BTN3092型溴化乙锭清除剂(EB清除剂)品Pai

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN3092型*化乙锭清除剂(EB清除剂)品Pai，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN3092型*化乙锭清除剂(EB清除剂)品Pai
编号：BTN3092
产地：国产|进口
英文名：EB scavenger
规格：100次
品Pai：百奥莱博
本品通过与*化乙锭(EB)分子中的*基反应和断开EB分子中的含氮杂环而有效破坏EB的分子结构，达到去除EB污染的目的，适用于清除溶液和物体表面污染的EB。

产品特点：
1. 能消除EB的荧光，并使其致突变性降低99%以上。
2.适用范围广泛，可用于含EB污染的水、*化铯溶液、电泳缓冲液(TAE、TBE、MOPS等)、有机溶剂(乙醇、异丙醇、异戊醇、异丁醇等)和受污染的多种物体表面(玻璃、不锈钢、塑料、地板、紫外滤光片等)。
3. 使用简单、方便、迅速。
4. 无色或浅黄色透明液体、无毒但有腐蚀性和刺激性气味。
5. 本品暴露于空气中的时间不宜过长，使用完毕请立即密封、保存于避光、通风处。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	100ml
溶液B	200ml
说明书	1份

储存条件：室温保存及运输，有效期一年。

使用方法：

一：清除水溶性溶液(如水、Tris、MOPS、*化铯等)中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于0.5mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液A:溶液B:被污染溶液=1:2:100的比例将溶液A和溶液B先后加入到溶液中(由于溶液混合初期会产生少量有害气体，所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 搅拌五分钟，室温静置20小时。
4. 用自备的饱和碳酸**溶液中和使其pH变为中性。
5. 检查清除程度。
6. 弃废液。
二：清除*化铯饱和的异丙醇中的EB
1. 用水将*化铯饱和的异丙醇溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按*化铯饱和的异丙醇溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五)，室温搅拌20小时。
3. 用自备的饱和碳酸**溶液中和，使溶液pH为中性。
4. 倒弃废液。
三：清除异戊醇和丁醇中的EB
1. 用水将溶液稀释使其EB浓度低于1mg/mL(如果EB浓度已经低于1mg/mL则可以直接进行下一步操作)。
2. 按溶液:EB Scavenger工作液=1:4的比例加入新鲜配制的EB Scavenger工作液(配制方法见五)，溶液分成两相，室温搅拌72小时。
3. 2克活性炭/100mL混合液的比例加入自备活性炭，再搅拌30分钟。
4. 过滤去活性炭。
5. 用饱和碳酸**中和液体混合液体使pH变为中性。
6. 倒弃废液。
四：清除物体表面的EB
1. 用浸泡过新鲜EB Scavenger工作液(配制方法见五)的纸巾擦洗物体表面污染处5次，每次更换新的纸巾。由于工作液pH为1.8，如果物体表面不耐酸(如玻璃、不锈钢、地板等)，直接进入第二步操作。但一般紫外透射滤光片可以直接用工作液处理。
2. 再用浸泡过水的纸巾擦洗物体表面污染处5次，每次更换新的纸巾。
3. 用紫外灯检查清洁效果，如果看不见EB荧光,可以进行下一步操作。如果还有可见的EB荧光,则重复第二步。(对不便于直接用紫外灯照射的污染处，可以将所用的纸巾中的溶液挤出，放置在紫外灯下比较荧光的强弱，一般荧光会逐渐变弱)。
4. 风干清洁过的物体表面。
5. 将用过的纸巾浸泡在EB Scavenger工作液中，静置至少一小时降解EB。
6. 丢弃纸巾。
7. 用自备的饱和碳酸**溶液中和工作液,使其pH为中性。
8. 倒弃废液。
五：新鲜EB Scavenger工作液的配制
1. 估计工作液的用量。
2. 按溶液A:溶液B:水=1:2:30的比例在化学通风橱中先后将水，溶液A和溶液B加入到大小合适的容器中室温搅拌10分钟混匀(由于配制时会产生少量有害气体，所以整个操作必须在化学通风橱中小心操作)。
3. 立即按上面的各种情况使用新鲜配制的工作液。使用者需戴手套，溅到皮肤上后立即用自来水冲洗。

关于BTN3092型*化乙锭清除剂(EB清除剂)品Pai的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·植物专用蛋白酶YZ剂
编号：BTN130528
英文名称：Protease Inhibitor for Plant
规格：1mL
本产品为植物蛋白酶YZ混合液，溶剂为DMSO。组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶YZ剂，YZ蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2.含有AEBSF、bestatin、E64、leupeptin、pepstatin A、0-phenanthroline等蛋白YZ剂。
3. 入到植物裂解液中，能特异性YZ丝*酸蛋白酶 、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶和*基肽酶的活性，维持蛋白的完整性。
4.与各种植物细胞裂解液兼容。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
临用前震荡混匀植物专用蛋白酶YZ剂(100×)，按照1mL本产品：30g植物细胞所得的裂解液的比例，将本产品加入到植物细胞裂解液中，混匀，裂解植物细胞，并继续后续的实验操作。


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·RNase H
编号：BTN120413
英文名称：Ribonuclease H
规格：600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶，产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物，该酶对单链的核酸，双链DNA或双链RNA不起作用。

产品用途：
1．通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2．DNA-RNA杂交体的检定。
3．在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4．mRNA的定量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以Poly(rA)*Poly(dT)为底物，在30℃、pH7.7的条件下，20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位

纯度：
1．50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．50U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。


