TMB可溶性底物

TMB可溶性底物 

 TMB Soluble Substrate

一、订购信息：

二、产品描述：

即用型，用于标记物为辣根过氧化物酶的ELISA；单一组分，超稳定，使用方便

TMB底物液的主要成分是3,3’,5,5’ –四甲基联苯胺（3,3’,5,5’ - tetramethylbenzidine (TMB)）, 是辣根过氧化物酶（HRP）的底物，在辣根过氧化物酶的作用下，与氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比，从而可以用于检测基于HRP标记物的检测。  

三、产品用途：

本品适合于标记物为HRP的ELISA实验，本品中含有的TMB和过氧化氢，在HRP的作用下，TMB被氧化形成水溶性蓝色产物，在370nm和650nm有吸收峰。进行动力学实验时，可直接检测650 nm的吸光度。加入终止液，可进行终点法检测。终止液可以选择0.1%NaF，终止后TMB的颜色不变，在650nm检测，也可肉眼观察定性判断。加入酸性终止液后变成黄色，检测波长为450 nm，吸光度值可较不酸化增加数倍。

四、操作方法：

1、在每孔中加入100ul TMB 溶液，室温孵育 5-30分钟，根据反应体系的需要调整反应时间。

2、加100µl终止液（0.1% NaF、0.3M H2SO4或0.25M HCl）

3、终止后5分钟之内检测, 在酶标仪上检测，用0.1% NaF终止时，检测波长为650nm, 加入硫酸或盐酸终止，检测波长450nm

五、注意事项：

1、本产品对各种氧化剂敏感，应在使用过程中避免污染，切忌将枪头直接插入瓶中取液，应倒出所需要液量，剩余溶液不要倒回原包装瓶中以免污染。

2. 操作过程中避免阳光的直射，分装的容器建议用塑料容器，不建议使用玻璃容器，避免使用金属容器以及细菌和氧化还原剂污染的容器。

3.分装时使用称重的方法或蠕动泵。

4.过高浓度的HRP会导致TMB呈现绿色或红色，或终止后出现沉淀，应该减少抗体和标记物的用量或缩短孵育时间。