BTN131119型HRP稳定剂/稀释剂现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、YL及其他非科研用途。

BTN131119型HRP稳定剂/稀释剂现货供应由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多HRP稳定剂/稀释剂等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：BTN131119型HRP稳定剂/稀释剂现货供应
编号：BTN131119
品Pai：百奥莱博
规格：250mL
英文名：HRP Stablizing Solution
本产品可用于稀释HRP偶联物而不会损失酶活性，本产品可在室温下保存稀释过的(1-1000 ng/ml)HRP偶联物超过6个月而不会损失酶活性。

产品特点：
1. 兼容性好–仅需加入所需的封闭缓冲液即可制备对于基于HRP的理想的稀释液。
2. 方便–不需要分装即可在冰箱内储存即用型的稀释溶液(1:1000～100000)而不会损失酶活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

关于BTN131119型HRP稳定剂/稀释剂现货供应的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞
编号：BTN140218
英文名称：E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
规格：10*100μl
本产品是采用大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因，对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用，特别适合用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。

产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达107，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. DB3.1感受态细胞具有链霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型：F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


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·无缝克隆试剂盒
编号：BTN160680
英文名称：Seamless Cloning and Assembly Kit
规格：25次
无缝克隆是一种简单、快速、GX的DNA 定向克隆技术，该技术突破传统，不依赖内切酶和连接酶，不受限制性内切酶酶切位点的限制，利用同源重组的原理，可将任何DNA片段克隆至任何载体的任何位点。反应及转化时间短，阳性率达95%以上。

产品特点：
1. 简单、GX地定向克隆DNA片段。
2.可同时定向克隆两个或多个DNA片段。
3. 不依赖内切酶和连接酶，不受限制性内切酶酶切位点的限制。
4. 省时，反应时间加转化时间短至20分钟。
5. PCR产物(仅有目的条带、无非特异条带和引物二聚体)可直接进行重组反应，无需纯化。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×Seamless Mix	125μl
阳性对照DNA片段I	10μl
阳性对照DNA片段II	10μl
阳性对照线性化载体	10μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

1. 线性化载体的制备：
 可通过单酶切、双酶切或PCR扩增的方法来制备。(如果线性化不彻底，将会导致阴性克隆的产生，推荐使用双酶切或PCR扩增的方法。)
2. DNA片段的制备：
 1)DNA片段可通过PCR扩增或酶切的方法制备，PCR扩增片段无需纯化即可用于重组反应。
 2)PCR扩增法引物设计原则：
  A.引物的3´端必须包含18-50个能与模板DNA 结合的碱基序列，以便PCR扩增出目的DNA片段。
  B.引物的5´端必须包含15-80个与线性化载体末端同源的碱基序列，以便PCR扩增片段能与线性化载体进行重组反应。
3. 重组反应：
 1)按照如下体系操作：
 2)50℃反应15分钟，然后将离心管放置于冰上。如当天不进行转化实验，请将连接产物放-20℃保存。
 注：线性化载体建议使用20-60 ng，DNA片段按照与线性化载体摩尔比3：1使用。
4.转化：
 1)取5μl连接液至50-100μl 刚刚融化的感受态细胞中，轻轻混匀，冰浴2-30分钟。
 2)42℃水浴热激30秒。
 3)立即放置于冰上静置2分钟。
 4)加入300-500μl 无菌SOC或LB培养基(不含抗生素)，37℃，200-250rpm 振荡培养60分钟。
 5)吸取 200μl菌液涂板，为得到更多克隆，可先3000 g离心2分钟，弃掉部分上清，用移液器轻吹菌体，至充分悬浮，取全部菌液涂板，然后37℃培养过夜(12-16小时)。
5. 用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定重组子。
6. 阳性对照反应(可选)
 将本试剂盒提供的阳性对照DNA片段和线性化载体按如下体系操作：
阳性对照DNA片段I(600bp，20 ng/μL)

或阳性对照DNA片段I(900bp，30ng/μL)

1μl
阳性对照线性化载体(2.8kb，30ng/μL)	1μl
2×Seamless Mix	5μl
超纯水	3μl

 50℃反应15分钟，然后按照步骤4转化涂板后用菌落PCR、直接测序或其他方法鉴定阳性重组子。


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·即用型BSA蛋白标准品系列
编号：BTN131072
英文名称：Instant BSA Standard
规格：7×1mL
本产品为预稀释型BSA蛋白标准品。性质稳定，过滤CJ，是配合BCA试剂和Bradford试剂测定蛋白浓度时的理想选择。

产品特点：
1．七个数据点，浓度范围为125-2000微克/毫升。
2．本产品可用于快速制备标准曲线或者微孔板曲线。
3．使用方便，无需自己准备梯度稀释液。
4．产品稳定，消除时间差异和操作差异。

产品组成：

成分	规格
BSA溶液，125μg/mL	1ml
BSA溶液，250μg/mL	1ml
BSA溶液，500μg/mL	1ml
BSA溶液，750μg/mL	1ml
BSA溶液，1000μg/mL	1ml
BSA溶液，1500μg/mL	1ml
BSA溶液，2000μg/mL	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

使用举例：BCA法微孔板测定蛋白质浓度
1．取各个稀释浓度的BSA蛋白标准品和待测蛋白质样品各25μL，加入到微孔板中。
 注：如果样品有限，则可取标准品和待测未知样品10μL。
2．在每一个孔中加入200μL BCA测定工作液(本试剂盒不提供)，并在震荡器上震荡30秒，使其充分混合。
3．将微孔板密封，在37℃孵育30分钟。
4．将微孔板冷却到室温。使用微孔板读数仪，测量样品在562nm或该波长附近的吸光值。
5．将各个标准品和待测蛋白质样品在562nm处的吸光值减去空白标准品在 562nm处的平均吸光值。
6．将BSA标准品在562nm处经过空白校正的平均吸光值对其浓度(μg/mL)作图，绘制标准曲线。
 注：如果使用与微孔板读数仪相关联的曲线拟合算法，四参数(二次方程)或ZJ曲线拟合将会比简单的线性拟合提供更加准确的结果。如果手工对这些结果作图，对于标准曲线上的各个点，采取点对点描画曲线的方法，比直接进行线性拟合的结果更好。

注意：若采用Bradford法、BCA试管法等其他方法测定蛋白浓度，实验步骤略有差异，详细操作方法请参考蛋白质浓度测定实验工具书。

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