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北京动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)价格由老Pai试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)等RNA纯化产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)价格
产地:国产|进口
规格:50次
品Pai:百奥莱博
英文名:Animal RNA column extraction kit(Trizol)
编号:BTN71201
本试剂盒是动物总RNA快速提取试剂动物RNA提取试剂盒(BTN3070)的柱式升级产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. RNA 纯度更高,OD260/OD280一般在2.0左右。
3.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
4.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
5. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
6. 性价比高于进口的柱式RNA提取产品。
试剂盒组成:
成分 | 50T |
溶液A | 50ml |
溶液B | 25ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA 洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10 平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106 悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg 组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold 保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL溶液A需0.2mL *仿),振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 12000rpm室温离心3~5分钟。
4. 将上清液(约0.6-0.8mL的无色透明水相,有时水相比重大时,水相在下层,有机相即蓝相在上层,吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意:离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μl上清液不取。同时吸取上清时缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
6. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
10.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
11. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中,加入50-100μL RNA 洗脱液。
12.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA 用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA 专用上样液RNAload(操作详见RNAload 使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
14. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
15. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
16. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,我们初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。
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除
北京动物RNA提取试剂盒(柱式Trizol)价格外,我公司正在打折促销以下产品:
·放线菌*(代"素")D
编号:BTN120680
英文名称:Actinomycin D Solution
规格:1mL
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素;Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16,分子量:1255.41。可作为代谢YZ剂,细胞质膜研究。它能YZRNA的合成,作用于mRNA,干扰细胞的转录过程,阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。
抗性机制:放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构,通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用,使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中,与DNA形成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,YZRNA的合成,特别是mRNA的合成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
·miRNA分离纯化试剂盒(凝胶法)
编号:BTN130972
英文名称:miRNA isolation Kit(Gel method)
规格:50次
本品为浓度为1mg/mL 放线菌*(代"素")D的DMSO溶液。放线菌*(代"素")D(更生霉素;Cosmegen、Meractinomycin),分子式为C62H86N12O16,分子量:1255.41。可作为代谢YZ剂,细胞质膜研究。它能YZRNA的合成,作用于mRNA,干扰细胞的转录过程,阻止蛋白质的合成。吞食有极高毒性。
抗性机制:放线菌*(代"素")D分子中含有一个*氧环结构,通过它连接两个等位的环状肽链。此肽链可与DNA分子的脱氧鸟嘌呤发挥特异性相互作用,使dactinomycin D嵌入DNA双螺旋的小沟中,与DNA形成复合体,阻碍RNA多聚酶的功能,YZRNA的合成,特别是mRNA的合成。
储存条件:低温运输,-20℃避光保存,有效期6个月。
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ARB12588 大鼠基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA检测服务 Rat matrix metalloproteinase 3,mmp-3 ELISA KIT
山达胶 Sarcosine methyl ester HC1 9000-57-1
ARB10104 人FMS样酪*酸激酶3配体(Flt-3L)Elisa分析 Human fms-like tyrosine kinase 3 ligand,flt-3l ELISA KIT
ARB12986 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-FodrIn IgG/IgA)elisa检测操作说明书 Mouse anti-alpha-fodrin igg/iga,α-fodrin igg/iga ELISA KIT
16178-48-6 二磷酸腺苷二* ADPNa2
BTN80905 大提柱式细菌RNAOUT Maxi Column Bacterial RNAOUT
2,2,6,6-四甲基-1-哌*(代"啶")酮 D-Alanine 2564-83-2
59-23-4 D(+)Galactose D-半乳糖
DNA Marker III(200~4500bp)
298-96-4 TTC 2,3,5*化三*基四氮唑
BL0898 FITC标记羊抗人纤维蛋白原抗体
BTN130618 T7 DNA聚合酶(未修饰) T7 DNA Polymerase(unmodified)
酚酞-尼罗蓝指示剂 100ml
*丙*(代"酮")酸 Boc-L-Hydroxyproline 156-06-9
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BTN130812 凋亡DNAOUT Apoptotic DNAOUT
F050305 猪IgG抗体 Pig IgG
PY04-021 新生霉素 4.5mg/支×10支 每支添加于225 ml改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB),用于食品和动物饲料中大肠杆菌0157的增菌培养
DL-正缬*酸 Phenylpyruvic acid 760-78-1
BL1272 酚:*仿=25:24(PH>7.8)
L-苹果酸 trans-4-Methoxycinnamic acid 97-67-6
尿血红蛋白定性检测试剂盒(化学法) 60T
7791-18-6 Magnesium chloride hexahydrate *化*六水
ARB12817 小鼠乙酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)含量测试
Caspase 3 活性检测试剂盒(比色法) 50T|100T
F030822 BIOTIN标记兔抗人IgG FC抗体 Rabbit Anti-Human IgG(FC)*BIOTIN
69-52-3 *苄青霉素 Ampicillin
SJ0130 Cellulose DE-52 纤维素 DE-52
D-对羟基*甘*酸 Complex amino acid 22818-40-2
F030418 胶体金标记兔抗猪IgG抗体 Rabbit Anti-Pig IgG*GOLD
PY02-111 B-P增菌液 250克
DP335 0.1-1ml血凝块基因组DNA提取试剂盒
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温馨提示:不可用于临床ZL。