特别提示:包括柱式质粒DNA中量抽提试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:柱式质粒DNA中量抽提试剂盒
英文名称: Column Plasmid Mid-Preps Kit
产品货号:GS0035
产品规格:10次|20次
储存条件:常温(18-25℃)
概述
本试剂盒提取原理与SgPrep柱式质粒DNA小量抽提试剂盒相同。不同的是本试剂盒使用UNIQ-200吸附柱,吸附能力更强,可一次获得200μg质粒。
特点
- 1.操作过程快速、方便。整个抽提过程可以在40分钟左右完成。
- 2.无需使用酚抽提,无需乙醇沉淀,抽提得到的质粒纯度高。
- 3.新型裂解染料VisualLyse让裂解过程可视化,实现质粒得率化。
- 4.UNIQ-200吸附柱有效容积为17ml,从100~500 ml过夜培养菌液中提取多达200 μg高纯质粒。
应用
质粒中量抽提
使用说明
请按说明书的标准程序进行实验操作。
组份
纯化套件(吸附柱+收集管);Buffer P1;Buffer P2;Buffer P3;Buffer DW1;Wash Solution(Concentrate);Elution Buffer;RNase A;VisualLyse;说明书。
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名称:红细胞裂解液A型(核酸纯化)
货号:BTN60403
规格:250mL
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能YZPCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.快速,一次处理只需要2-3分钟。处理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白质。
2.GX,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,一般样品Z多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4. 兼容性好,可以与市场上大多数血液DNA提取试剂盒结合使用。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在装有抗凝血液的离心管中,按1:1的比例加入红细胞裂解液A型并轻柔颠倒混匀。
2. 5000-10000 g室温离心2分钟,小心吸弃弃上清。
3. 将细胞沉淀重悬于1/2 体积的红细胞裂解液A型中,轻柔吹打混匀后5000-10000g室温离心2分钟。
4.沉淀即为去除了红细胞的血液细胞,可以直接用于后续的实验。
名称:柱式动物DNA提取试剂盒
货号:BTN71206
规格:50次
本试剂盒是在我司动物DNA提取试剂盒的基础上改良而得的柱式升级产品,主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。
产品特点:
1. DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2. DNA产率一般在200μg/g左右(跟组织种类密切相关)。
3.可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
试剂盒组成:
成分 |
规格 |
溶液A |
40ml |
溶液B |
20ml |
溶液C |
50ml |
离心吸附柱 |
50套 |
通用洗柱液 |
50ml |
DNA洗脱液2.0 |
10ml |
说明书 |
1份 |
储存条件:常温运输和保存、有效期一年。
使用方法:
注意:溶液A容易产生沉淀,溶液B十分粘稠,用前均需要在65℃水浴中加热使沉淀溶解或粘稠度降低,用前充分摇匀。
1. 根据使用材料的不同进行下列操作:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入0.8mL预热的溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。如果是fibroblasts或carcinoma细胞,0.8mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加0.8mL预热的溶液A,用剪切式匀浆器匀浆30秒左右,然后把裂解液转移到1.5mL塑料离心管中。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg。
d)对DNAhold保存组织:先用纸吸去DNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
2. 加入0.4mL预热的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠,可将1mL枪头剪掉一截再用,也可以用称量方法加0.4 g。加入溶液B后需要颠倒数次充分混匀。
3. 65℃水浴5-10分钟。如果室温放置,DNA产量将降低10-20%。
4. 加入0.2mL自备lǜ仿,振荡器上充分振荡混均30秒,此时溶液将呈乳白色。一定要确保离心管底的液体被震荡起来。
5. 12000~15000g室温离心2分钟。上清透明,中间层为白膜(蛋白层)。
6.小心将上清液平均转移到两个新的离心管中,避免触及中间的白膜。
7. 每个管中加入1.5倍体积的溶液C,充分颠倒混匀。
8. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液)。
9. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000~15000g室温离心半分钟,弃穿透液。
11. 12000~15000g室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
12.室温放置半分钟使残留乙醇挥发。
13. 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中,加入50-100μL DNA洗脱液2.0,室温放置离心吸附柱1-2分钟。
14. 12000~15000g室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
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