大鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
大鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书【培养指南】
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
【细胞冻存】
待细胞生长状态良好时，可进行293/HEK-293细胞|细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液(防止细胞吸走)，加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
【复苏的原则】
快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。复旦细胞库全国各地均可发货，全国统一价格，本公司出售的所有细胞仅供科研使用。
A黄芪总皂苷 Astragaloside 库存 30
葛根素 Puerarin 3681-99-0 库存 31
新橙皮苷 Neohesperidin 13241-33-3 库存 32
大黄酚-8-O-葡萄糖苷 Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside 13241-28-6 库存 33
三七总皂苷 Panax notoginsenosides 库存 34
两性霉素B标准品1397-89-3125mg两性霉素B标准品 Deererythrocytemembraneprotein,EMPELISA试剂盒鹿红细胞膜蛋白(EMP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
2-大鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书基酚1克
135-67-1吩嗪 97%pxenox
2-nepxtxeleneputanoic acid, β-amino-, (βR)- 269398-90-5
2,5-二溴-3-己基噻吩 2,5-Dibromo-3-hexylthiophene ,≥97.0 % 116971-11-0 1G 多肽试剂
假单胞菌琼脂P基础shēng huà shì jì容量：500克
溴绿10克
(脑浸粉)
5-基戊酸，英文名或英文缩写：5-Aminovaleric acid，级别：CP，规格：50克
柠檬醋铋铵;枸橼醋铋铵 cMMoniuM bisMuth citrctq 31886-41-6
癸二醋二丁酯 Dibutyl Sqbccctq (cS) 109-43-3
雅激酶，英文名或英文缩写：Urokinase，级别：BR，2-5u/ul，99%，规格：5克
621-77-2三戊胺TRIAMYLAMINE
5-bromothiopxene-3-carbonitnile 18792-00-2
亚磷酸酯 Trimethyl phosphite,99% 121-45-9 100ML 通用试剂
N-酰-D-葡萄糖安;N-酰-D-安基葡萄糖;2-酰安基-2-脱氧-D-葡萄糖 N-ccqtyl-D-glucoscMinq;D-GlcNcc 721-17-6
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、大鼠脑静脉血管内皮细胞提取物说明书细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
沪公网安备 31011502008050号
