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百奥莱博专业生产销*(代"售")烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)现货
品Pai:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:Alkyladenine DNA Glycosylase
规格:500U
编号:BTN130643
人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)作用于烷基化和氧化了的DNA 损伤位点,包括3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙*(代"烯")基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG催化 N-糖苷键的水解断裂,释放受损碱基。其反应示意图如下:
产品特点:
1.单细胞凝胶电泳(彗星试验);
2.碱洗脱;
3.碱解旋。
产品组成:
组份 | 规格 |
hAAG(10000U/mL) | 50μL |
10×Buffer | 1mL |
使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位是指在10μl反应体系中,37℃条件下,1小时从1pmol含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链产生一个AP位点所需的酶量。
热失活:65℃,20分钟。
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烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)现货关键词:烷基腺嘌呤DNA糖基化酶,BTN130643,Alkyladenine DNA Glycosylase,烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
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烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)现货关键词:烷基腺嘌呤DNA糖基化酶,BTN130643,Alkyladenine DNA Glycosylase,烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
·10×TBE电泳液
编号:BTN90313
规格:250mL
·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase)
编号:BTN170103
英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
规格:250mL
·湿法电转液(干粉)
编号:BTN100928
英文名称:Wet Transfer Buffer Powder
规格:20L
本产品配制的溶液适用于湿转时,湿润、浸泡电转膜及垫子和用作电转工作缓冲液。用前直接加入蒸馏水与甲醇混匀即可。不含有机溶剂,便于储存和运输,且操作简便,一般适合分子量在100KD以上的蛋白。本产品可以回收重复使用2-3次,节约研发成本,如果转膜液颜色变成浅棕色或黄褐色,应该丢弃。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·柱式腐殖酸清除剂
编号:BTN60801
英文名称:Column Humic Acid Scavenger
规格:30次
用绝大多数文献报道的方法从土壤或湖海沉积物中提取的DNA都含有棕黑色或黑色的腐殖酸的污染,用百奥莱博的土壤DNA提取试剂盒从泥碳(腐殖酸含量超过50%)等腐殖酸丰富的土壤样品中提取的DNA也有腐殖酸污染,它们往往对PCR等后续反应有极大的YZ作用。本产品专门用于从土壤DNA样品中清除腐殖酸污染。
产品特点:1.去污染效果好,能使腐殖酸的浓度降低10倍以上。
2.DNA回收率高,一般都在80%以上。
3.操作过程简单快速,只需要10分钟。
4.扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。
5.处理后的样品原液或稍微稀释后即可用于PCR。
试剂盒组成: 成分 | 规格 |
专用上柱液 | 9ml |
离心吸附柱 | 30套 |
通用洗柱液 | 30ml |
DNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:1.将0.3mL专用上柱液与50μl或50μl以下的含腐殖酸的DNA溶液轻柔混匀。如果DNA溶液体积超过50μl,专用上柱液的体积需按1:6(DNA溶液:专用上柱液)的比例相应增加。不要剧烈震荡,否则DNA容易断裂。
2. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中,套上收集管,放于离心管架上,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟并倒掉收集管中的液体。若一次加不完,可分两次加入并离心。
3. 加入0.5mL通用洗柱液于离心柱中,12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
4. 重复第3步操作1次。
5. 12000~15000g离心1分钟以去除离心柱中的残留液体。
6. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入50μl通用洗脱液,静置3~5分钟,12000~15000g离心1分钟。
7.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
使用效果:图注:从泥碳(腐殖酸含量大于60%)中提取的DNA用本产品处理前(B)和处理后(A)的颜色对比。处理前OD340为4.0(4为所用分光光度计的上限,实际读数可能远高于4),处理后降低到0.3。处理前的原液、10倍和100倍稀释液均无PCR扩增,而处理后均可以扩增。
疑难解答:Q: 如何判断提取的DNA没有腐植酸污染?
A:方法一是目测法,即看得到的溶液是否无色。如果呈淡棕黑色或淡黄色,说明可能是少量残留的未除尽的腐植酸。方法二是检测ZD光吸收。注意:有腐植酸污染并不表示DNA不能使用,有的腐殖酸并不YZPCR扩增。
Q: 腐殖酸的ZD吸收波长是多少?
A:腐植酸(humic acid)是一大类呈棕黑色或黑色的物质,其结构千差万别,土壤中腐殖酸的组成和特点随土壤不同而不同,所以其ZD吸收波长也各不相同。有的土壤的腐殖酸的ZD吸收波长在260nm(见Appl. Environ. Microbiol.,63:4993,1997),有的则在340nm,所以用特定的波长测定OD值时波长的选定要根据土壤而决定。Sigma,Fluka等公司出售的腐植酸产品成分一般比较简单,其ZD吸收波长不能推广到成分更为复杂的土壤腐殖酸样品。
Q:是否腐植酸都会YZ后续的DNA反应?
A:否,因为腐植酸是一大类物质的统称,他们的结构和特性各不相同,所以是否对后续反应有影响通过实验来验证。如果用提取的DNA溶液原液进行反应而反应没发生,而对照样品(已知的不含污染的DNA)能够发生,说明可能有YZ作用。
Q:除本方法外,还有什么有效方法去除DNA样品中的腐植酸?
A:可以先电泳,然后用超大片段胶回收试剂Magic Gel DNArc(BTN60706)纯化DNA,如此得到的DNA原液一般可以直接扩增。
Q:本产品与柱式DNArc有何区别?
A:本产品由柱式DNArc改进而来,主要区别一是使用了不同的上柱液,减少了硅胶膜对DNA的非特异吸附,更适用于微量DNA样品;二是上柱液中含有腐殖酸去除试剂,适合于土壤DNA样品。
Q:在用土壤DNA进行细菌专一性PCR时,为何没加DNA模版的阴性对照有扩增产物出现?
A:这是由于使用的Taq DNA聚合酶一般从E.coli表达菌株中提取,提取过程中污染了E.coli的基因组DNA,而使用的广谱细菌专一性引物可以识别所有细菌DNA基因组DNA模版,所以会产生扩增。建议使用高质量的Taq DNA聚合酶。
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温馨提示:不可用于临床ZL。