特别提示:包括普鲁士蓝-核固红染色试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床YL及其他非科研用途!
产品名称:普鲁士蓝-核固红染色试剂盒
英文名称:Prussian Blue - Nuclear Fast Red Staining Kit
产品货号:GS0292
产品规格:100次|500次
分子量:普鲁士蓝-核固红染色试剂盒
储存条件:常温(18-25℃)避光
概述
含铁血黄素(hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内或间质内,主要显示三价铁盐。Perls普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。普鲁士蓝-核固红染色试剂盒其复染液采用核固红染色液,是Z经典、Z常用的复染液。
特点
- 该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广,可以进行复染。
应用
普鲁士蓝-核固红染色试剂盒常用于显示局部组织内的各种出血性病变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用Perls反应可以得到证实,该染色法可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。
组份
试剂A 10%亚铁;试剂B 20%盐酸;试剂C 0.1%核固红
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名称:苏木素染色液
货号:YT911
规格:100ml
本染色液综合了多种经典的苏木素染色方法,例如Harris法、Mayer法等,简化了操作步骤,缩短了操作时间,并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。本苏木素染色液染色后细胞核呈蓝色。本染色液可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。一方面可以在本苏木素染色液染色后进行免疫荧光染色或其它染料的染色,另一方面也可以在免疫组化染色后再进行苏木素复染。本染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。
注意事项:
1. 需自备4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
2. 染色液可以重复使用多次,认为效果不佳时再更换新的染色液。
3. 次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:室温,有效期一年。
名称:碱性磷酸酶染液(偶氮偶联法,适用于细胞样本)
货号:SNM374
规格:可染20-30张片
细胞中碱性磷酸酶(cAKP)在碱性的缓冲液中,催化底物水解,生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联,生成不溶性的偶氮染料,沉着于有cAKP 活性的部位。适用于血涂片、涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片脱蜡梯度入水后。
SNM374可染 20~30 张涂片,组分如下:
试剂一:固定液 10ml×1 瓶。
试剂二:底物液
① 甲液,溶剂5ml×2 瓶;
② 乙粉,粉剂×2 支;
③ 丙粉,粉剂×2 支。
试剂三:复染液
① 苏木素染液,5ml×1 瓶;
② 甲基绿染液,5ml×1 瓶。
附赠疏水膜 1 张。
本试剂盒应置室温密封保存,有效期6个月。
试剂配制:
底物应用液的配制:临用时将1 支乙粉剂倒入1 支甲溶剂中,用微量移液器取少许液体打入小离心管中,反复颠倒离心管,再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中,如此反复2~3 次,使二者充分混合,完全溶解后才可加入1 支丙粉剂,再充分摇动使其完全溶解,配成底物应用液待用。底物应用液要新鲜配制,用多少配多少。
操作步骤:
① 固定:新鲜血涂片、涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片用固定液固定3 min 左右。(石蜡切片脱蜡梯度入水后不需固定)
② 加底物应用液:固定后的样本,滴加新鲜配制的底物应用液盖满样本部分,加盖疏水膜,放置湿盒中,避光37℃孵育15min,水洗。(此时覆盖在样本上的疏水膜会遇水掉下)
③ 复染:趁湿用复染液(苏木素或者甲基绿,两者取其一)染3min 左右。水洗,镜检。
染色结果:
血涂片及涂片的观察:选涂片中厚薄均匀的部位滴加香柏油用油镜检查,灯光适中。细胞核呈紫色,cAKP 阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒,有些为棕褐色或咖啡色颗粒,其强度可按Kaplow 记分法表示。
0 胞浆内无红色或无咖啡色;
1 弥散的红色并偶见红色或咖啡色颗粒;
2 弥散的红色,有中等量的红棕色颗粒;
3 显著的红色,有较多的红棕色或咖啡色颗粒;
4 显著的红色并有粗大的红棕色或咖啡色、深咖啡色颗粒充满胞浆。
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