弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂
Freund's Adjuvant, Complete and Incomplete
弗氏佐剂是在抗体制备中最经典、最广泛应用的佐剂,用于将抗原制备成油包水的乳液。弗氏佐剂由矿物油和乳化剂组成。含有死结核分枝杆菌的称为完全佐剂;不含结核分枝杆菌的为不完全佐剂。
规格
本产品的包装规格为 10ml /瓶,灭菌处理
储存条件
2-8℃冷藏,不要冷冻
注意事项
- 本产品仅用于实验室研究,不能YY或其它用途
- 动物注射操作时避免用针头刺破操作者的皮肤。如不幸将佐剂刺入皮肤,可能导致严重的过敏反应,应及时就医处理
- 弗氏完全佐剂仅在初次免疫时使用,加强免疫时使用弗氏不完全佐剂。重复注射弗氏完全佐剂可能导致动物过敏死亡
- 弗氏完全佐剂由于含有卡介苗会有少许絮状物和沉淀,使用前应将其混悬
操作方法:
1. 取等体积的佐剂和抗原液混合(将抗原溶于生理盐水或PBS),进行乳化操作。乳化的好坏,会直接影响抗体产生的效果。
2. 可根据体积采取下列方法之一进行乳化:
(1)乳化少量抗原时(少于1ml),可先将佐剂吸至试管(或离心管)中,边涡旋,边加入等量抗原液,在涡旋器上剧烈涡旋,直到完成乳化。
(2)乳化中等量抗原时(数毫升),可用两个玻璃注射器,用三通连接,一支注射器吸佐剂,另一支注射器吸等量的抗原液,避免进入空气,将注射器分别接在三通的相互垂直的口,转动三通阀门关闭第三个口,使两个注射器相通,反复推拉,直至推拉困难。
(3)乳化大量抗原时(大于10ml),使用匀浆器乳化。
其它如超声波乳化,研钵乳化都是可行的方法。
乳化效果的检验:用注射器吸取少量液体滴入温水中,如没有油膜扩散,说明乳化完全。