冲液 10ul
4种dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加双或三蒸水至 100ul
PCR反应五要素: 参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGCZ好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3’端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3’端的碱基,特别是Z末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点,被扩增的靶序列Z好有适宜的酶切位点,这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T Boldenone 846-48-0 中文名:宝丹酮 分子式:C19H26O2
小鼠基质细胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Docetaxel 中文名:多西他赛 分子式:C43H53NO14
小鼠基质细胞衍生因子-1(mouse SDF-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Docetaxel 中文名:多西他赛 分子式:C43H53NO14 度:98.0%
小鼠基质裂解素(ST2)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Docosanoic acid 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2
小鼠基质金属蛋白酶YZ因子4(TIMP-4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 度:% 关键词:
Boldenone undecylenate 13103-34-9 中文名:宝丹酮十一烯酸酯 分子式:C30H44O3 度:98.0% 关键词: 小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Boldenone acetate 2363-59-9 中文名:宝丹酮醋酸酯 分子式:C21H28O3 度:98.0% 关键词: 小鼠腺来源的内皮生长因子(EG-VEGF)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Boldenone 846-48-0 中文名:宝丹酮 分子式:C19H26O2 度:98.0% 关键词: 小鼠内(ET)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Boc-3-Phenylisoserine 145514-62-1 中文名: 分子式:C14H19NO5 度:98.0% 关键词: 小鼠内皮细胞合酶(mouse eNOS) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
Bisphenol P 2167-51-3 中文名:双酚P 分子式:C24H26O2 度:98.0% 关键词: 小鼠雌二醇(mouse E2) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
二咖啡酰菊苣酸 HPLC≥98% 20mg CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒标准曲线定量PCR扩增检测试剂盒2
二羟丙茶碱E HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
二氢草莓酸 HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白共沉淀分析试剂盒5
猪生殖与呼吸综合症病毒欧洲株PCR试剂盒二氢丹参酮I HPLC≥98% 20mg COLLAGENI蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
二氢胆 HPLC≥98% 200mg COLLAGENI蛋白共沉淀分析试剂盒5
二氢胆 HPLC≥98% 20mg Cr.NeoformansRFLP基因分析试剂盒20
二氢黄连碱 HPLC≥98% 20mg CRASP基因甲基化程度定量分析试剂盒20
二氢姜黄素 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
二氢辣椒碱 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白共沉淀分析试剂盒5
二氢辣椒素酯 HPLC≥98% 10mg CTLA-4/CD152人细胞毒性T细胞相关抗原4规格:48T/96T