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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)
品Pai:百奥莱博
英文名:One step reverse transcription heat-resistant PCR Kit
产地:国产|进口
编号:ALH272
本试剂盒是专为一步法RT-PCR实验配制的,使用该试剂盒能够方便快捷的在同一个反应管内完成逆转录反应和PCR扩增反应。反应过程中无需打开管盖添加试剂,避免了污染的同时提高了检测灵敏度和实验效率。本试剂盒包括多点突变改造耐热M-MuLV逆转录酶、热启动HotMaster Taq DNA聚合酶和RNasinYZ剂mix、同时包含适用于逆转录和PCR扩增的优化独特反应体系。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失,与M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。同时该酶可以在高达50-60℃反转录,大大提高了复杂二级结构,GC含量丰富模板反转录效率,产量敏感度和特异性比一般试剂盒显著特高。
试剂盒组分(50次):
2×RT-PCR Mix——————————625μl
Enzyme Mix-———————————25μl
耐热RTase————————————25μl
RNase free H2O-—————————1.5ml
适用范围:适用于高拷贝、低拷贝基因检测;适用于高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。
注意事项:
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反应成功建议使用高质量的RNA模板
3. 不同的片段,所需ZJRNA模板用量不同,过多的RNA会YZ反应,建议根据反应调整模板用量。
4. 不能使用Oligo(dT) 和Random Primer 合成cDNA。
储存条件:-20℃,有效期半年。
本品别名:一步法耐热RT-PCR试剂盒|耐热一步法反转录PCR试剂盒
我公司的一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词:耐热一步法反转录PCR试剂盒,一步法耐热RT-PCR试剂盒
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2×Taq PCR Mastermix
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一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)关键词:耐热一步法反转录PCR试剂盒,一步法耐热RT-PCR试剂盒
·细胞组织蛋白/DNA/RNA分离提取试剂盒
编号:ALH025
英文名称:Tissue Cells RNA/DNA/Protein Isolation and Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒用于快速从同一个动物细胞或者组织样品中同时提取分离基因组DNA和总RNA和Protein。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA/DNA酶,然后裂解混合物DNA/RNA/Protein同时通过一个基因组DNA吸附柱,基因组DNA被吸附而RNA/Protein穿透滤过。DNA吸附柱上基因组DNA经过一系列漂洗-离心后洗脱得到纯净基因组DNA。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于RNA吸附柱上, 再通过一系列快速的漂洗-离心洗脱得到纯净的RNA。滤液经选择性沉淀得到Protein。无*酚、*仿DNA/RNA快速提取技术基础上配合独特的分离技术同时得到的RNA/基因组DNA纯度高,互不干扰。得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。基因组DNA也可以直接用于下游的Southern、酶切、PCR等各种试验。
试剂盒特点:
1.完全不使用有毒的*酚,*仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速,简捷,单个样品RNA/基因组DNA/Protein分离操作一般可在1小时内完成。
3.试剂盒的独特吸附柱和配方确保有效清除基因组DNA残留,一般情况下得到的RNA不需要DNase消化,可直接用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保RNA/基因组DNA高纯度,可直接用于下游各种实验。
试剂盒组份(50次):
裂解液RLT——————————————50ml
去蛋白液RW1—————————————40ml
漂洗液RW——————————————10ml
RNase-free H2O———————————10ml
70%乙醇———————————————9ml RNase-free H2O(DY次使用前按说明加指定量乙醇)
YZ物去除液IR———————————25ml
漂洗液WB——————————————15ml
缓冲液APP——————————————60ml
洗脱缓冲液EB————————————10ml
基因组DNA吸附柱和收集管———————50套
RNA吸附柱和收集管——————————50套
注意事项:
1. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量JD不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力,否则造成DNA残留或者产量降低。不同组织细胞种类RNA/DNA相差极大,例如胸腺DNA含量丰富,超过5mg就会超过柱子处理能力。COS细胞RNA含量丰富,超过3x106细胞就会超过柱子吸附能力。所以开始摸索实验条件时,如果不清楚样品DNA/RNA含量时宁可使用较少的样品处理量,如细胞不超过3-4x106,组织不超过10mg。将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
3. 裂解液RLT 、YZ物去除液IR、去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 该试剂盒如需要用于植物样品有其实多糖多酚次级代谢产物丰富的困难样品的DNA/RNA/Protein提取,请咨询技术人员,可能需要用到其它试剂。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留( DNase 消化也无法做到100% 无残留), 本公司的组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒,由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA分离清除技术,绝大多数DNA 已经被清除,不需要DNase 消化,可直接用于反转录PCR 和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时:
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提GX果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前,直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
储存条件:室温,有效期12个月。
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购一步法耐热RT-PCR试剂盒 核酸扩增(PCR)。
温馨提示:不可用于临床ZL。