TMB可溶性底物显色剂

 TMB可溶性底物 (TMB Soluble Substrate)

Cat# 1001  TMB可溶性底物（Soluble TMB Substrate）

Cat# 1001R 红色TMB底物（Red TMB Substrate）

即用型，用于标记物为辣根过氧化物酶的ELISA；单一组分，超稳定，使用方便

灵敏度高。

TMB底物液的主要成分是3,3’,5,5’ –四甲基联苯胺（3,3’,5,5’ - tetramethylbenzidine (TMB)）, 是辣根过氧化物酶（HRP）的底物，在辣根过氧化物酶的作用下，与氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比，从而可以用于检测基于HRP标记物的检测。  

规格

本产品包装规格为500ml

储存及运输

常温运输(勿超过30°C)， 2-8°C储存，在有效期内使用。

注意事项

• 选择：两种TMB有相同的灵敏度，Cat#1001为无色。Cat#1001R为粉红色，更容易区分是否加样。

• 应用: 本品适合于标记物为HRP的ELISA实验，本品中含有的TMB和过氧化氢，在HRP的作用下，TMB被氧化形成水溶性蓝色产物，在370nm和650nm有吸收峰。进行动力学实验时，可直接检测650 nm的吸光度。加入终止液，可进行终点法检测。终止液可以选择0.1%NaF，终止后TMB的颜色不变，在650nm检测，也可肉眼观察定性判断。加入酸性终止液后变成黄色，检测波长为450 nm，吸光度值可较不酸化增加数倍。

• 注意事项: 1. 本产品对各种氧化剂敏感，应在使用过程中避免污染，切忌将枪头直接插入瓶中取液，应倒出所需要液量，剩余溶液不要倒回原包装瓶中以免污染。2. 操作过程中避免阳光的直射，分装的容器建议用塑料容器，避免使用金属容器以及细菌和氧化还原剂污染的容器。3.分装时使用称重的方法或蠕动泵。4.过高浓度的HRP会导致TMB呈现绿色或红色，或终止后出现沉淀，应该减少抗体和标记物的用量或缩短孵育时间。

操作方法

1.      在每孔中加入100 µl  TMB 溶液

2.      室温孵育 5~30分钟，根据反应体系的需要调整反应时间，使终止后检测的吸光度值在合适的范围。

3.      加100µl终止液（0.1% NaF 、0.3M H₂SO₄或0.25M HCl）。

终止后5分钟之内检测, 在酶标仪上检测，用0.1% NaF终止时，检测波长为650nm, 加入硫酸或盐酸终止，检测波长450nm