AMV逆转录酶 工具酶

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应AMV逆转录酶 工具酶，产品信息：

类别：工具酶

英文名：AMV Reverse Transcriptase

品Pai：百奥莱博

英文名：AMV Reverse Transcriptase

规格：200U

产地：国产|进口

编号：BTN90502

AMV逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒(AMV)，其方法由Houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157KD的αβ全酶。本酶经高度纯化，完全无核酸酶污染。本酶可用于cDNA合成，也可用于RNA和DNA的双脱氧测序。AMV逆转录酶以总RNA或polyA+ RNA为模板，具有以RNA为模板的DNA聚合酶活性，DNA为模板的DNA聚合酶活性和RNase H酶活性，最适反应温度在42-55℃，ZG可达60℃，如果使用焦磷酸*，最适温度为37-41℃。按照标准使用方法可以得到长至10-12 kb cDNA。本AMV逆转录酶比普通AMV逆转录酶和MMLV逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cDNA。

产品特点：

1．高灵敏度,可以1ng的总RNA进行cDNA合成。

2．反应温度可升高到60℃，可有效打开RNA二级结构，适用于二级结构复杂的RNA模板。

3．可合成长至10-12kb的cDNA。

4．可用于first strand cDNA合成、RT-PCR、RNA测序和双脱氧法DNA测序、引物延伸和DNA片段的3´-末端标记。

5．本酶具有内源性的RNase H活性，所以不要用于cDNA文库的构建。

产品组成：

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以poly(rA)为模板，以oligo(dT)12-18 为引物，在37℃温度下，在10分钟将1nmol的dTMP掺入入到多核苷酸中所需酶量为一个单位。

使用方法：(合成1st-strand cDNA)

1．按下表配制RT反应体系:

2．70℃保温5分钟后立即冰浴。

3．严格按下表顺序加入各成分：

4．补水使反应终体积为25μL。

5．42℃保温60分钟(对Oligo dT引物或模板专一引物)或37℃保温60分钟(对随机引物)。如果不使用焦磷酸*，反应温度可以提高到42-55℃，ZG可达60℃。

6．70℃保温10分钟以终止反应，放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作为PCR模板使用，不需要纯化。50μL Taq DNA聚合酶催化的PCR体系中最多可以使用25μL的RT产物，一般使用10μL AMV催化的RT产物即可。

AMV逆转录酶 工具酶专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

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