包涵体洗涤液

特别提示：包括包涵体洗涤液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床YL及其他非科研用途！

产品名称：包涵体洗涤液
英文名称：Inclusion body Purgation buffer
产品货号：GS1429
产品规格：10次

储存条件：冷冻（-20℃）

概述

细菌在进行重组表达的过程中，决大多数所表达的蛋白质以无定形，非水溶性的包涵体的形式存在，然而在包涵体中，真正的目的蛋白只占50%左右，此外还含有脂类、脂多糖、核酸和杂蛋白等其它成分，同时脂体及部分破碎的细胞膜及膜蛋白又与包涵体粘连在一起，而这些成分会影响包涵体蛋白的复性。故变性前应洗涤包涵体，以去除杂质含有RNA、DNA、脂多糖、脂蛋白等杂质，使得所得到的包涵体更加纯净，以方便于包涵体的溶解和复性等操作过程。本试剂采用还原剂、盐和蛋白变性剂，使包涵体溶解，从而释放蛋白质；内含作用强烈的蛋白酶YZ剂，从而保证了蛋白的完整性。适用于重组细菌中不溶性重组蛋白质-包涵体的变性提取，提取的蛋白质可以用于SDS-PAGE或者在低温下的透析或稀释，以便尝试复性。

应用

该试剂盒可用于包涵体的溶解和复性等操作过程。

组份

溶液A，溶液B，固体C



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货号	名称	规格
BTN90510	包涵体大量纯化试剂盒	2次
BTN100828	高pH缓冲液套装	30次
YT055	考马斯亮蓝快速染色液	250ml
WE0275	Bradford蛋白定量试剂盒	800次微孔板(100管次)
KFS009	免疫染色封闭液	100ml
KFS022	collagen I免疫组化试剂盒(IHC)	50T
KFS043	kFluor647标记抗兔免疫荧光染色试剂盒	300T

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名称：蛋白浓度测定试剂盒(增强型BCA法)
货号：YT036
规格：5000次|500次|200次
本试剂盒是根据目前世界上Z常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。

和百奥莱博的普通BCA蛋白浓度测定试剂盒(YT037)相比，灵敏度更高，检测浓度下限达到10μg/ml，Z小检测蛋白量达到0.2μg，待测样品体积为1-20μl。显色速度更快，相同的样品孵育较短时间即可进行吸光度测定。
,在20-1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1mM，β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。不适用BCA法时建议SY百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。

试剂盒组份：
BCA试剂 A 500ml×2
BCA试剂 B 30ml
蛋白标准(BSA) 30mg×2
蛋白标准配制液 5ml

注意事项：
1. 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm。需96孔板。如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但测定时，需根据比色皿的Z小检测体积，适当加大BCA工作液的用量使不小于Z小检测体积，样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
2. 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请SY百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。
3. 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。
4. EDTA浓度必须小于10mM，不兼容EGTA。不适用BCA法时，请SY百奥莱博的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034)。

储存条件：室温。

名称：1×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
货号：KFS082
规格：10ml
本产品作为蛋白质电泳Loading Buffer，适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时的蛋白样品制备和上样。蛋白上样缓冲液是一种以溴酚蓝为染料， 1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，用于常规的SDS-PAGE 蛋白电泳样品上样。

操作步骤
1. 针对浓缩的蛋白沉淀样品，可直接用1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液重悬，根据浓缩样本的蛋白质量，加入合适体积的1×SDS-PAGE 凝胶电泳上样缓冲液，得到所需的蛋白浓度即可。（注意：有些蛋白样本可能因为浓缩沉淀导致难以重溶，可以适当考虑增加6M 的尿素助溶）
2. 100℃或沸水浴加热5 分钟，以充分变性蛋白。
3. 置冰上5 分钟，10000rpm 离心1 分钟，取上清直接上样到SDS-PAGE 胶加样孔内即可。