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·DNA非变性PAGE上样液
编号：BTN100875
英文名称：DNA Native PAGE Loading Buffer
规格：1.5mL
本品是2×的DNA PAGE非变性电泳上样液，含有盐、EDTA和染料等。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独配制各种溶液。
2. 使用简单，电泳的DNA样品与本上样液1：1混合后即可直接上样。
3.染料分子小，染色时不会干扰DNA条带的观察。
4.可用于Gel-Shift等相关实验。
5.跟本公司DNA PAGE非变性电泳套装兼容。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·一站式MBP标签蛋白纯化套装
编号：BTN130871
英文名称：One-Stop MBP-Tagged Protein Miniprep Pack
规格：2mL
MBP(麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein)标签蛋白大小为40 kDa，由大肠杆菌K12的malE基因编码。MBP可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP可以融合在蛋白的N端或C端。MBP融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用10mM麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除MBP融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用MBP抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测MBP标签标记的重组蛋白。由于MBP融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中MBP常作为融合蛋白被广泛应用。本产品就是专门用于分离纯化MBP融合蛋白的试剂盒，其原理如下：


产品特点：
1．一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2．提供 2mL直链淀粉-琼脂糖介质，其ZD载量为10mg MBP蛋白/mL介质。
3．采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4．本介质可以反复使用多次。

试剂盒组成：

成分	规格
直链淀粉-琼脂糖介质	2ml
1 M Tris-HCl(pH7.4)	25ml
0.1 M EDTA溶液	25ml
2 M NaCl溶液	50ml
蔗糖	20g
PMSF(10mg/mL)	1ml
0.1mM MgCl2溶液	50ml
0.1 M麦芽糖溶液	25ml
层析柱(6mL)	1支
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，但介质需4℃保存，PMSF需要-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中(介质用量需要根据MBP蛋白产量决定，其ZD载量为10mg MBP蛋白/mL介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中)。
2．用5倍柱体积(柱体积指的是填料介质的体积，下同)自备去离子水洗柱，共3次。
3．用5倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。结合缓冲液的配方如下(以10mL为例)：

成分	用量	在结合缓冲液中的浓度
1M Tris-HCl(pH7.4)	0.2mL	20mM
0.1M EDTA溶液	0.1mL	1mM
2M NaCl溶液	1mL	200mM
自备去离子水	8.7mL	-

4．4℃ 5000g离心10分钟收集20mL表达菌液，弃上清，将细胞沉淀(约100mg)悬于2mL冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000g离心15分钟收集细胞沉淀后，再次悬于2mL冰冷的细胞洗涤液中。(用不加诱导物的菌液做对照样。)细胞洗涤液的配方如下(以10mL为例)：

成分	用量	在细胞洗涤液中的浓度
1M Tris-HCl(pH7.4)	0.1mL	10mM
2M NaCl溶液	0.15mL	30mM
自备去离子水	9.75mL	-

5．制备细胞裂解物：
1)如果所用载体不带MBP信号肽序列(如pMAL-c2)
a)超声破碎细胞，功率30 W，保持细胞低温(0℃)，直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。(超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。)
b)为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入35μl PMSF(10mg/mL)。
c)4℃下13000-15000g离心30分钟，以去除残留细胞和细胞碎片以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE电泳对照，其余样品用于纯化MBP融合蛋白，直接进入第6步。
2)如果所用载体带MBP信号肽序列(如pMAL-p2)
a)4℃ 5000g离心15分钟收集细胞，沉淀悬于1mL冰冷的现配的细胞裂解液中。细胞裂解液的配方如下(以10mL为例)：

成分	用量	在细胞裂解液中的浓度
1M Tris-HCl(pH7.4)	0.3mL	30mM
0.1M EDTA溶液	0.01mL	0.1mM
蔗糖	2g	20%(m/V)
自备去离子水	加水到10mL	-

b)加入25μl PMSF(10mg/mL)，室温搅动15分钟，于4℃ 13000-15000g离心10分钟收集细胞。
c)旋动细胞沉淀，加入2mL冰冷的0.1mM MgCl2溶液，4℃搅动10分钟。
d)休克细胞4℃ 13000-15000g离心10分钟，在上清中加入10mM Tris-HCl(pH7.4)(可将1 M Tris-HCl，pH7.4稀释100倍配制而成)至pH为7.4。
e)上清用0.22μm或0.45μm滤膜过滤，滤液用100倍体积的10mM Tris-HCl(pH7.4)(配方如上)4℃透析。
f)收集透析后样品，留样做 SDS-PAGE电泳对照，其余样品用于纯化MBP融合蛋白，直接进入第6步。
6．将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中(保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率)，收集流出液。
7．用10-15倍柱体积的结合缓冲液(配方见上表)进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8．使用5-10倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液(即目的蛋白组分)。麦芽糖洗脱液的配方如下(以10mL为例)：

成分	用量	在麦芽糖洗脱液中的浓度
1M Tris-HCl(pH7.4)	0.2mL	20mM
0.1M EDTA溶液	0.1mL	1mM
0.1M麦芽糖溶液	1mL	10mM
自备去离子水	8.7mL	-

9．将纯化得到的样品(包括流出液、洗杂液和洗脱液)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。
10．填料介质清洗：依次使用3倍柱体积的结合缓冲液和5倍柱体积的去离子水平衡介质，ZH再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡，然后保存在等体积的20%的乙醇中，置于4℃保存，防止填料被细菌污染。本介质可重复使用。
蛋白酶切割释放靶蛋白(可选步骤，所用试剂需自备)
11．用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1)加入自备的凝血酶、肠激酶或Xa因子(根据融合蛋白中的位点选择)。每毫升介质中加入50单位的溶于1mL PBS溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡2-16小时。
2)4℃以500 g离心5分钟，上清小心转移到新离心管中。
3)用传统的层析方法或SDS-PAGE电泳分离靶蛋白和蛋白酶。

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